雙光束分光光度計是利用物質(zhì)對光的選擇性吸收進行物質(zhì)的定性或定量分析的儀器,在各行各業(yè)得到了廣泛應(yīng)用,主要用于物質(zhì)純度檢查、定量分析、物質(zhì)結(jié)構(gòu)鑒別等??蓽y量結(jié)果總會出現(xiàn)可接受或不可接受的誤差,誤差來源于測量過程的各個方面
1.由于其光電接收裝置為光電倍增管,它本身的特點是放大倍數(shù)大,因而可以用于檢測微弱光電信號,而不能用來檢測強光。
2.針對其上述特點,在維修、使用此類儀器時應(yīng)注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下。
3.在預(yù)熱時,應(yīng)打開比色皿蓋或使用擋光桿,避免長時間照射使其性能漂移而導(dǎo)致工作不穩(wěn)。
雙光束分光光度計的特色:
1.在國內(nèi)首次采用計算機直接比例記錄原理。
2.采用一塊高能量雙閃耀光柵覆蓋整個工作波段。
3.采用高性能計算機進行儀器控制和數(shù)據(jù)處理。
4.數(shù)字顯示測量數(shù)值。
5.自動光門,自動調(diào)零調(diào)百儀器校正。
6.采用原裝進口鎢燈,保證儀器的使用壽命。
雙光束分光光度計的方便操作:
1.全自動操作系統(tǒng)及微機處理,具備自動調(diào)0%、100%及八聯(lián)池樣品架的自動設(shè)置。
2.方便操作并清晰地顯示各種數(shù)據(jù)及圖譜、測試當令時間的設(shè)置。采用進口高性能長壽命氘燈鎢燈,提供高品質(zhì)光源。氘燈更換方便,無須重新調(diào)光。
3.具備動力學(xué)測試、定量測試、回歸方程、光譜掃描、多波長測定燈功能。
熒光分光光度計與紫外分光光度計屬一類產(chǎn)品,結(jié)構(gòu)均由激發(fā)光源、單色器、樣品室、光電倍 增管和讀出(記錄)裝置所組成。但是它們光源是不同的,熒光分光光度計多采用高壓汞燈、氙燈和激光光源。同時,熒光測量多采用激發(fā)光和發(fā)射光成直角的光路,儀器組件的布置有所不同。 下圖為某型號熒光分光光度計的光學(xué)系統(tǒng)圖,其主要工作原理是:當光源光束經(jīng)入射單色器色散,提取所需波長單色光照射于樣品上,由樣品發(fā)出的熒光經(jīng)發(fā) 射單色器色散后照射于光電倍增管,光電倍增管把熒光強度信號轉(zhuǎn)化成電信號并經(jīng)放器放大后記錄或讀出信號。
熒光分光光度計的光學(xué)系統(tǒng)圖
1.氙燈(150W);2.透鏡;3.光束分裂器;4.水平狹縫;5.激發(fā)單色器光柵;6.參考放電管;7.關(guān)閘;8.樣品室關(guān)閘;10.發(fā)射單色器光柵;12.光電倍增管 (1)激發(fā)光源:要比吸收法中光源強度大。 汞燈:發(fā)射強度大、穩(wěn)定,不需復(fù)雜電源,但譜線不連續(xù),數(shù)目少,主要用于濾片熒光計。 碘鎢燈:提供連續(xù)光譜300~700mn。 氙燈:發(fā)出射線的強度大,譜線連續(xù),分布于200~700 nm光域內(nèi),且在300~400nm 波段內(nèi)射線強度幾乎相等,但該燈的電源功率要求大,且電源穩(wěn)定,因此電源結(jié)構(gòu)復(fù)雜。 激光:發(fā)光強度大,能極大地提高熒光分析的靈敏度。 (2)樣品池:通常由石英池(液體樣品用)或固體樣品架(粉末或片狀樣品)組成。測量液體時,光源與檢測器成直角安排;測量固體時,光源與檢測器成銳角安排。低溫熒光測定時在一樣品池外套一個液氮的透明石英真空瓶。 (3)單色器:熒光分光計通常具有兩個濾光片:第一濾光片在光源與樣品池之間,濾去不需要的光,讓需要的激發(fā)光通過。第二濾光片在樣品池與檢測器之間,濾去溶劑散射 光、容器表面散射光、雜質(zhì)發(fā)出的光等,讓待測物質(zhì)發(fā)射的熒光通過。 熒光分光光度計通常具有兩個光柵,位置同濾光片,單色性好。 (4)檢測器:因熒光通常較弱,采用光電倍增管作檢測器,靈敏度高。選擇光電倍增管要考慮:響應(yīng)波長、靈敏度和嗓聲水平。 藍敏管對蛋白質(zhì)、核酸的測量適用,而紅敏管則適用于熒光染料檢測。 (5)顯示系統(tǒng):光度表、計算機操作系統(tǒng)等。 補充說明:與紫外分光光度計的結(jié)構(gòu)區(qū)別: 1.熒光分光光度計采用的是垂直的測量方式,以消除透射光的影響。 2.檢測器前面有無單色器,熒光分光光度計有兩個單色器又上圖可以看出,能夠獲得單色性較好的激發(fā)光并消除其他雜散光干擾。
正確了解熒光分光光度計的結(jié)構(gòu),也是能夠幫助我們更好使用和操作,一定要仔細閱讀哈~