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液相色譜儀柱壓問題處理方法 液相色譜解決方案

時間:2020-05-17    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  液相色譜儀是一種常見的液相色譜儀,這種儀器具有“四高一廣”的特點,既高壓、高速、、高靈敏、應(yīng)用范圍廣。作為常見的科研分析儀器,在確保檢驗的準(zhǔn)確性的同時,液相色譜做到了色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點,是科研人員進行研究的有利工具。
 
  當(dāng)然作為一款精密儀器,液相色譜儀對于操作具有一定的要求,而在使用時,難免可能發(fā)生一定的問題,今天我們就來講講面對柱壓問題,使用液相色譜儀應(yīng)該注意的要點。
 
  對于液相色譜儀來說,柱壓的穩(wěn)定與色譜圖峰的好壞、柱效、分離效果及保留時間等都有所關(guān)聯(lián)。一般來說,柱壓問題主要集中在壓力過高、壓力過低兩方面。
 
  壓力過高
 
  壓力過高一般指液相色譜儀使用時壓力突然升高的問題。
 
  原因1:流路中存在堵塞
 
  解決方法:進行分段檢查。首先斷開真空泵的入口處,此時PEEK管里充滿液體,使PEEK管低于溶劑瓶,看液體是否自由滴下,如果液體不滴或緩慢滴下,則是溶劑過濾頭堵塞。處理方法用30%的硝酸浸泡半個小時,在用超純水沖洗干凈。
 
  打開Purge閥,使流動相不經(jīng)過柱子,如果壓力沒有明顯下降,則是過濾白頭堵塞。處理方法將過濾白頭取出,用10%的異丙醇超聲半個小時。如果壓力降至100PSI以下,過濾白頭正常。
 
  把色譜柱出口端取下,如果壓力不下降,則是柱子堵塞。處理方法:如果是緩沖鹽堵塞,則用95%的水沖至壓力正常。如果是一些強保留的物質(zhì)導(dǎo)致堵塞,則要用比現(xiàn)在流動相更強的流動相沖至壓力正常。假如按上面的方法長時間沖洗壓力都不下降,則可考慮將柱子的進出口反過來接在儀器上,用流動相沖洗柱子。這時,如果柱壓仍不下降,只有換柱子入口篩板,但一旦操作不甚,很容易造成柱效下降,所以盡量少用。問題無法解決可考慮更換色譜柱。
 
  原因2:流速設(shè)定不正確
 
  解決方法:重新設(shè)定正確流量。
 
  原因3:流動相配比不正確
 
  解決方法:不同配比的流動相其黏度系數(shù)不相同,較高黏度的流動相相應(yīng)的系統(tǒng)壓力也大,如果可能可更換黏度較小的溶劑或重新設(shè)定配比。
 
  原因4:系統(tǒng)壓力零點漂移
 
  解決方法:調(diào)節(jié)壓力傳感器的零點。
 
  壓力過低
 
  原因1:系統(tǒng)泄漏
 
  解決方法:尋找各個接口處,特別是色譜柱兩端的接口,把泄漏的地方旋緊即可。拆下柱子加適當(dāng)力擰緊或襯四氟薄膜。
 
  原因2:泵里進混入空氣,此時表現(xiàn)的往往是壓力不穩(wěn),忽高忽低,更嚴(yán)重一點會導(dǎo)致泵無法吸上液體
 
  解決方法:打開Purge閥,用3~5ml/min的流速沖洗,如果不行,則要用專用針筒在排空閥處借住外力將氣泡吸出。
 
  原因3:無流動相流出
 
  解決方法:檢查儲液瓶中有無流動相,沉子是否浸在流動相中,泵是否運行。
 
  原因4:參比閥未關(guān)閉
 
  解決方法:將流速降低后關(guān)閉參比閥。一般降至0.1~0.2mL/min后關(guān)閉參比閥。

液相色譜柱的安裝

  液相色譜儀由高壓液體泵、檢測器及液相色譜柱等三部分組成,其中液相色譜柱的正確安裝和使用,是液相色譜工作的關(guān)鍵;也是液相色譜工作者獲得正確可靠的實驗數(shù)據(jù)的必經(jīng)之路?! ∫合嗌V柱的安裝:  1、液相色譜柱的結(jié)構(gòu):  a、空柱由柱接頭、柱管及濾片組裝而成?! ≈宇^采用低死體積結(jié)構(gòu),柱接頭是兩端螺紋組件,一端是為7/16英寸外螺紋,另一端是3/16英寸的內(nèi)螺紋(國內(nèi)外已規(guī)范化)。7/16英寸外螺紋與1/4英寸柱管(Φ6.35mm)連接,中間放置壓壞用于密封。3/16英寸的內(nèi)螺紋與1/16英寸(Φ1.57mm)的連接管連接,中間也放置壓環(huán)用于柱接頭的密封。為了盡量減少柱外死體積,在安裝色譜柱時,用Φ1.57mm連接管通過空心螺釘壓環(huán)后要盡量插到底,然后再擰緊空心螺釘。壓環(huán)被空心螺釘擠壓變形后緊箍在連接管上(連接管通過壓環(huán)后露出的管長度應(yīng)嚴(yán)格控制在2.5mm長或其他固定尺寸)?! ≡趦啥酥宇^內(nèi),柱管兩端各放置一片不銹鋼濾片(或濾網(wǎng)),用于封堵柱填料不被流動相沖出柱外而流失??罩鹘M件均為316#不銹鋼材質(zhì),能耐受一般的溶劑作用。但由于含氯化物的溶劑對其有一定的腐蝕性,故使用時要注意,柱及連接管內(nèi)不能長時間存留此類溶劑,以避免腐蝕。  b、柱填料:  液相色譜柱的分離作用是在填料與流動相之間進行的,柱子的分類是依據(jù)填料類型而定?! ≌嘀憾嘁怨枘z為柱填料。根據(jù)外型可分為無定型和球型兩種,其顆粒直徑在3—10 ?m的范圍內(nèi)。另一類正相填料是硅膠表面鍵合—CN,-NH2等官能團即所謂的鍵合相硅膠。  反相柱:主要是以硅膠為基質(zhì),在其表面鍵合十八烷基官能團(ODS)的非極性填料。也有無定型和球型之分?! 〕S玫钠渌姆聪嗵盍线€有鍵合C8、C4、C2、苯基等,其顆粒粒徑在3—10 ?m之間。

標(biāo)簽: 液相色譜柱
液相色譜柱 液相色譜柱的安裝_液相色譜柱

液相色譜柱填裝程序

  液相色譜柱、特別是高效液相色譜柱的填裝,需要有較高的技巧和熟練的技能。因此,有人甚至將“裝柱”看作是“藝術(shù)加技術(shù)”。但是,只要掌握了一些基本的規(guī)律和方法,任何實驗室都可以填裝出具有較高柱性能的色譜柱。當(dāng)然,目前大多數(shù)實驗室多是購買商品預(yù)填裝柱來滿足分離、分析之需。但是在一些有特殊需要的情況下,或為節(jié)省經(jīng)費,在實驗室中自行填裝高效液相色譜柱還是可取的。

  液相色譜柱填裝程序中應(yīng)該注意的問題:

  ①高壓操作的安全問題。常發(fā)生的問題是柱子與勻漿罐連接不牢,造成加壓時柱頭被高壓沖下或柱子從勻漿罐上滑脫。此時,輕則填裝失敗,材料損失,重則造成人身傷害事故,一定要加以防范。除每次填裝前均須仔細確認(rèn)是否連接正確且牢靠外,可以還可加上由法蘭盤和長螺桿組成的預(yù)防脫落裝置,以防萬一。

 ?、谕ǔ?,先填裝的柱床較后填裝的柱床緊密。因此,當(dāng)使用時宜以相反的方向為宜,即讓近勻漿罐一端作為使用時流動相的出口,而填裝時的出口端則作為流動相的入口。

 ?、坌轮邮褂们皯?yīng)以甲醇沖洗20-30min, 后,再改用流動相平衡。

 ?、苄轮右诉x適宜的標(biāo)準(zhǔn)樣品進行評價并記錄,以備存查和比較。

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液相色譜柱 液相色譜柱填裝程序_液相色譜柱

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