二氧化碳培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)、微生物、農(nóng)業(yè)科學(xué)、藥物學(xué)的研究和生產(chǎn),主要用于為細(xì)胞、組織的體外培養(yǎng)提供穩(wěn)定的培養(yǎng)環(huán)境。因此選擇二氧化碳培養(yǎng)箱就要注重以下幾個(gè)指標(biāo):
一、溫度控制
溫度加熱方式一般分水套式和氣套式。水套式適合實(shí)驗(yàn)環(huán)境不太穩(wěn)定(如有用電限制或經(jīng)常停電)的用戶選用,氣套式特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開(kāi)關(guān)取放樣的培養(yǎng)。此外,對(duì)于使用者來(lái)說(shuō)氣套式設(shè)計(jì)比水套式更簡(jiǎn)單化(水套式需要對(duì)水箱進(jìn)行加水、清空和清洗,并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運(yùn)作的情況,還有潛在的污染隱患)。
精確可靠的溫控系統(tǒng)是培養(yǎng)箱不可或缺的重要部分。目前市面上主流的溫度傳感器有兩線制和四線制PT100溫度傳感器,其中四線制比兩線制更為精確。用戶應(yīng)選用高精確度的溫度傳感器并且具備相互獨(dú)立多重溫度控制功能的二氧化碳培養(yǎng)箱,即箱內(nèi)溫度控制、高/低溫報(bào)警、多重過(guò)溫保護(hù)等。同時(shí),在選擇氣套式的培養(yǎng)箱時(shí),培養(yǎng)箱內(nèi)還應(yīng)裝有風(fēng)扇以保證箱內(nèi)空氣的循環(huán)和流通,保證箱內(nèi)的溫度、CO2濃度、相對(duì)濕度的專一性。
二、二氧化碳濃度控制
CO2濃度可以通過(guò)紅外傳感器(IR)或熱導(dǎo)傳感器(TC)進(jìn)行監(jiān)測(cè)。熱導(dǎo)式技術(shù)成熟,易漂移,但是受環(huán)境影響比較大,精確性比較差。當(dāng)需要精確的培養(yǎng)條件和頻繁開(kāi)啟培養(yǎng)箱門時(shí),此控制系統(tǒng)就顯得不太適用了。紅外傳感精確,應(yīng)用在進(jìn)氣口具有HEPA高效空氣過(guò)濾器的培養(yǎng)箱較合適。
無(wú)論哪種CO2測(cè)量系統(tǒng)在使用一段時(shí)間后都會(huì)產(chǎn)生漂移,而產(chǎn)生漂移后直接會(huì)導(dǎo)致箱體內(nèi)二氧化碳濃度不能穩(wěn)定在預(yù)設(shè)的設(shè)定值,致使培養(yǎng)失敗,所以建議在選購(gòu)培養(yǎng)箱時(shí)必須要選擇帶有CO2測(cè)量系統(tǒng)自動(dòng)校準(zhǔn)功能的二氧化碳培養(yǎng)箱。
三、相對(duì)濕度控制
箱內(nèi)濕度對(duì)于培養(yǎng)工作來(lái)說(shuō)是一項(xiàng)非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。目前大多數(shù)的二氧化碳培養(yǎng)箱是通過(guò)水盤的蒸發(fā)作用產(chǎn)生濕氣的,其產(chǎn)生的相對(duì)濕度水平可達(dá)95%左右,但開(kāi)門后濕度恢復(fù)速度很慢。我們?cè)诖私ㄗh用戶在選購(gòu)二氧化碳培養(yǎng)箱的時(shí)候盡量選擇帶濕度控制系統(tǒng)的二氧化碳培養(yǎng)箱,能更好的監(jiān)控和調(diào)節(jié)相對(duì)濕度,保證培養(yǎng)的正常進(jìn)行。
四、防污染
污染是導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)失敗的另一個(gè)主要因素,因而,方便、高效的消毒滅菌技術(shù)的是必不可少的。目前常用的滅菌技術(shù)有:90度濕熱滅菌、、160度干熱滅菌、180度干熱滅菌、純銅內(nèi)膽、紫外燈照射、消毒劑擦拭等。其中,90度濕熱滅菌,被證明是有效的滅菌方式,但用時(shí)太久,高達(dá)25小時(shí);溫度高于140度的干熱滅菌被證明是有效的滅菌方式,160度干熱滅菌,溫度居中,既能有效殺滅細(xì)菌(包括嗜熱菌)又不至于損壞電子器件,是干熱滅菌的溫度;180度干熱滅菌溫度太高,對(duì)電子器件有一定的損傷,因此會(huì)限制滅菌的次數(shù);50%以上的含銅材質(zhì)具有一定的抑菌和滅菌的效果,但是在濕熱的環(huán)境中極易生銹;紫外燈照射受照射時(shí)間、照射的強(qiáng)度、有無(wú)遮擋物等影響,不能保證滅菌效果;消毒劑擦拭只有擦到的部位才能起到滅菌的效果,受表面形狀、光潔度等影響。因此我們建議客戶選購(gòu)二氧化碳培養(yǎng)箱時(shí)滅菌方式采用160度干熱滅菌,并且應(yīng)該是全箱體滅菌,最大可能降低污染的發(fā)生。
五、其它因素
二氧化碳培養(yǎng)箱的容積也是一個(gè)不可忽略的因素,買小了不夠用,大了又浪費(fèi)又占地方。二氧化碳培養(yǎng)箱的可選容積非常廣,而且每種類型又有不同的容積可選。此時(shí),就需要您在選購(gòu)前對(duì)所需培養(yǎng)箱容積的范圍有一個(gè)比較準(zhǔn)確的了解,并在此基礎(chǔ)上多預(yù)留一點(diǎn)空間,以保證不時(shí)之需。另外一些其他功能也是客戶選購(gòu)時(shí)按照自己的需求需要考慮的,比如氣瓶自動(dòng)切換、文件記錄功能、氧氣濃度控制等。
今天講下二氧化碳培養(yǎng)箱的使用方法,主要是針對(duì)剛剛應(yīng)用二氧化碳培養(yǎng)箱的新手,需要注意的事項(xiàng)。
首先、 做好使用前的準(zhǔn)備工作
二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負(fù)責(zé)使用,操作盤上的任何開(kāi)關(guān)和調(diào)節(jié)旋扭一旦固定后,不要隨意扭動(dòng),以免影響箱內(nèi)溫度,二氧化碳濃度,濕度的波動(dòng),同時(shí)降低機(jī)器的靈敏度。箱子的放置要水平,避免陽(yáng)光直射和灰塵等,要保證儀器周圍的氣流循環(huán),后部及側(cè)面應(yīng)留出5 cm的空隙。加裝穩(wěn)壓電源保證電源電壓波動(dòng)不超過(guò)220 V±10%。所加入的水必須是蒸餾水或無(wú)離子水,防止礦物質(zhì)儲(chǔ)積在水箱內(nèi)產(chǎn)生腐蝕作用,經(jīng)常檢查箱內(nèi)水是否足夠,水位應(yīng)加至“水位指示燈”滅燈時(shí)為止。使用前箱內(nèi)應(yīng)用消毒酒精或碘溶液徹底擦洗,防止其他微生物污染,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。在房間安裝空調(diào),使環(huán)境溫度保持在25~C左右。所使用的二氧化碳必須是純凈的,否則降低二氧化碳傳感器的靈敏度和污染二氧化碳過(guò)濾裝置。
其次、正確充氣延長(zhǎng)二氧化碳傳感器使用壽命
二氧化碳培養(yǎng)箱箱內(nèi)氣壓由二氧化碳氣體傳感器控制。二氧化碳傳感器正常反饋要求進(jìn)氣壓為Medical Equipment Vo1.22,No.4 0.06 MPa。當(dāng)箱內(nèi)氣壓降低時(shí),二氧化碳傳感器在低壓刺激下有節(jié)奏地開(kāi)閉,向箱內(nèi)慢慢充氣,當(dāng)進(jìn)氣壓達(dá)0.1 MPa時(shí),自動(dòng)停止調(diào)節(jié)。如充氣方法不當(dāng),使進(jìn)氣壓力增大,當(dāng)超過(guò)0.1 MPa甚至0.2 MPa壓力,會(huì)損傷二氧化碳傳感器。開(kāi)始這種損傷效應(yīng)不明顯,不易察覺(jué),反復(fù)錯(cuò)誤操作,二氧化碳傳感器損傷累積最終致命損壞,使氣壓調(diào)節(jié)失靈。因此,二氧 化碳傳感器壽命與二氧化碳進(jìn)氣壓大小有關(guān),只要做好進(jìn)氣壓調(diào)節(jié),就能保護(hù)二氧化碳傳感器性能。二氧化碳傳感器價(jià)格昂貴,更換不易,所以一定要做好進(jìn)氣壓調(diào)節(jié),延長(zhǎng)二氧化碳傳感器使用壽命。
第三、做培養(yǎng)時(shí)注意培養(yǎng)箱濕度
箱內(nèi)濕度對(duì)于培養(yǎng)工作來(lái)說(shuō)是一項(xiàng)非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。因?yàn)轱柡蜐穸拳h(huán)境可以避免培養(yǎng)液中二氧化碳逃逸,培養(yǎng)液中pH值穩(wěn)定,有利于細(xì)胞生長(zhǎng), 足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復(fù)速度(如在開(kāi)關(guān)門后)才能保證不會(huì)由于過(guò)度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。所以二氧化碳培養(yǎng)箱使用過(guò)程中,在箱內(nèi)托盤中放一 定量的滅菌水(3/2至全盤),使箱內(nèi)成為飽和濕度環(huán)境。如使用者忘記補(bǔ)加水,使培養(yǎng)細(xì)胞處于低濕度甚至干熱環(huán)境中,培養(yǎng)液二氧化碳?xì)怏w易揮發(fā),液體pH 值升高,影響細(xì)胞生長(zhǎng),在工作中要力求避免此問(wèn)題發(fā)生。樣本多時(shí),箱內(nèi)分區(qū)存放,培養(yǎng)物用筐或瓷盤存放,這樣存取快速,縮短開(kāi)門時(shí)間,減少箱內(nèi)氣體和濕度 變化,節(jié)省氣體,穩(wěn)定了細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境。
通過(guò)以上3點(diǎn)注意事項(xiàng),相信新手對(duì)二氧化碳培養(yǎng)箱的使用細(xì)節(jié)有了進(jìn)一步了解,更好的延長(zhǎng)二氧化碳傳感器使用壽命。