酶標(biāo)儀在臨床實(shí)驗(yàn)方面應(yīng)用廣泛,用于鑒別乙肝兩對半,HIV,鑒定DNA等許多方面,可以說它是臨床及醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)不可或缺的基礎(chǔ)設(shè)備。
故障一:測量的結(jié)果重現(xiàn)性不好,即使用空板測量誤差也在允許的范圍之外。
故障分析:檢查試劑發(fā)現(xiàn)沒有問題,檢查判定公式也沒有問題,檢查光路也沒有污染。幾經(jīng)周折終于發(fā)現(xiàn)卡微板的卡簧在伸縮后沒有卡到位,造成微板在測量時(shí)在機(jī)內(nèi)晃動影響測量結(jié)果不準(zhǔn)。
故障二:測量結(jié)果OD值偏低。
故障分析:排除完燈的能量值偏低后,檢查發(fā)現(xiàn)濾光片上有灰塵,用蒸餾水和擦鏡紙擦洗干凈晾干后故障排除。
測試方法:酶標(biāo)儀的儀器指標(biāo)在蕞佳狀態(tài),就儀器的精度測試和儀器的線性度介紹幾種測試方法。
精度測試:該過程可被用于檢測不同微板之間的測量精度。
使用新制備的在0.1% TWEEN20中的橘黃色甲基填充微孔,在每個(gè)微孔中使用不同稀釋度的溶劑以便獲得一個(gè)光密度范圍,首先確保每孔注入200mL液體,使用492nm慮光片測量至少3次,對每一微孔進(jìn)行下列計(jì)算:
(1)平均OD值;(2)蕞高和蕞低值;(3)平均值。蕞高和蕞低值之間的差值和百分比。讀數(shù)范圍在0.000到2.000Abs。同一孔平均值,蕞高值和蕞低值之間的差值應(yīng)該在+/一1.0%和+/一0.010OD范圍內(nèi)。
讀數(shù)范圍在2.000到3.000Abs同一孔平均值,蕞高和蕞低值之間的差值應(yīng)在+/一1.0% 和+/一0.005OD值范圍內(nèi)。讀數(shù)范圍在3.000Abs以上時(shí)準(zhǔn)確度不符合要求。
酶標(biāo)儀儀器線性度:儀器的線性度可使用一種溶劑的稀釋系列得到。如可在492 nIn處測量在0.1%TWEEN20中的橘黃色甲基的稀釋系列。
具體方法如下:在參考光密度計(jì)上測量被稀釋的溶劑,畫出OD值對已知濃度的點(diǎn)圖,并畫出通過這些點(diǎn)的蕞好的直線。將從系列稀釋中測得的吸光度值與該圖比較從而計(jì)算出各稀釋度的濃度。微板中每種稀釋度加入250t,-L,對每種稀釋至少使用兩個(gè)樣本,以便降低因加樣引起的誤差。 測量微板使用測量模式,利用測量得到的平均OD值和每個(gè)樣本的已知濃度畫一條OD濃度的曲線,從系列稀釋中測得的吸光值與該曲線比較從而計(jì)算出各稀釋度的濃度。
對光度記和本儀器,比較計(jì)算的濃度,不準(zhǔn)確度不應(yīng)大于以下,使用標(biāo)準(zhǔn)濾光片492nm時(shí)吸光度在0.000~2.000Abs+/一1%、2.000~3.000Abs+/一1.5%。使用梯度濾光片492nm時(shí),吸光度在0.000~2.500Abs+/一2%。
1.酶標(biāo)儀開機(jī)后無反應(yīng),出現(xiàn)這種情況請檢查電源線是否接好,保險(xiǎn)絲是否燒斷。
2.測量的吸收值與目測結(jié)果相差很大或偏低,出現(xiàn)這種情況是由于濾光片參數(shù)錯(cuò)誤,測量濾光片沒有正確的進(jìn)入光路,測量光的波長與正確測量光的波長相差大致使結(jié)果失真。由于電源或其它原因,有時(shí)會造成儀器存儲的濾光片參數(shù)丟失或錯(cuò)誤。此時(shí)應(yīng)進(jìn)行檢查并重置參數(shù)
3.酶標(biāo)儀打印機(jī)出現(xiàn)異常,出現(xiàn)此情況:
?、僬垯z查打印機(jī)無紙或紙未裝好,此時(shí)裝好打印紙便可。
?、谡垯z查打印機(jī)是否聯(lián)機(jī)。
?、鄞蛴C(jī)有開機(jī)順序,需先開打印機(jī),后開儀器;有的需先開儀器,后開打印機(jī)。
④打印機(jī)聯(lián)線出現(xiàn)異常:有些配備的新打印機(jī)聯(lián)線仍有問題,應(yīng)確保打印機(jī)聯(lián)線無問題。
4.酶標(biāo)儀調(diào)不出所編輯程序:如在臨界值模塊下編輯儲存的程序必須要在臨界值模塊下調(diào)出。
以上是酶標(biāo)儀在使用時(shí)出現(xiàn)的一些常見故障以及處理方法,希望能對您有幫助,如有其它問題也歡迎隨時(shí)聯(lián)系我們。
酶標(biāo)儀的功能是用來讀取酶聯(lián)免疫試劑盒的反應(yīng)結(jié)果,因此要得到準(zhǔn)確結(jié)果,試劑盒的使用必須規(guī)范。許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測判斷結(jié)果,操作過程隨意性較大,在使用酶標(biāo)儀后如果不能及時(shí)糾正操作習(xí)慣,會造成較大誤差。在酶標(biāo)儀的操作中應(yīng)注意以下事項(xiàng):
使用加液器加液,加液頭不能混用。
洗板要洗干凈。如果條件允許,使用洗板機(jī)洗板,避免交叉污染。
嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作,反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確。
在測量過程中,請勿碰酶標(biāo)板,以防酶標(biāo)板傳送時(shí)擠傷操作人員的手。
請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成后請洗手。
如果使用的樣品或試劑具有污染性、毒性和生物學(xué)危害,請嚴(yán)格按照試
劑盒的操作說明,以防對操作人員造成損害。
如果儀器接觸過污染性或傳染性物品,請進(jìn)行清洗和消毒。
不要在測量過程中關(guān)閉電源。
對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時(shí)修改參數(shù),以達(dá)到較佳效果。
使用后蓋好防塵罩。
出現(xiàn)技術(shù)故障時(shí)應(yīng)及時(shí)與廠家聯(lián)系,切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀。