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選擇多功能酶標(biāo)儀要注意哪些因素 酶標(biāo)儀解決方案

時間:2020-05-18    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
  近年來,市面上的多功能酶標(biāo)儀不僅有傳統(tǒng)優(yōu)勢品牌形成三足鼎立之勢,還出現(xiàn)了很多后來者加入戰(zhàn)局。這些品牌在產(chǎn)品特性、技術(shù)參數(shù)、功能指標(biāo)方面都截然不同,小編就為各位探討一下,選擇多功能酶標(biāo)儀需要注意到的一些因素,希望能幫助各位找到適合的產(chǎn)品。
 
  一、濾片Vs光柵
 
  多功能酶標(biāo)儀的分類方法眾多,但簡單的莫過于用他們的濾光方式來作分界線。一般來說,可以分為濾光片型和光柵型兩大類。當(dāng)然也有一些機器里面同時裝上了濾光片和光柵。但是濾片和光柵并不能同時完成同一個檢測,還是想用光柵的時候用光柵,該用濾片的時候用濾片;還有一些實驗非用其中一個不可,另一模塊實現(xiàn)不了的。所以這類儀器本質(zhì)上還只是把濾片和光柵放在了一起,并沒有使兩者糅合而產(chǎn)生新的技術(shù)突破。
 
  總體來說,濾片技術(shù)由于發(fā)展已久,配合二向色鏡(其實也就是另一模式的濾光反光濾鏡)等光路系統(tǒng),可以實現(xiàn)大部分實驗的需要。但是濾光片型儀器由于受限于濾片的波長和數(shù)量限制,不可能滿足日益增加的實驗類型的檢測需要,而且有時需要對物質(zhì)的吸收、激發(fā)和發(fā)射光譜進行研究,所以后來就誕生了光柵型的儀器。光柵型酶標(biāo)儀的推陳出新,使得用戶在波長選擇上不再受限,而且在雜光率、帶寬控制等性能上還超越了濾光片系統(tǒng)。這些都是目前濾光片型酶標(biāo)儀所不能或者較難實現(xiàn)的。
 
  二、雜光率&波長準(zhǔn)確性
 
  光柵型濾光系統(tǒng)儼然已經(jīng)成為了目前通用性多功能酶標(biāo)儀的主流,多家廠家共同努力,已經(jīng)把光柵技術(shù)推到了歷史新高。在光柵的眾多技術(shù)參數(shù)之中,關(guān)鍵的無疑就是光柵的雜光率和波長選擇的準(zhǔn)確性了。
 
  雜光率指得就是光源通過光柵后,得到的光線中,“不需要”的波長的光占所標(biāo)稱波長的光的比例,表征了濾光的純度。由于光線干涉、衍射等的復(fù)雜性,無論使用濾光片還是光柵,雜光都是不可避免的。各種濾光技術(shù)的本質(zhì)就是要想辦法把雜光盡可能地去掉。
 
  一般來說,濾光片型的雜光率在10-4~10-5之間,光柵型的可以做到10-6~10-7。由于此類雜光是非特異的,而且會直接進入檢測器,所以有多少的雜光就會引入多少的隨機誤差。在熒光等檢測過程中,由于檢測器存在放大效應(yīng),雜光率的干擾也會被指數(shù)級放大。因此,雜光率就是一個濾光系統(tǒng)的首要性能指標(biāo)。
 
  光柵的另一個重要指標(biāo)就是波長選擇的準(zhǔn)確性。因為很多檢測是依賴于物質(zhì)在某個波長的特征圖譜。就像DNA/RNA的OD260濃度測定,實際檢測波長偏離260nm幾個nm以上的話,OD值與濃度之間的數(shù)學(xué)關(guān)系就會發(fā)生改變。因此,一組性能優(yōu)良的光柵系統(tǒng),他的波長選擇準(zhǔn)確性應(yīng)該是在±0.5~1nm之間。波長偏離過大有時就會影響到結(jié)果的準(zhǔn)確性。
 
  這兩個可謂是光柵甚至濾光片濾光系統(tǒng)關(guān)鍵的技術(shù)參數(shù),直接影響到的是得到數(shù)據(jù)是否是真正所要測量的結(jié)果,是實驗結(jié)果可靠性的基本要求。
 
  三、認(rèn)證>參數(shù)
 
  在保證檢測可靠的基礎(chǔ)上,不同儀器的下一個差異就體現(xiàn)在檢測的靈敏度上面,這時人們關(guān)心的就是儀器能夠檢測到多弱的信號。
 
  靈敏度涉及了整個光路系統(tǒng)的設(shè)計和選料,很難說某一個部件會起決定性作用。但是有一點,在各種單功能檢測項目中,光吸收檢測用非放大型的光電二極管、熒光檢測用光電倍增管、發(fā)光檢測用專門設(shè)計的單光子計數(shù)光電倍增管,這三種不同的檢測器是各自檢測領(lǐng)域的優(yōu)先選擇。
 
  各單項檢測的結(jié)果都是用相應(yīng)檢測器完成的。當(dāng)然也有的儀器出于成本等考慮,用一個檢測器兼容多種檢測模式,這在一定程度上也能完成實驗需求,但是在性能上也會有所犧牲折中,無法實現(xiàn)各項檢測都達(dá)到優(yōu)化。
 
  關(guān)于靈敏度的定義和檢測標(biāo)準(zhǔn),每個廠家都有各自的描述,都會說自己是怎樣怎樣好,很難有一個直觀的客觀比較。因此,某些試劑廠家就站了出來,對某些儀器的檢測性能提供一個第三方的認(rèn)證。
 
  比較常見的是發(fā)光檢測領(lǐng)域里面的Promega公司DLReady認(rèn)證,熒光檢測領(lǐng)域的Invitrogen公司的LanthaScreen系列認(rèn)證、Cisbio公司的HTRF認(rèn)證、BellBrook實驗室的Transcreener認(rèn)證等等。這些認(rèn)證主要是針對公司提供的某一類型的要求較高的試劑盒,涵蓋了對檢測儀器的各種性能要求,包括:檢測方法是否能用,靈敏度、線性范圍、孔間干擾等是否滿足要求等等。
 
  如果需要做相關(guān)的實驗,例如做Luciferase發(fā)光檢測的就看看儀器是否有DLReady認(rèn)證、做TR-FRET的就看看HTRF認(rèn)證、做FP就看看Transcreener認(rèn)證,如果機器擁有相關(guān)的認(rèn)證,就可以說明該機器在一定程度上能夠較好地滿足類似檢測的各種需求,遠(yuǎn)比單單比較一個靈敏度參數(shù)更能說明問題。因為一個實驗?zāi)芊褡龊貌⒉皇菃螁我粋€靈敏度就能表征的。
 
  需要特別注意的是,LanthaScreen是一個系列的認(rèn)證,涵蓋了FI、FRET、TRF、FP等多個子項目,不同儀器所通過的子項目是不一樣的,需要上Invitrogen網(wǎng)站仔細(xì)查詢核對。
 
  光柵型的儀器由于新技術(shù)近幾年才逐漸興起,受限于技術(shù)研發(fā)和儀器成本,同一個價格范圍內(nèi)的靈敏度等指標(biāo)會略差于發(fā)展成熟的濾光片機器。所以,在中檔多功能酶標(biāo)儀領(lǐng)域,拿到了各種認(rèn)證的光柵型儀器并不多見。
 
  而作為新一代光柵型酶標(biāo)儀的代表作,TECAN M1000已經(jīng)拿到了全部上述四種認(rèn)證,而且在靈敏度等單項性能上也已經(jīng)超越了不少的中濾片型酶標(biāo)儀。
 
  這說明了光柵型酶標(biāo)儀的研發(fā)又進入了一個新的高度,除了在靈活性上取得了無可替代的作用外,還在檢測靈敏度等方面也逐漸替代傳統(tǒng)的濾光片型酶標(biāo)儀。光柵型是科研領(lǐng)域多功能酶標(biāo)儀的未來主要發(fā)展趨勢;而濾光片型儀器也正在往單項性能更優(yōu)的方面改進。
 
  四、比色杯+微量檢測
 
  除了常規(guī)的6~384/1536孔酶標(biāo)板檢測之外,有些儀器還附帶了比色杯、微量檢測板等的兼容功能。無論是使用立式比色杯、臥式比色杯還是各種微量檢測板,其目的都是給光程不固定的酶標(biāo)板檢測引入一個標(biāo)準(zhǔn)光程的概念。雖然酶標(biāo)板檢測也能通過光程校正等方式實現(xiàn)10mm光程OD值的換算,但這只是一個數(shù)學(xué)轉(zhuǎn)換過程,檢測誤差累積較多,實際使用效果不佳。引入比色杯和微量檢測板后,光吸收的檢測光程就被固定在10mm或者0.5mm等的標(biāo)準(zhǔn)長度,OD值換算更加簡單和準(zhǔn)確。附帶了此類檢測功能的酶標(biāo)儀,相當(dāng)于除了本身的多功能酶標(biāo)檢測之外,還能替代部分分光光度計的功能,使其功能更加全面,儀器的性價比更高。
 
  目前,部分品牌已經(jīng)在國內(nèi)多個城市設(shè)立了分公司、辦事處或者工程師。選購之前可以多與工程師交流,充分了解各家的性能特長和售后情況,反復(fù)對比,總能找到適合自己需要的一款多功能酶標(biāo)儀。
 

酶標(biāo)儀的選擇

  面對類型如此眾多的酶標(biāo)儀,實驗室在選擇時往往有難以適從的感覺。

  一般來說,用于酶免疫測定比色的酶標(biāo)儀可分為普通酶標(biāo)儀,多功能全自動酶標(biāo)儀和全自動酶免疫分析系統(tǒng)等,普通酶標(biāo)儀的功能基本上相當(dāng)于一個微孔板比色計,而多功能全自動酶標(biāo)儀除了有微孔板比色功能外,還有酶標(biāo)動力學(xué),紫外乃至凝集等多種檢測功能;全自動酶免疫分析系統(tǒng)則有試劑“開放”和“限定”之分,所謂試劑“開放”是指不同品牌的ELISA試劑均可用于該儀器,而試劑“限定”則必須使用儀器專用的酶免測定試劑。

 

  實驗室在選擇酶標(biāo)儀時,一般應(yīng)遵循這樣幾條原則:

  1.根據(jù)工作需要去選擇

  切忌刻意去求功能多,因為一則如果儀器功能過多,易出故障,二則有些功能如酶標(biāo)動力學(xué)或凝集等,可能根本就用不上;如果擬購置的酶標(biāo)儀主要是用于定性測定,則不必要求完美的定量所需的軟件系統(tǒng)。至于全自動酶免疫分析系統(tǒng)則對工作量比較大的血站或大型醫(yī)院較為適用,對于日常工作量不太大的實驗室,就無必要。

  2.根據(jù)酶標(biāo)儀的性能去選擇

  反應(yīng)酶標(biāo)儀性能的指標(biāo)主要有測定波長范圍,濾光片配置,檢測速度,吸光度范圍,線性范圍,分辨率,準(zhǔn)確度,精密度等。

  3.根據(jù)自己實驗室的財力去選擇

  酶標(biāo)儀品種類型多,由于性能不一,價格自然也就相差較大,實驗室可根據(jù)自己的財力去選擇性能/價格比較為合適的酶標(biāo)儀。

  4.根據(jù)售后服務(wù)去選擇

  實驗室儀器買了以后,就跟我們家里使用的家用電器一樣,在使用過程中及使用一段時間之后,很可能就會有保修或維修方面的問題,因此一定要選擇售后服務(wù)好的公司的酶標(biāo)儀。

  5.根據(jù)實驗室人員的外語水平去選擇

  進口酶標(biāo)儀現(xiàn)有不少已使用中文人機對話,對于英語上有困難的實驗室,應(yīng)盡可能選用此類酶標(biāo)儀。

  確定了選擇原則以后,就是怎樣去選擇了。選擇的步驟首先是要獲取有關(guān)酶標(biāo)儀的信息資料,一般有這樣幾條途徑:

  ①向已購不同酶標(biāo)儀的多家實驗室同行咨詢訪問,獲取最直接的使用效果的信息;

 ?、诿笜?biāo)儀銷售商的信息廣告及介紹;

 ?、蹤?quán)威機構(gòu)的儀器評估報告。

  獲取了盡可能多的酶標(biāo)儀信息資料后,就是對不同類型的酶標(biāo)儀的性能指標(biāo)進行比較,選擇較為適合本實驗室的一種或二,三種再向銷售商作進一步的詳細(xì)咨詢了解,以決定選擇哪一種進行自檢。

標(biāo)簽: 酶標(biāo)儀
酶標(biāo)儀標(biāo)簽: 酶標(biāo)儀的選擇_酶標(biāo)儀組合標(biāo)題:

酶標(biāo)儀常見故障及處理方法

  任何儀器在使用時往往都會出現(xiàn)一些小故障,酶標(biāo)儀儀器也一樣,下面將與大家分享酶標(biāo)儀的一些常見故障及處理方法:  1、酶標(biāo)儀開機后無反應(yīng),出現(xiàn)這種情況請檢查電源線是否接好,保險絲是否燒斷?! ?、測量的吸收值與目測結(jié)果相差很大或偏低,出現(xiàn)這種情況是由于濾光片參數(shù)錯誤,測量濾光片沒有正確的進入光路,測量光的波長與正確測量光的波長相差大致使結(jié)果失真。由于電源或其它原因,有時會造成儀器存儲的濾光片參數(shù)丟失或錯誤。此時應(yīng)進行檢查并重置參數(shù)  3、酶標(biāo)儀打印機出現(xiàn)異常,出現(xiàn)此情況: ?、僬垯z查打印機無紙或紙未裝好,此時裝好打印紙便可。 ?、谡垯z查打印機是否聯(lián)機。 ?、鄞蛴C有開機順序,需先開打印機,后開儀器;有的需先開儀器,后開打印機。 ?、艽蛴C聯(lián)線出現(xiàn)異常:有些配備的新打印機聯(lián)線仍有問題,應(yīng)確保打印機聯(lián)線無問題?! ?、酶標(biāo)儀調(diào)不出所編輯程序:如在臨界值模塊下編輯儲存的程序必須要在臨界值模塊下調(diào)出。

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