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紫外可見分光光度計常見問題解答 光度計解決方案

時間:2020-05-17    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  光源部分:
 
  (1)鎢燈不亮;
 
  原因:1.鎢燈燈絲燒斷(此種原因幾率zui高);
 
  檢查:鎢燈兩端有工作電壓,但燈不亮;取下鎢燈用萬用表電阻檔檢測。
 
  解決方法:更換新鎢燈;
 
  原因2. 沒有點燈電壓;
 
  檢查: 保險絲被熔斷;
 
  解決方法:更換保險絲,(如更換后再次燒斷則要檢查供電電路);
 
  (2)氘燈不亮;
 
  原因:1氘燈壽命到期(此種原因幾率zui高);
 
  檢查:燈絲電壓、陽極電壓均有,燈絲也可能未斷(可看到燈絲發(fā)紅);
 
  解決辦法:更換氘燈;
 
  原因:2.氘燈起輝電路故障;
 
  檢查:氘燈在起輝的過程中,一般是燈絲先要預(yù)熱數(shù)秒鐘,然后燈的陽極與陰極間才可起輝放電,如果燈在起輝的開始瞬間燈內(nèi)閃動一下或連續(xù)閃動,并且更換新的氘燈后依然如此,有可能是起輝電路有故障,燈電流調(diào)整用的大功率晶體管損壞的幾率zui大。
 
  解決辦法:需要專業(yè)人士修理;
 
  二.信號部分:
 
  (1)沒有任何檢測信號輸出;
 
  原因:沒有任何光束照射到樣品室內(nèi);
 
  檢查:將波長設(shè)定為530nm,狹縫盡量開到zui寬檔位,在黑暗的環(huán)境下用一張白紙放在樣品室光窗出口處,觀察白紙上有無綠光斑影像;
 
  解決辦法:檢查光源鏡是否轉(zhuǎn)到位?雙光束儀器的切光電機是否轉(zhuǎn)動了(耳朵可以聽見電機轉(zhuǎn)動的聲音)?
 
  (2)樣品室內(nèi)無任何物品的情況下,全波長范圍內(nèi)基線噪聲大;
 
  原因:光源鏡位置不正確、石英窗表面被濺射上樣品;
 
  檢查:觀察光源是否照射到入射狹縫的中央?石英窗上有無污染物?
 
  解決辦法:重新調(diào)整光源鏡的位置,用乙醇清洗石英窗;
 
  (3)樣品室內(nèi)無任何物品的情況下,僅僅是紫外區(qū)的基線噪聲大;
 
  原因:氘燈老化、光學(xué)系統(tǒng)的反光鏡表面劣化、濾光片出現(xiàn)結(jié)晶物;
 
  檢查:可見區(qū)的基線較為平坦,斷電后打開儀器的單色器及上蓋,肉眼可以觀察到光柵、反光鏡表面有一層白色霧狀物覆蓋在上面;如果光學(xué)系統(tǒng)正常,zui大的可能是氘燈老化,可以通過能量檢查或更換新燈方法加以判斷;
 
  解決辦法:更換氘燈、用火棉膠粘取鏡面上的污物或用研磨膏研磨濾光片(注意:此種技巧需要有一定維修經(jīng)驗者來實施);
 
  (4)樣品室放入空白后做基線記憶,噪聲較大,紫外區(qū)尤甚;
 
  原因:比色皿表面或內(nèi)壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白樣品對紫外光譜的吸收太強烈,使放大器超出了校正范圍;
 
  檢查:將波長設(shè)定為250nm,先在不放任何物品的狀態(tài)下調(diào)零,然后將空比色皿插入樣品道一側(cè),此時吸光值應(yīng)小于0.07Abs;如果大于此值,有可能是比色皿不干凈或使用了玻璃比色皿;同樣方法也可判斷空白溶液的吸光值大??;
 
  解決辦法:清洗比色皿,更換空白溶液;
 
  (5)吸光值結(jié)果出現(xiàn)負值(zui常見);
 
  原因:沒做空白記憶、樣品的吸光值小于空白參比液;
 
  檢查:將參比液與樣品液調(diào)換位置便知;
 
  解決辦法:做空白記憶、調(diào)換參比液或用參比液配置樣品溶液;
 
  (6)樣品信號重現(xiàn)性不良;
 
  原因:排除儀器本身的原因外,zui大的可能是樣品溶液不均勻所致;在簡易的單光束儀器中,樣品池架一般為推拉式的,有時重復(fù)推拉不在同一個位置上;
 
  檢查:更換一種穩(wěn)定的試樣判定;
 
  解決辦法:采取正確的試樣配置手段;修理推拉式樣品架的定位碰珠;
 
  (7)做基線掃描或樣品掃描時,基線或信號有一個大的負脈沖;
 
  原因:掃描速度設(shè)置得過快,信號在讀取時,誤將濾光片或光源鏡的切換當(dāng)做信號讀取了;
 
  檢查:改變掃描速度;
 
  (8)做基線掃描或樣品掃描時,基線或信號有一個長時間段的負值或滿屏大噪聲;
 
  原因:濾光片飼服電機“失步”,造成檔位錯位,國產(chǎn)電機尤甚;
 
  檢查:重新開機有可能回復(fù),或打開單色器對照波長與濾光片的相對位置來檢查(注意:打開單色器時要保護檢測器不被強光刺激);
 
  解決辦法:更換飼服電機;
 
  (9)樣品出峰位置不對;
 
  原因:波長傳動機構(gòu)產(chǎn)生位移;
 
  檢查:通過氘燈的656.1nm的特征譜線來判斷波長是否準(zhǔn)確;
 
  解決辦法:對于儀器而言處理手段相對簡單,使用儀器固有的自動校正功能即可;而對于相對簡單的儀器,這種調(diào)整則需要專業(yè)人員來進行了;
 
  (10)信號的分辨率不夠,具體表現(xiàn)是:本應(yīng)疊加在某一大峰上的小峰無法觀察到;
 
  原因:狹縫設(shè)置過窄而掃描速度過快,造成檢測器響應(yīng)速度跟不上,從而失去應(yīng)測到的信號;按常理,一定的狹縫寬度要對應(yīng)一定范圍的掃描速度;或者狹縫設(shè)置得過寬,使儀器的分辨率下降,將小峰融合在大峰里了。
 
  檢查:放慢掃描速度看一看或?qū)ⅹM縫設(shè)窄;
 
  解決辦法:將掃描速度、狹縫寬窄、時間常數(shù)三者擬合成一個zui優(yōu)化的條件;
 
  (11)當(dāng)儀器波長固定在某個波長下時,吸光值信號上下擺動,特別是測量模式轉(zhuǎn)換為按鍵開關(guān)式的簡易儀器;
 
  原因:開關(guān)觸點因長期氧化所致造成接觸不良;
 
  檢查:用手加重力量按琴鍵時,吸光值隨之變化;
 
  解決辦法:用金屬活化劑清洗按鍵觸點即可;
 
  (12)儀器零點飄忽不定,主要反映在簡易儀器上;
 
  原因:在簡易儀器中,零點往往是通過電位器來調(diào)整,這種電位器一般是炭膜電阻制作的,使用久了往往造成接觸不良;
 
  解決辦法:更換電位器;
 
  還有一點補充一下,如果是PC連接UV時,同志們一定注意接口板別不小心被擊穿,一定要關(guān)機后拔插.若可見部分穩(wěn)定性不好,有可能是鎢燈的供電電壓不穩(wěn),一般鎢燈電源是穩(wěn)壓電路
 
  (13)在使用過程中,出現(xiàn)數(shù)字顯示不能歸零,同時伴有圖線記錄基線位置偏高。
 
  可能原因:
 
 ?、俟怆姳对龅壤匣?,性能降低;
 
 ?、谛盘柼幚戆蹇赡馨l(fā)生故障;
 
 ?、矍爸梅糯蟀娉霈F(xiàn)故障,引起反饋量增大。
 
  解決辦法:
 
  ①開機通電,先做記錄故障曲線,再與原始記錄的標(biāo)準(zhǔn)曲線對照,找出異同點,并作一下定性定能分析。然后用一只同型號規(guī)格的新光電倍增管替換機上的光電管,再開機實驗,結(jié)果記錄出來的圖線并沒有什么變化,由此證明光電倍增管沒有老化變質(zhì)。
 
  ②進一步檢查信號處理板,未發(fā)現(xiàn)信號處理板各元器件損壞,對影響靈敏度有關(guān)的電位器檢測,結(jié)果測得數(shù)據(jù)正常,這說明信號處理板沒有故障。
 
 ?、塾?于對以上分析,故障發(fā)生在前置級放大板可能性很大。應(yīng)采用模擬測試對前置放大板進行測量,先利用直流穩(wěn)壓電源,把各供電電源加上,使其電路單獨工作,用信 號發(fā)生器發(fā)出的信號加到輸入端。再用示波器接在輸出端測量輸出信號,將輸入信號與輸出信號對比,結(jié)果波形相同,說明電路沒有故障。用相同方法對一個帶驅(qū)動 器的開關(guān)管測量,輸入端加入信號后,用示波器未能測出輸出端信號,判斷開關(guān)管壞,換上同一型號規(guī)格的開關(guān)管,恢復(fù)正常。
 
  (14)儀器掃描樣品時,顯示一條直線。
 
  可能原因:軟件出現(xiàn)故障。
 
  解決辦法:退出操作系統(tǒng),重新啟動計算機,再次掃描。
 
  (15)紫外可見分光光度計接通電源后,光源不亮。
 
  可能原因:
 
 ?、俟庠礋襞菀褤p壞;
 
 ?、诒kU管燒壞。
 
  解決辦法:更換氘燈或鎢燈;更換保險管。
 
  (16)儀器自檢時提示通訊錯誤。
 
  可能原因:儀器與電腦之間的數(shù)據(jù)線沒有連接好。
 
  解決辦法:連接好數(shù)據(jù)線,重新打開儀器和軟件,重新自檢。
 
  (17)自檢時提示波長自檢出錯。
 
  可能原因:自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子。
 
  解決辦法:關(guān)上儀器樣品室蓋子,重新自檢。
 
  (18)測試過程中提示能量太低。
 
  可能原因:
 
  ①光源燈泡使用時間超過壽命期;
 
 ?、跇映刂杏胁煌腹獾臇|西擋住了光。
 
  解決辦法:更換光源燈泡;拿走擋光的物品
 
  三、使用技巧
 
 ?。?)不使用氘燈時如何關(guān)閉氘燈
 
  當(dāng)連接儀器時,選擇儀器>配置>保養(yǎng)標(biāo)簽,然后點擊氘燈邊上的燈狀態(tài)框,除去復(fù)選標(biāo)記。只要掃描范圍和固定波長測定不在氘燈的范圍之內(nèi)時,氘燈將處于關(guān)閉狀態(tài)。
 
 ?。?)如何決定所用的通帶
 
  選擇測定光譜中zui窄峰的半高度,然后除以10。例如峰的半高度寬是20nm,通帶的優(yōu)選值是2nm。
 
 ?。?)初始化剛完成,使用哪條基線
 
  使用zui后一次存儲的基線。儀器在初始化時不進行基線校正??蓲呙枰淮瘟憔€,看基線是否完好,如果可以,就使用存在的基線。儀器在出廠時存儲有基線。如果未進行過基線校正,則使用的是出廠時的基線。
 
 ?。?)如果發(fā)生通訊故障,應(yīng)該檢查哪些項目
 
 ?、贆z查在儀器配置屏幕(選擇儀器>配置)中是否選擇了合適的通訊口;
 
  ②檢查電纜是否正確,牢固地連接
 
 ?、蹤z查儀器的電源是否已經(jīng)打開
 
 ?。?)燈是如何進行準(zhǔn)直的
 
  實際上燈并不移動。在初始化時,驅(qū)動燈反光鏡的步進馬達連接有傳感器,當(dāng)檢測器發(fā)現(xiàn)能量zui大時,反饋信號到燈室,步進馬達的傳感器自動記憶此時的反光鏡位置。當(dāng)檢查所有的位置后,反光鏡自動返回到記憶的位置。
 
 ?。?)紫外區(qū)讀數(shù)漂移的原因
 
  確認氘燈是否點亮。氘燈的使用時間是否超過了預(yù)期的500h壽命,一旦超過,光強減弱,也許需要更新。此外可檢查夾縫寬度的設(shè)置是否太小。
 
 ?。?)執(zhí)行了自動調(diào)零后儀器處于什么狀態(tài)
 
  自動調(diào)零把當(dāng)前固定波長的光度讀數(shù)調(diào)節(jié)為0或者100%,取決于測定的方式。使用自動調(diào)零減去了空白讀數(shù)。通常,在單個固定波長測定時使用自動調(diào)零,如果是多波長測定,應(yīng)該執(zhí)行基線校正。
 
 ?。?)為什么執(zhí)行自動調(diào)零后光譜仍然沒有得到有效的校正
 
  因為自動調(diào)零只校正一個點;要校正光譜范圍,需要進行基線校正或精細的基線校正。精細的基線校正應(yīng)該定期進行,一般每月一次,在樣品室中不必放任何容器。
 
 ?。?)基線校正后儀器的狀態(tài)如何?
 
  基線校使時儀器在制定得波長范圍內(nèi)的光譜讀數(shù)調(diào)整為零。
 
 ?。?0)為什么基線校正不能正常起作用
 
  是否樣品室中放了樣品?基線校正時有三種選擇,可確?;€校正的正常。
 
 ?、贅悠肥页丶軆?nèi)空置(空氣對空氣)。此時校正儀器的基線,特別適合精細的基線校正
 
 ?、跇悠烦刂蟹湃肴軇?,參比側(cè)空置
 
  ③樣品和參比池中都放入溶劑
 
  需要確認樣品室的門已經(jīng)關(guān)好。雜散光會影響基線的質(zhì)量。此外,在指定的波長范圍內(nèi)溶劑和樣品池的材料匹配。
 
 ?。?1)夾縫寬改變以后情況如何
 
  多數(shù)場合下(紫外/可見區(qū)),設(shè)置夾縫寬也等于設(shè)置了帶寬,換言之設(shè)置了光譜的分辨率。夾縫寬改變,改變了光束的集合尺寸。在使用微量池和流通池時就要權(quán)衡考慮,增加夾縫寬可增加光通量降低噪聲。但是,使用zui大的夾縫寬,噪聲是降低了,付出的代價是分辨率也隨之降低了。
 
  (12)為什么有時在儀器初始化中會出現(xiàn)氘燈能量或波長正確度故障
 
  出現(xiàn)上述現(xiàn)象的原因可能如下。
 
  ①樣品盒參比池中有樣品池
 
 ?、谑褂媚承└郊?,如池定位裝置、抽吸單元等,沒有坐落在正確的位置上或未準(zhǔn)直。
 
 ?、廴绻惭b了抽吸單元,流通池臟了、空了或沒有準(zhǔn)直。
 
 ?、茈疅舻氖褂脮r間接近或超過預(yù)期的500h壽命,燈的能量降低乃至不能通過能量檢查,并且由于噪聲增加,使波長正確度的檢查也失敗。此時,換新的燈一切問題迎刃而解。

原子吸收分光光度計的安全操作

    原子吸收分光光度計在出廠前雖然儀器已經(jīng)過嚴(yán)格檢查;

    但是由于運輸過程中的顛簸或長期使用后,有可能發(fā)生漏氣現(xiàn)象,為確保安全,在日常操作過程中;

    請您注意如下事項:

    1.長期在惡劣條件存放的儀器應(yīng)該經(jīng)常維護保養(yǎng)。

    2.在運輸過程中受到劇烈撞擊的儀器,主機不能冒然通電!

    3.一旦儀器的報警器發(fā)出聲音,應(yīng)立即關(guān)掉氣源,并關(guān)機。

    4.請您隨時注意,一旦產(chǎn)生異味,請立即切斷電源,關(guān)掉乙炔鋼瓶總閥門。

    請將空壓機的空氣管插入燃氣管道中,并涂抹肥皂水以檢查燃氣管道各接頭是否漏氣;

    特別應(yīng)該檢查霧化筒后部的防爆塞是否密封完好,決不能在發(fā)生漏氣時點火操作,否則容易發(fā)生回火爆炸!

    5.每次點火前檢查廢液管是否打好水封;確認水封無誤時方可開機點火。

    6.一定要使用優(yōu)質(zhì)正品的乙炔專用減壓閥,并裝有防回火裝置。

    7.乙炔鋼瓶放置在臨近儀器室的房間內(nèi),保持空氣流通,并應(yīng)有防火標(biāo)識!

    8.乙炔減壓閥的出口壓力為0.07MPa,不能大于0.1MPa,空氣出口壓力在0.25-0.3MPa(注意:不能用氧氣代替空氣進行點火實驗)。

    鋼瓶壓力顯示低于0.3MPa時要更換新瓶。

    9.乙炔氣源附近嚴(yán)禁明火或過熱高溫物體存放!乙炔氣源不應(yīng)與氧化性氣源同放!

    10.排放的廢液應(yīng)及時傾倒處理或與當(dāng)?shù)丨h(huán)保部門聯(lián)系!

    11.在日常工作中應(yīng)經(jīng)常檢查乙炔鋼瓶與減壓閥連接是否牢固無漏氣!

    12.定期檢查各連接口有無漏氣現(xiàn)象。

    13.注意點火、關(guān)火順序(先開空氣再開乙炔點火,先關(guān)乙炔再關(guān)空氣熄火)。

    點火后操作人員不得離開!

    在當(dāng)天不用儀器操作時,請將乙炔管道里的剩余氣體燃燒完,即直接關(guān)乙炔總開關(guān)再管空氣!

    14.嚴(yán)禁帶電插拔數(shù)據(jù)線纜。

    15.任何操作本儀器的人員均應(yīng)經(jīng)過上述安全培訓(xùn)。

    16.帶石墨爐的儀器一定要注意用電安全,由于會使用380V(3個火線,一個地線)動力電,加熱時瞬間會產(chǎn)生很大的電流;

    所以在石墨爐處于工作狀態(tài)時,不要直接觸碰爐體部分,以免造成危險。

    在做實驗時隨時觀察氬氣(保護氣體)的總壓力和內(nèi)氣流量計的流量,以保證石墨管能夠長期使用和實驗的準(zhǔn)確和一致性。

標(biāo)簽: 原子吸收分光光度計
原子吸收分光光度計 原子吸收分光光度計的安全操作_原子吸收分光光度計

分光光度計的三大注意事項

  分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。常用于核酸,蛋白定量以及細菌生長濃度的定量。

  操作方法:

  接通電源,打開儀器開關(guān),掀開樣品室暗箱蓋,預(yù)熱 10 分鐘。

  將靈敏度開關(guān)調(diào)至“1”檔(若零點調(diào)節(jié)器調(diào)不到“0”時,需選用較高檔。

  根據(jù)所需波長轉(zhuǎn)動波長選擇鈕。

  將空白液及測定液分別倒入比色杯 3/4 處,用擦鏡紙擦清外壁,放入樣品室內(nèi),使空白管對準(zhǔn)光路。

  在暗箱蓋開啟狀態(tài)下調(diào)節(jié)零點調(diào)節(jié)器,使讀數(shù)盤指針指向 t=0 處。

  蓋上暗箱蓋,調(diào)節(jié)“100”調(diào)節(jié)器,使空白管的 t=100,指針穩(wěn)定后逐步拉出樣品滑竿,分別讀出測定管的光密度值,并記錄。

  比色完畢,關(guān)上電源,取出比色皿洗凈,樣品室用軟布或軟紙擦凈。

  三大注意事項:

  分光光度計應(yīng)放在干燥的房間內(nèi),使用時放置在堅固平穩(wěn)的工作臺上,室內(nèi)照明不宜太強。熱天時不能用電扇直接向儀器吹風(fēng),防止燈泡燈絲發(fā)亮不穩(wěn)定。

  分光光度計使用前,使用者應(yīng)該首先了解本儀器的結(jié)構(gòu)和工作原理,以及各個操縱旋鈕之功能。在未按通電源之前,應(yīng)該對儀器的安全性能進行檢查,電源接線應(yīng)牢固,通電也要良好,各個調(diào)節(jié)旋鈕的起始位置應(yīng)該正確,然后再按通電源開關(guān)。

  分光光度計在儀器尚未接通電源時,電表指針必須于“0”刻線上,若不是這種情況,則可以用電表上的校正螺絲進行調(diào)節(jié)。

標(biāo)簽: 分光光度計
分光光度計 分光光度計的三大注意事項_分光光度計

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