二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境,如穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度、較高的相對飽和濕度(95%),來對細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。 二氧化碳培養(yǎng)箱有氣套式加熱和水套式加熱兩種加熱方式,兩種加熱系統(tǒng)都是精確和可靠的,同時它們都有著各自的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。 1.氣套式加熱: 氣套式加熱是通過遍布箱體氣套層內(nèi)的加熱器直接對內(nèi)箱體進(jìn)行加熱的,又叫六面直接加熱。套式與水套式相比,具有加熱快,溫度的恢復(fù)比水套式培養(yǎng)箱迅速的特點(diǎn),特別有利于短期培養(yǎng)以及需要箱門頻繁開關(guān)取放樣的培養(yǎng)。此外,對于使用者來說氣套式設(shè)計比水套式更簡單化,水套式需要對水箱進(jìn)行加水、清空和清洗,并要經(jīng)常監(jiān)控水箱運(yùn)作的情況,還有潛在的污染隱患。 2.水套式加熱: 水套式加熱是通過一個獨(dú)立的水套層包圍內(nèi)部的箱體來維持溫度恒定的,其優(yōu)點(diǎn):水是一種很好的絕熱物質(zhì),當(dāng)遇到斷電的時候,水套式系統(tǒng)就可以比較長時間的保持培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,有利于實(shí)驗環(huán)境不太穩(wěn)定的用戶選用。
二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)通常采用兩種方式控制箱體內(nèi)濕度。一是采用被動控濕法,即通常的二氧化碳培養(yǎng)箱內(nèi)均放置一個3L的水盤,內(nèi)盛3L無菌純水,37度的溫度,水自然蒸發(fā),使箱體內(nèi)濕度達(dá)到95%。二是一些高級的二氧化碳培養(yǎng)箱,采用主動加濕系統(tǒng)(蒸汽發(fā)生器,加熱水盤,噴霧器等),可以 控制箱體內(nèi)的濕度,如低溫培養(yǎng)時(低溫二氧化碳培養(yǎng)箱)就需要主動加濕的方法?! ∷P污染控制問題:這種高濕度條件下,放置在箱體內(nèi)部的水盤中的純凈水,很容易造成微生物的滋生,產(chǎn)生污染,導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)完全失敗?! ∧壳?,控制水盤內(nèi)污染的方法有如下幾種: 1、定期(至少每兩周一次),更換水盤內(nèi)的無菌蒸餾水或無菌去離子水?! ?、在水盤內(nèi)添加適量硫酸銅,配制方法:20g無水硫酸銅+5ml濃硫酸+1L滅菌純水?! ?、夏季氣溫高時,水盤里加0.02%的疊氮鈉可以有效的預(yù)防真菌污染?! ?、水盤內(nèi)添加適量抗生素。 5、定期為培養(yǎng)箱(含水盤)進(jìn)行一次高溫滅菌。 6、使用專用的水盤污染控制試劑,如市面上有些CO2培養(yǎng)箱廠家提供水盤污染控制專用的銀離子消毒盒,說明書上描述能有效殺滅600中微生物,能持續(xù)使用6個月,但此類專用污染控制試劑較常規(guī)方法,存在價格較昂貴缺點(diǎn)。采用主動加濕的方式就不存在污染問題。