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淺析暗視野顯微鏡的故障問(wèn)題及對(duì)應(yīng)的解決方法 顯微鏡解決方案

時(shí)間:2020-05-17    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
   暗視野顯微鏡也叫超顯微鏡,常用來(lái)觀察未染色的透明樣品。
 
  暗視野顯微鏡問(wèn)題及解決方法
 
  1、問(wèn)題:
 
  有足夠的照明,使標(biāo)本可見(jiàn),或標(biāo)本是可見(jiàn)的,但很微弱。
 
  解決方案:燈電壓可以被設(shè)置得太低,或燈泡可能沒(méi)有足夠的強(qiáng)度照射試樣。將電壓升高到大約12伏(12伏,100瓦鎢鹵素?zé)襞荩┗蚋鼡Q光源,如果可能的話,與更大的強(qiáng)度。如果不解決這個(gè)問(wèn)題,檢查臺(tái)下冷凝器,以確保它正確的位置用適當(dāng)大小的視場(chǎng)光闌。此外,還要檢查顏色和/或中性密度濾光片,偏光板,相位差板,或任何其他組件,可能會(huì)降低光照強(qiáng)度的光路, 如果這個(gè)問(wèn)題發(fā)生的高數(shù)值孔徑反射式冷凝器,檢查做出一定冷凝器ding級(jí)鏡頭正確涂油的顯微鏡載片上的底部。如果浸沒(méi)接觸已被打破,重新申請(qǐng)了冷凝器的油和機(jī)架,直到頂端透鏡完全浸在油中和底部的滑動(dòng)接觸。
 
  2、問(wèn)題:
 
  視場(chǎng)的中心降低光照強(qiáng)度,有一個(gè)暗點(diǎn),但在外圍的對(duì)象都亮起,顯示正常。
 
  解決方案:臺(tái)下聚光器位置不正確或光站的目標(biāo)是錯(cuò)誤的大小。小心機(jī)架冷凝器向上和向下,同時(shí)在視場(chǎng)中觀察試樣。檢查做出一定的冷凝器孔徑和視場(chǎng)光闌設(shè)置敞開(kāi)位置。如果這并不影響照明,改變視場(chǎng)光闌尺寸使其稍大或稍小,然后重新檢查照明。 偶爾出現(xiàn)此問(wèn)題時(shí)使用過(guò)厚(大于標(biāo)準(zhǔn)一毫米)顯微鏡載玻片。使用千分尺或一組表卡尺來(lái)確定厚度滑動(dòng)和滑動(dòng)/蓋玻片組合。如果滑動(dòng)太厚,要么改變到正確的厚度的滑動(dòng)或檢查冷凝器,以確定它是否可以調(diào)整,以補(bǔ)償不同厚度的幻燈片。
 
  3、問(wèn)題:
 
  燈往往有一個(gè)很短的壽命,燈泡內(nèi)部有涂層的黑色蒸發(fā)的鎢燒結(jié)。
 
  解決方案:長(zhǎng)時(shí)間在過(guò)高的電壓,這肯定會(huì)影響其壽命的燈泡已使用。更換燈泡減少燈電壓經(jīng)過(guò)觀察和/或試樣的顯微攝影。
 
  4、問(wèn)題:
 
  圖像有明場(chǎng)暗區(qū)的中心的帶或不帶外周。
 
  解決方案:這個(gè)問(wèn)題是典型的臺(tái)下冷凝器時(shí),被錯(cuò)誤地集中或場(chǎng)站太小?;謴?fù)明場(chǎng),并重新建立科勒照明的條件下,再重復(fù)暗場(chǎng)的過(guò)程中,確保冷凝器集中。如果這沒(méi)有幫助,增加視場(chǎng)光闌的大小,直到建立適當(dāng)?shù)陌祱?chǎng)條件, 當(dāng)使用目標(biāo)具有太高的數(shù)值孔徑為暗場(chǎng)聚光,也可能出現(xiàn)這個(gè)問(wèn)題。如果是在目標(biāo)內(nèi)部的可變光闌,降低光圈開(kāi)度的大小,以確定是否太多的斜光進(jìn)入物鏡鏡頭前面。此外,它可能有助于增加視場(chǎng)光闌的大小或改變反射的暗場(chǎng)聚光更高的數(shù)值孔徑。
 
  5、問(wèn)題:
 
  視場(chǎng)的外圍,只有一側(cè)是光明的。
 
  解決方案:檢查物鏡轉(zhuǎn)換器,以確保正確地定位在顯微鏡的光軸的目標(biāo)。有一個(gè)制動(dòng)停止,正確定位目標(biāo)時(shí),應(yīng)該產(chǎn)生積極的“咔嚓”。問(wèn)題也可能發(fā)生,如果不能正確居中視場(chǎng)光闌。卸下目鏡和相望遠(yuǎn)鏡放置在眼管(或使用貝特朗鏡頭),然后使用定心螺絲正確對(duì)齊視場(chǎng)光闌。
 
  6、問(wèn)題:
 
  試樣圖像不清晰,缺乏足夠的對(duì)比度和細(xì)節(jié)。
 
  解決方案:暗視野顯微鏡標(biāo)本可能不適合。許多染色標(biāo)本沒(méi)有足夠的散射光,暗場(chǎng)條件下能清楚成像。用試樣的厚度也可能是一個(gè)問(wèn)題,因?yàn)榉浅1〉臉悠吠怀上褚约芭c斜光線從暗視野冷凝器發(fā)射。這提高了標(biāo)本的對(duì)比,以確定是否變更明場(chǎng),相襯,DIC,霍夫曼調(diào)制對(duì)比度。
 
  7、問(wèn)題:
 
  明亮區(qū)域是重點(diǎn)妨礙觀看和/或暗場(chǎng)標(biāo)本的顯微攝影。
 
  解決方案:這可能是由于灰塵,頭發(fā),纖維,和/或污物污染的光學(xué)表面冷凝器上方的某處。徹底清潔試樣滑動(dòng),光學(xué)級(jí)紙巾或棉球。有時(shí)候,這個(gè)問(wèn)題的產(chǎn)生是由于在物鏡前透鏡的污染。小心松開(kāi)其所在地物鏡轉(zhuǎn)換器的目標(biāo),慢慢轉(zhuǎn)動(dòng),同時(shí)通過(guò)目鏡觀察樣品。,如果梗阻一起旋轉(zhuǎn)的目標(biāo),那么它可能是由于前透鏡上的灰塵。取出的目標(biāo)和滋潤(rùn)鏡頭前輕輕呼氣,然后再用鏡頭紙或棉簽包裹的長(zhǎng)木桿。更換的目標(biāo)和檢查,以一定的梗阻已被完全刪除。
 
  8、問(wèn)題:
 
  背景是均勻的照明,但不是完全黑暗或會(huì)出現(xiàn)灰色的顏色。
 
  解決方案:這個(gè)問(wèn)題通常發(fā)生在不透明場(chǎng)站太小,客觀。卸下目鏡和查看一個(gè)光路中的樣本的情況下的目標(biāo)使用一個(gè)相位望遠(yuǎn)鏡或伯特蘭透鏡的后焦面上。整個(gè)背部焦平面應(yīng)該是黑暗,沒(méi)有任何出現(xiàn)的四周邊緣,明亮的光線。如果在物鏡的后焦面的光的弧或圓的觀察,更改一個(gè)稍微大的視場(chǎng)光闌。此外,降低視場(chǎng)光闌的大小,將有助于抑制眩光和生產(chǎn)一個(gè)漆黑的背景(要小心,不要關(guān)閉此虹膜光圈太多)。
 
  9、問(wèn)題:
 
  燈泡冷凝器的圖像的視場(chǎng)部分地填充,模糊試樣的詳細(xì)信息。
 
  解決方案:滑動(dòng)可能太薄或冷凝器可能被調(diào)得太高。厚度測(cè)量顯微鏡幻燈片,并進(jìn)行檢查,以確定油接觸不破。如果遇到困難,保持幻燈片油的底部,嘗試使用較厚的幻燈片。
 
  10、問(wèn)題:
 
  顏色顯示在背景中,或使背景光線不均與灰鑄鐵。
 
  解決方案:這個(gè)問(wèn)題往往出現(xiàn)很厚,或當(dāng)太多的光散射污染工件的安裝介質(zhì)中捕獲整個(gè)坐騎。關(guān)閉視場(chǎng)光闌試樣滑動(dòng)和旋轉(zhuǎn),以找到好的方向,然后確定問(wèn)題是否已得到糾正。試樣被重新安裝在一個(gè)較薄的安裝或安裝介質(zhì),可能需要進(jìn)行過(guò)濾。小心地用柔軟的鏡頭紙或棉簽清潔整個(gè)顯微鏡載玻片和蓋玻片。
 
  11、問(wèn)題:
 
  當(dāng)于水性坐騎,觀賞水生生物標(biāo)本漂在一個(gè)單一的方向不斷,難以觀察和顯微攝影。
 
  解決方案:對(duì)流,正在建立在蓋玻片的邊緣,由于緩慢蒸發(fā)。將胎圈凡士林或Cytoseal的蓋玻片周圍介質(zhì)的外周安裝到顯微鏡載片上,牢固地密封。商業(yè)產(chǎn)品可用,可以加入到水中,緩慢的移動(dòng)這些分鐘生物體,使它們更容易拍攝。
 
  12、問(wèn)題:
 
  當(dāng)觀看試樣通過(guò)10x物鏡的視場(chǎng)的中心,有一個(gè)長(zhǎng)圓形的光點(diǎn)。
 
  解決方案:該燈冷凝器可能會(huì)錯(cuò)誤地聚焦或擴(kuò)散過(guò)濾器可能會(huì)丟失,導(dǎo)致圖像出現(xiàn)在視場(chǎng)中的燈絲。重新聚焦聚光,并在光路中有一個(gè)擴(kuò)散濾波。
 
  13、問(wèn)題:
 
  視場(chǎng)有亮點(diǎn),實(shí)現(xiàn)清晰對(duì)焦的標(biāo)本有問(wèn)題。
 
  解決方案:可能被困在小氣泡與冷凝器之間的頂部和底部的顯微鏡載片上的油。卸下目鏡(或插入一個(gè)勃氏鏡)觀察的目標(biāo)的后焦平面上,將是可見(jiàn)的氣泡。為了彌補(bǔ),斷油接觸,并用棉簽除去殘留的氣泡。清理多余的油,然后從冷凝器的前鏡頭和顯微鏡幻燈片應(yīng)用干凈鏡頭滴油。如果問(wèn)題仍然存在,徹底清潔所有的光學(xué)表面,前重新申請(qǐng)機(jī)油。
 
  14、問(wèn)題:
 
  在高放大倍率,膠體粒子顯示不全的牛頓 環(huán)出現(xiàn)照明不均。
 
  解決方案:冷凝器可能是偏離中心。切換到低功耗的目標(biāo)和中心冷凝器。請(qǐng)仔細(xì)檢查,以確定是否在更高的功率目標(biāo)具有不同的中心,如果是的話,中心的目標(biāo),以顯微鏡光軸。

生物顯微鏡的用途和使用方法

  生物顯微鏡是用來(lái)觀察生物切片、生物細(xì)胞、細(xì)菌以及活體組織培養(yǎng)、流質(zhì)沉淀等的觀察和研究,同時(shí)可以觀察其他透明或者半透明物體以及粉末、細(xì)小顆粒等物體。

  生物顯微鏡的用途:

  生物顯微鏡供醫(yī)療衛(wèi)生單位、高等院校、研究所用于微生物、細(xì)胞、細(xì)菌、組織培養(yǎng)、懸浮體、沉淀物等的觀察,可連續(xù)觀察細(xì)胞、細(xì)菌等在培養(yǎng)液中繁殖分裂的過(guò)程等。在細(xì)胞學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、遺傳工程學(xué)、工業(yè)微生物學(xué)、植物學(xué)等領(lǐng)域中應(yīng)用廣泛。

  生物顯微鏡的使用方法:

  先將低倍物鏡的位置固定好,然后放置標(biāo)本片,轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,調(diào)好光線,將物鏡提高,向下調(diào)至看到標(biāo)本,再用細(xì)調(diào)對(duì)準(zhǔn)焦距進(jìn)行觀察。除少數(shù)顯微鏡外,聚光鏡的位置都要放在最高點(diǎn)。如果視野中出現(xiàn)外界物體的圖像,可以將聚光鏡稍微下降,圖像就可以消失。聚光鏡下的虹彩光圈應(yīng)調(diào)到適當(dāng)?shù)拇笮?,以控制射入光線的量,整理增加明暗差。

標(biāo)簽: 生物顯微鏡
生物顯微鏡 生物顯微鏡的用途和使用方法_生物顯微鏡

顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)及參數(shù)

    顯微鏡是一種精密的光學(xué)儀器,已有300多年的發(fā)展史。自從有了顯微鏡,人們看到了過(guò)去看不到的許多微小生物和構(gòu)成生物的基本單元——細(xì)胞。目前,不僅有能放大千余倍的光學(xué)顯微鏡,而且有放大幾十萬(wàn)倍的電子顯微鏡,使我們對(duì)生物體的生命活動(dòng)規(guī)律有了更進(jìn)一步的認(rèn)識(shí)。在普通中學(xué)生物教學(xué)大綱中規(guī)定的實(shí)驗(yàn)中,大部分要通過(guò)顯微鏡來(lái)完成,因此,顯微鏡性能的好壞是做好觀察實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。

    一、顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)

    顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)主要包括物鏡、目鏡、反光鏡和聚光器四個(gè)部件。廣義的說(shuō)也包括照明光源、濾光器、蓋玻片載玻片等。

    (一)、物鏡

    物鏡是決定顯微鏡性能的重要部件,安裝在物鏡轉(zhuǎn)換器上,接近被觀察的物體,故叫做物鏡或接物鏡。

    1、物鏡的分類

    物鏡根據(jù)使用條件的不同可分為干燥物鏡和浸液物鏡;其中浸液物鏡又可分為水浸物鏡和油浸物鏡(常用放大倍數(shù)為90—100倍)。

    根據(jù)放大倍數(shù)的不同可分為低倍物鏡(10倍以下)、中倍物鏡(20倍左右)高倍物鏡(40—65倍)。

    根據(jù)像差矯正情況,分為消色差物鏡(常用,能矯正光譜中兩種色光的色差的物鏡)和復(fù)色差物鏡(能矯正光譜中三種色光的色差的物鏡,價(jià)格貴,使用少)。

    2、物鏡的主要參數(shù):

    物鏡主要參數(shù)包括:放大倍數(shù)、數(shù)值孔徑和工作距離。

    ①、放大倍數(shù)是指眼睛看到像的大小與對(duì)應(yīng)標(biāo)本大小的比值。它指的是長(zhǎng)度的比值而不是面積的比值。例:放大倍數(shù)為100×,指的是長(zhǎng)度是1μm的標(biāo)本,放大后像的長(zhǎng)度是100μm,要是以面積計(jì)算,則放大了10,000倍。

    顯微鏡的總放大倍數(shù)等于物鏡和目鏡放大倍數(shù)的乘積。

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顯微鏡 顯微鏡的光學(xué)系統(tǒng)及參數(shù)_顯微鏡

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