1、分析對象的區(qū)別 GC：適于能氣化、熱穩(wěn)定性好、且沸點較低的樣品；但對高沸點、揮發(fā)性差、熱穩(wěn)定性差、離子型及高聚物的樣品，尤其對大多數(shù)生化樣品不可檢測占有機物的20% HPLC：適于溶解后能制成溶液的樣品（包括有機介質(zhì)溶液），不受樣品揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制，對分子量大、難氣化、熱穩(wěn)定性差的生化樣品及高分子和離子型樣品均可檢測用途廣泛，占有機物的80% 2、流動相差別的區(qū)別 GC：流動相為惰性，氣體組分與流動相無親合作用力，只與固定相有相互作用?！ PLC：流動相為液體，流動相與組分間有親合作用力，能提高柱的選擇性、改善分離度，對分離起正向作用。且流動相種類較多，選擇余地廣，改變流動相極性和pH值也對分離起到調(diào)控作用，當(dāng)選用不同比例的兩種或兩種以上液體作為流動相也可以增大分離選擇性?！ ?、操作條件區(qū)別 GC：加溫操作 HPLC：室溫；高壓（液體粘度大，峰展寬?。?/p>
液相色譜儀的日常維護與注意事項
一、日常維護：
1.定期清洗單向閥：將單向閥卸下，一般先用純凈水超聲10分鐘，然后用異丙醇超聲，10分鐘；也可直接用異丙醇超聲10分鐘。
2.定期清洗吸濾頭：將吸濾頭卸下，一般先用純凈水超聲10分鐘，然后用異丙醇超聲10分鐘；也可直接用異丙醇超聲10分鐘。
3.定期沖洗檢測池：把色譜柱卸下，在流速1.0ml/min的狀態(tài)下先用純凈水沖洗30分鐘，然后再用30%
磷酸（色譜級）沖洗30分鐘左右，再用超純水沖洗至流出液為中性，最后用甲醇沖洗，待用。
二、注意事項：
1.開始進樣前30分鐘開氘燈即可，節(jié)約燈的能量和使用時間。
2.流動相的使用和注意事項：
?、偎昧鲃酉啾仨氼A(yù)先濾過和脫氣，流動相一般貯存于玻璃不銹鋼容器內(nèi)。貯存容器一定要蓋嚴，防止溶劑揮發(fā)引起組成變化。磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液很易長霉，應(yīng)盡量新鮮配制使用，不要長期貯存。容器應(yīng)定期清洗，特別是盛水、緩沖液和混合溶液的瓶子，以除去底部的雜質(zhì)沉淀和可能生長的微生物。
?、谂渲屏鲃酉嘤盟铻橥薰萍儍羲蚪?jīng)超聲過濾后的純化水，流動相配制好后先用直徑為5cm，孔徑為0.45ｕm的濾膜，通過沙芯過濾器的過濾，然后在超聲儀上超聲。
③不得將裝流動相的容器直接放置與超聲儀內(nèi)，需放與篩網(wǎng)上進行超聲。
3.六通閥的使用和維護注意事項：
?、贅悠啡芤哼M樣前必須用濾膜過濾，以減少微粒對進樣閥的磨損。
?、谵D(zhuǎn)動閥芯時不能太慢，更不能停留在中間位置，否則流動相受阻，使泵內(nèi)壓力劇增，甚至超過泵的最大壓力；再轉(zhuǎn)到進樣位時，過高的壓力將使柱頭損壞。
?、蹫榉乐咕彌_鹽和樣品殘留在進樣閥中，每次分析結(jié)束后應(yīng)沖洗進樣閥。通?？捎盟疀_洗，或先用能溶解樣品的溶劑沖洗，再用水沖洗。
4.色譜柱柱壓升高的主要因素：
?、貺C-10AT/20AT/10ATPlus泵的單向閥堵塞。
②色譜柱的入口篩板堵塞。
?、畚鼮V頭堵塞。
?、躊EEK管接口處堵塞。
5.色譜柱柱壓不穩(wěn)的因素：
?、俦脙?nèi)有空氣。
?、诒?span title="密封墊" target="_blank">密封墊損壞。
③溶劑中的氣泡。
④系統(tǒng)檢漏，找出漏點。
6.樣品峰保留時間漂移的主要因素：
?、偈覂?nèi)溫度變化過大。
?、诹鲃酉喑煞职l(fā)生變化。
?、凵V柱未平衡好。
④泵中有氣泡。
?、菰摿鲃酉嗍欠襁m宜此樣品的檢測。
7.基線漂移的主要因素：
①柱溫波動。
?、诹鲃酉嗖痪鶆?。
?、哿魍ǔ乇晃廴净蛴袣怏w。
?、軝z測器出口阻塞。
⑤流動相配比不當(dāng)或流速變化。
⑥流動相污染、變質(zhì)。
⑦使用循環(huán)溶劑。
8.檢測器靈敏度不夠的主要因素：
①樣品進樣量不足。
?、诓ㄩL設(shè)置不正確。
?、蹤z測器池窗污染。
④檢測池中有氣泡。
⑤電壓不穩(wěn)。
?、蘖鲃酉嗔魉俨缓线m。
9.色譜柱的使用和維護注意事項：
?、俦苊鈮毫蜏囟鹊募眲∽兓叭魏螜C械震動。柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進行，在閥進樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
?、趹?yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?/p>
?、垡话阏f來色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。
?、苓x擇使用適宜的流動相（尤其是pH），以避免固定相被破壞。
?、荼苊鈱?fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內(nèi)，需要對樣品進行預(yù)處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。
⑥經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。
?、弑４嫔V柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。絕對禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置至次日或更長時間。
?、嗌V柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M行清洗；另一種可能是大分子進入柱內(nèi)，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。
?、嵋怨枘z為基質(zhì)的填料，只能在pH2~9范圍內(nèi)使用。每次分析檢測完成后，可以用洗脫能力強的洗脫液沖洗，例如ODS柱宜用甲醇沖洗至基線平衡。
10.樣品必須用直徑為2.5cm，孔徑為0.45ｕm的濾膜針式過濾。如有明確要求需用離心過濾的，經(jīng)離心過濾后取上清液即可。
449717568
