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夾芯式電泳槽的使用方法與注意事項(xiàng) 電泳槽操作規(guī)程

時(shí)間:2020-05-16    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  【中國(guó)儀器網(wǎng) 使用手冊(cè)】所謂電泳,是指帶電粒子在電場(chǎng)中的運(yùn)動(dòng),不同物質(zhì)由于所帶電荷及分子量的不同,因此在電場(chǎng)中運(yùn)動(dòng)速度不同,根據(jù)這一特征,應(yīng)用電泳法便可以對(duì)不同物質(zhì)進(jìn)行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M(jìn)行組份分析或單個(gè)組份提取制備,這在臨床檢驗(yàn)或?qū)嶒?yàn)研究中具有極其重要的意義。電泳儀正是基于上述原理設(shè)計(jì)制造的。下面簡(jiǎn)單介紹其使用方法及注意事項(xiàng)。
 

  
  一、如何使用電泳槽
 
  夾芯式垂直電泳槽使用方法:
 
  1、組成部件
 
  (1)裝有鉑金絲的貯液槽一對(duì),配有冷卻裝置及電泳緩沖液流出口。
 
  (2)凹型橡膠框,配有玻璃板,可分別制作厚度為lmm、1.5mm的凝膠板,操作時(shí)根據(jù)需要選擇適當(dāng)厚度的玻璃板及梳子配套使用。
 
  (3)樣品孔模具(梳子)用于電泳加樣。
 
  (4)固定貯液槽的螺絲桿及螺母4對(duì),28D、30型為5對(duì)。
 
  (5)橡膠管五根。兩根長(zhǎng)的用于連接冷卻水的出入口;中等長(zhǎng)度的兩根用于連接電極緩;中液的流出口;zui短的一根用于連接貯液槽間的冷卻水。
 
  (6)導(dǎo)線1付。
 
  2、使用方法
 
  (1)清洗部件
 
  上述部件組裝前要徹底清洗干凈。尤其是玻璃板及凹形帶槽橡膠框,必須用泡沫海綿沾少許肥皂粉或洗滌劑徹底清洗干凈。清洗后的玻璃板應(yīng)放在玻璃板支架上晾干水后方能使用。
 
  (2)組裝電泳槽
 
  A、將四只固定螺桿插進(jìn)一只貯液框(半上槽)的相應(yīng)孔洞中,然后將貯液框仰放在桌上;
 
  左手拿凹型槽橡膠??颍沂值哪粗概c中指握住玻璃板的兩側(cè)邊緣插到橡膠??騼?nèi) (注意手指不能接觸灌膠面的玻璃板);
 
  將帶有玻璃的橡膠模框子放在仰放的貯液槽框架上,其下緣必須對(duì)齊貯液槽框下緣;
 
  雙手拿另一只貯液槽框與仰放在桌上的貯液槽框相合,并使橡膠框上的凸出線位于貯液槽有機(jī)玻璃框中央;
 
  裝上四只螺母,擰緊螺絲。注意擰緊螺絲時(shí)用力應(yīng)均勻,用雙手按斜角位置雙雙逐漸擰緊;
 
  將電泳槽垂直豎起,放在桌上,帶短玻璃板的貯液槽稱上槽(陰極端),帶長(zhǎng)玻璃板的貯液槽稱為下槽(陽(yáng)極端),在長(zhǎng)玻璃板與橡膠框間有一縫隙。此縫隙可用已熔化的10%瓊脂沿長(zhǎng)玻璃板下端灌入,為防止留存氣泡,可稍抬起一端即可趕去氣泡。待瓊脂完全凝固后才能灌膠。
 
  B、也可將槽垂直豎起,將帶有玻璃的橡膠??蛑苯臃湃氩壑?,對(duì)稱擰緊螺絲后,用瓊脂封底邊。
 
  3、灌膠
 
  (1)先灌分離膠,待凝固后再灌濃縮膠。灌膠前接通冷卻水,夾緊連接上下貯液槽的兩根橡膠管。
 
  (2)用細(xì)頭滴管吸取膠液,沿長(zhǎng)、短玻璃板中間縫隙從一端加入膠液。為防止產(chǎn)生氣泡,可稍拾起另一端(氣泡往高處走),不斷加入膠液。若單層膠(分離膠)則加膠量約距離短玻璃板上端0.3厘米處,輕輕加少許水,雙手輕輕將梳子插入,待膠凝后就可形成凹形加樣孔。
 
  (3)為防止漏膠,在上、下貯液槽中立即加入蒸餾水,但蒸餾水不能超過(guò)短玻璃板上緣。
 
  (4)膠凝固后即可看到樣品槽梳子與凝膠板間有一層折
 
  射率不同的亮區(qū)。
 
  4、加樣
 
  (1)松開(kāi)連接上、下貯液槽兩根橡皮管上的夾子,放掉槽內(nèi)的蒸餾水,待水流完后,再夾緊夾子。
 
  (2)雙手輕輕取出樣品梳子,即可看到界線清楚的加樣孔,將孔中水分吸去(注意千萬(wàn)不要碰壞孔沿的字面)。
 
  (3)在上、下貯液槽中加入緩;中液,液體高度應(yīng)超過(guò)上貯液槽短玻璃板上緣。
 
  (40用微量注射器吸取一定量的樣品加到長(zhǎng)、短玻璃板間的凹型凝膠樣品孔內(nèi)(注意加樣動(dòng)作要輕,針頭不能碰壞膠面)。
 
  5、電泳
 
  一貯液槽導(dǎo)線與電泳儀的負(fù)極相連,下貯液槽導(dǎo)線與電泳儀的正極相連。檢查線路無(wú)誤,方可按照所要求的電壓電流進(jìn)行電泳。
 
  二、注意事項(xiàng)
 
  1、電泳儀通電進(jìn)入工作狀態(tài)后,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內(nèi)取放東西,如需要應(yīng)先斷電,以免觸電。同時(shí)要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
 
  2、儀器通電后,不要臨時(shí)增加或撥除輸出導(dǎo)線插頭,以防短路現(xiàn)象發(fā)生,雖然儀器內(nèi)部附設(shè)有保險(xiǎn)絲,但短路現(xiàn)象仍有可能導(dǎo)致儀器損壞。
 
  3、由于不同介質(zhì)支持物的電阻值不同,電泳時(shí)所通過(guò)的電流量也不同,其泳動(dòng)速度及泳至終點(diǎn)所需時(shí)間也不同,故不同介質(zhì)支持物的電泳不要同時(shí)在同一電泳儀上進(jìn)行。
 
  4、在總電流不超過(guò)儀器額定電流時(shí)(zui大電流范圍),可以多槽關(guān)聯(lián)使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
 
  5、某些特殊情況下需檢查儀器電泳輸入情況時(shí),允許在穩(wěn)壓狀態(tài)下空載開(kāi)機(jī),但在穩(wěn)流狀態(tài)下必須先接好負(fù)載再開(kāi)機(jī),否則電壓表指針將大幅度跳動(dòng),容易造成不必要的人為機(jī)器損壞。
 
  6、使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進(jìn)行檢修,以免發(fā)生意外事故。

電泳槽的常見(jiàn)問(wèn)題解決介紹

    電泳槽時(shí)凝膠時(shí)間不對(duì),那么通常膠在60min,1H內(nèi)凝;

    如果凝的太慢,可能是TEMEN,APS劑量不夠或者失效。

    APS應(yīng)該現(xiàn)配現(xiàn)用,TEMED不穩(wěn)定,容易被氧化成黃色。

    如果凝的太快,可能是APS和TEMED用量過(guò)多,此時(shí)膠太硬易裂,電泳時(shí)易燒膠。

    紋理和托尾現(xiàn):

    由于樣品溶解不佳引起的,克服的方法可以在加樣前離心,增加一些增溶輔助試劑如尿素。

    蛋白帶過(guò)寬,與鄰近泳道的蛋白帶相連時(shí)由于加樣量太多,可以減少上樣量。

    電泳時(shí)間比正常要長(zhǎng)。

    可能由于凝膠緩沖系統(tǒng)和電極緩沖系統(tǒng)的PH選擇錯(cuò)誤,即緩沖系統(tǒng)的PH和被分離物質(zhì)的等電點(diǎn)差別太小,或緩沖系統(tǒng)的離子強(qiáng)度太高。

    指示劑成微笑符號(hào)(指示劑前沿呈現(xiàn)向上的曲線形),說(shuō)明凝膠的不均勻冷卻,中間部分冷卻不好,導(dǎo)致分子有不同的遷移率所致。

    指示劑成哭臉?lè)?hào)(指示劑前沿呈現(xiàn)向下的曲線形),由于電泳槽的裝置不合適,尤其是凝膠和玻璃板組成的“三明治”底部有氣泡或靠近隔片的凝膠聚合不完全。

 

 

標(biāo)簽: 電泳槽
電泳槽 電泳槽的常見(jiàn)問(wèn)題解決介紹_電泳槽

怎樣解決電泳槽故障方法

  電泳槽密封條漏液(垂直槽)一般情況下,電泳槽較窄的密封條不易漏夜,反之較寬的則比較容易漏,此時(shí)先檢查:1、密封條是否老化或損壞,若已經(jīng)老化或損壞,應(yīng)更換密封條。2、如果密封條完好無(wú)損,目測(cè)檢查密封條是否有凹凸不平現(xiàn)象,如果有應(yīng)將密封條拆下進(jìn)行重新安裝。安裝時(shí)注意不要拉扯密封條,使其自然地嵌入密封槽內(nèi),并保證安裝均勻,避免密封條出現(xiàn)凹凸現(xiàn)象。3、如果緩沖液是從密封條的中間漏出,則說(shuō)明漏處比兩邊凹(不在同一水平線上),我們則需要把密封條拆下,清理干凈槽內(nèi)膠粘劑,然后再將薄厚相當(dāng)?shù)恼厳l(如0.4毫米)粘在槽內(nèi),以墊起凹下的密封條,使其與兩邊保持一致,此后再將密封條粘在槽內(nèi)即可。

  電泳槽內(nèi)無(wú)電流(鉑緊電極上無(wú)氣泡)1、首先利用萬(wàn)用表檢查電泳儀有無(wú)輸出電壓(注意選擇直流電壓擋,輸出不得超過(guò)量程,以免損壞萬(wàn)用表)2、利用萬(wàn)用表電阻擋檢查電泳輸出線是否導(dǎo)通。3、利用萬(wàn)用表電阻擋檢查電泳槽電極插座與鉑金絲之間是否可靠導(dǎo)通,重點(diǎn)檢查輸出插座與插頭是否與連接鉑金絲的焊片緊密連接,如發(fā)現(xiàn)松動(dòng)請(qǐng)使用尖嘴鉗將其緊固即可,完畢進(jìn)行檢測(cè)若還沒(méi)有電流則檢查鉑金絲是否斷裂,若鉑金絲有斷裂跡象則用電烙鐵將其焊接,首先將助焊劑涂在鉑金絲上再用電烙鐵粘上焊錫將斷裂的兩段鉑金絲焊連即可。鋁扳散熱效果不佳先檢測(cè)鋁板與玻璃板之間有無(wú)縫隙,若有縫隙首先應(yīng)緊固螺栓,如果經(jīng)堅(jiān)固螺栓仍無(wú)法使鋁板與玻璃板帖平,可將鋁板拆下清理上面的污垢,根據(jù)縫隙的大小用相應(yīng)厚度的墊片將鋁板墊起,并保證鋁板的四邊平整(墊平后的鋁板平面應(yīng)低于密封條3-4毫米)。

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電泳槽 怎樣解決電泳槽故障方法_電泳槽

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