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Diol二醇基色譜柱活動(dòng)相的配制和操縱留意點(diǎn) 色譜柱操作規(guī)程

時(shí)間:2020-05-16    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

Diol二醇基色譜柱有極強(qiáng)的化學(xué)穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性。因?yàn)闆](méi)有硅烷醇的作用,在對(duì)藥物胺類分析時(shí)有獨(dú)特的選擇性,且沒(méi)有拖尾現(xiàn)象。

 

Diol二醇基色譜柱活動(dòng)相的配制:

液相色譜是樣品組分在柱填料與活動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求活動(dòng)相具備以下的特點(diǎn):

a、活動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中(或長(zhǎng)時(shí)間保存在柱中)。

b、活動(dòng)相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外)。

c、活動(dòng)相的黏度要盡量小,以便在使用較長(zhǎng)的分析柱時(shí)能得到好的分離效果;同時(shí)降低柱壓降,延長(zhǎng)液體泵的使用壽命(可運(yùn)用進(jìn)步溫度的方法降低活動(dòng)相的黏度)。

 

Diol二醇基色譜柱實(shí)際操縱中應(yīng)留意以下幾點(diǎn):

1、接頭要配套,用同一廠商的組接件;

2、接頭之間、柱壓帽螺母與密封卡磁之間無(wú)微粒,否則收緊時(shí)輕易咬死;

3、密封卡套與柱管一次性卡緊后再也不能松動(dòng),所以拆開柱頭再上緊時(shí)要小心,不能使卡套移動(dòng),原來(lái)柱真?zhèn)€不銹鋼濾片和墊片的厚度和強(qiáng)度也不能改變(改變這些附件的性能就促使卡套移動(dòng));

4、接頭等組接件不要擰得過(guò)緊,適當(dāng)上緊后接上泵試驗(yàn),分步擰緊,直到不漏為止。還有非常重要的是柱硬件的損壞往往會(huì)造成不可挽回的損失。

色譜柱的老化步驟

  色譜柱老化的目的:是徹底除去填充物中的殘留溶劑和某些揮發(fā)性的物質(zhì);另一方面是促進(jìn)固定液均勻牢固地分布在擔(dān)體的表面上。而且新的氣相色譜柱必須老化?! ⊙b填好的色譜柱,連接于儀器上后,應(yīng)先試壓,試漏,而后在恒定的溫度下用載氣吹洗數(shù)小時(shí)后承受分析,一般稱此為柱子的老化過(guò)程。老化的目的是把固定相的殘存溶劑,低沸點(diǎn)雜質(zhì),低分子量固定液等趕走,使記錄器基線平直,并在老化溫度下使固定液在擔(dān)體表面有一個(gè)再分布過(guò)程,從而涂得更加均勻牢固。裝填好的色譜柱,經(jīng)過(guò)老化一段時(shí)間后,柱效及性能均穩(wěn)定了,這樣才可使用。  老化步驟:  1、打開氮?dú)狻錃?、空?font color="#0268CA">發(fā)生器的電源開關(guān),輸出壓力穩(wěn)定在0.4Mpa左右。  2、打開色譜儀氣體凈化器的氮?dú)忾_關(guān),當(dāng)色譜儀載氣B的柱前壓上升并穩(wěn)定大約5分鐘后,打開色譜儀的電源開關(guān)?! ?、設(shè)置各工作部溫度,柱箱初始溫度50℃,)進(jìn)樣器和檢測(cè)器都是250℃。  4、待檢測(cè)器溫度升到100℃以上后,打開凈化器上的氫氣、空氣開關(guān),色譜儀的氫氣穩(wěn)定在0.1Mpa,空氣壓力為0.15Mpa左右,觀察基線在氫火焰點(diǎn)著后的電壓值應(yīng)高于點(diǎn)火之前。  5、顯示屏左下方應(yīng)有藍(lán)字顯示當(dāng)前的電壓值和時(shí)間,待基線穩(wěn)定后進(jìn)樣品并同時(shí)點(diǎn)擊“啟動(dòng)”按鈕或按一下色譜儀旁邊的快捷按鈕,進(jìn)行色譜數(shù)據(jù)分析。分析結(jié)束時(shí),點(diǎn)擊“停止”按鈕,數(shù)據(jù)即自動(dòng)保存?! ?、首先關(guān)閉氫氣和空氣氣源,使氫火焰檢測(cè)器滅火。

標(biāo)簽: 色譜柱
色譜柱 色譜柱的老化步驟_色譜柱

聚合物基質(zhì)色譜柱的規(guī)格選擇

    聚合物基質(zhì)色譜柱具有相當(dāng)強(qiáng)的硬度,有無(wú)孔和有孔兩種規(guī)格。該固定相中含有苯基官能團(tuán),可與待測(cè)物發(fā)生疏水相互作用。

    與硅膠基質(zhì)的反相填料相比,PolyRP固定相的一個(gè)顯著優(yōu)點(diǎn)是可以在極端pH(1-14)條件下使用,盡管分離效率略有降低。它具有相當(dāng)強(qiáng)的硬度,有無(wú)孔和有孔兩種規(guī)格。

 

    該固定相中含有苯基官能團(tuán),可與待測(cè)物發(fā)生疏水相互作用。與硅膠基質(zhì)的反相填料相比,PolyRP固定相的一個(gè)顯著優(yōu)點(diǎn)是可以在極端pH(1-14)條件下使用,盡管分離效率略有降低。

    聚合物基質(zhì)色譜柱的安裝:

    a、拆開柱包裝盒,確認(rèn)色譜柱的類型、尺寸、出廠日期以及柱內(nèi)貯存的溶劑。

    b、擰下柱兩端接頭的密封堵頭放回包裝盒供備用。

    c、按柱管上標(biāo)示的流動(dòng)相流向,將聚合物基質(zhì)色譜柱的入口端通過(guò)連接管與進(jìn)樣閥出口相連接(如條件允許,建議在柱前使用保護(hù)柱);柱的出口與檢測(cè)器連接。連接管是外徑為1.57mm、內(nèi)徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管。

    在接管時(shí)一定要設(shè)法降低柱外死體積。連接管通過(guò)空心螺釘、壓環(huán)后盡量用力插到底,然后順時(shí)針擰緊空心螺釘,直到擰不動(dòng)為止,切記不要用力過(guò)大。如聚合物基質(zhì)色譜柱通過(guò)流動(dòng)相加壓后有漏液現(xiàn)象,請(qǐng)用扳手繼續(xù)順時(shí)針擰1/4圈,直至不漏液為止。

    聚合物基質(zhì)色譜柱主要基質(zhì)的特點(diǎn):

    a.硅膠

    硅膠是陶瓷性質(zhì)的無(wú)機(jī)物基質(zhì),剛性大,不易變形。

    化學(xué)性質(zhì)較穩(wěn)定,但對(duì)于水溶液尤其堿性水溶液仍然是不穩(wěn)定的,即使表面經(jīng)過(guò)良好的化學(xué)鍵合,覆蓋了固定液,還是要注意水、堿性溶液、酸性溶液對(duì)硅膠的溶解作用,基質(zhì)或者說(shuō)是柱床(packedbed)溶解對(duì)色譜柱的影響是致命的。

    以聚合物基質(zhì)色譜柱的填料構(gòu)成了目前絕大多數(shù)的色譜柱填料。純硅膠填料適宜分離溶于有機(jī)溶劑的極性、弱極性的非強(qiáng)離解型的化合物,硅膠也可以做凝膠色譜但柱效較低。

    聚合物基質(zhì)色譜柱鍵合固定相的高壓液相填料,有其他填料無(wú)法比擬的高分離效能。

    b.二氧化鋁

    二氧化鋁和硅膠相似,但對(duì)水溶液、酸性堿性水溶液溶液更加不穩(wěn)定。所以,極少用作鍵合固定相的基質(zhì),也是適宜分離溶于有機(jī)溶劑的極性、弱極性的非強(qiáng)離解型的化合物,尤其是分離芳香族碳?xì)浠衔铩K嵝砸纂x解的化合物容易在二氧化鋁上形成死吸附。另外,氧化鋁分離幾何異構(gòu)體能力優(yōu)于硅膠。

    c.聚合物填料

    聚合物基質(zhì)色譜柱受壓會(huì)變形,壓力限度低但pH使用范圍寬。苯乙烯-二乙烯苯基質(zhì)疏水性強(qiáng),使用任何流動(dòng)相,在整個(gè)pH范圍內(nèi)穩(wěn)定,可以用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿來(lái)清洗色譜柱。甲基丙烯酸酯基質(zhì)比苯乙烯-二乙烯苯疏水性更強(qiáng),但可以通過(guò)適當(dāng)?shù)墓δ芑揎椬兂捎H水性的。

    由于不耐壓、有溶脹性,所以聚合物填料適宜用于大分子像蛋白質(zhì)或合成的高聚物,另外還可以制成分子排阻、離子交換柱。大孔樹脂實(shí)際上主體就是苯乙烯-二乙烯苯聚合物或類似的合成高聚物。

    聚合物基質(zhì)色譜柱廣泛用于各種不同基質(zhì)中糖分子、糖醇和其他水溶性物質(zhì)的分離。可以用來(lái)分析有機(jī)酸及利巴韋林等物質(zhì),可以用來(lái)分離樹膠醛糖、阿糖醇等糖類。

標(biāo)簽: 色譜柱
色譜柱標(biāo)簽: 聚合物基質(zhì)色譜柱的規(guī)格選擇_色譜柱組合標(biāo)題:

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