紫外分光光度計就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其特有的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量。
紫外可見分光光度計詳細(xì)操作流程及校準(zhǔn)方法: 一、紫外可見分光光度計光度測量 在模式選擇屏幕中選擇<1.Photometric光度>選項,將顯示參數(shù)配置屏幕; 用GOTOWL鍵設(shè)定測量波長; 按F2鍵設(shè)定進(jìn)樣控制; 按START/STOP鍵時,測量開始,顯示測量屏幕; 如需做空白校正,應(yīng)在測量前先設(shè)置空白樣品,然后,按AUTO-ZERO鍵,將測量值置為OABS(100%); 二、紫外可見分光光度計校正 開機(jī)預(yù)熱10分鐘足矣; 放入黑塊和標(biāo)樣(沒有的自己配),關(guān)閉蓋子; 校0; 把燈光對著黑塊,把透光度調(diào)0; 把燈光對標(biāo)樣,將吸光度調(diào)到100%; 三、參比溶液介紹 參比溶液又稱空白溶液。測量時用作比較的、不含被測物質(zhì)但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常,用參比溶液掃描的曲線應(yīng)是一條平坦的直線。有時,基體中,雖不含被測物質(zhì),但含有別的物質(zhì),這時必須保證其不影響測試。經(jīng)常碰到的是試劑空白中含有被測物質(zhì),此時必須經(jīng)過純化將其除去。否則將影響測定結(jié)果?! ∷?、紫外可見分光光度計使用注意事項 1.開機(jī)前應(yīng)先預(yù)熱15分鐘,然后開機(jī)自檢; 2.濕度要控制在75%左右,溫度在5~30度之間; 3.儀器要穩(wěn)壓電源,接地要好。并且避免陽光直接照射; 5.常見故障及處理方法: 光門不能完全關(guān)閉:修復(fù)光門部件,使其完全關(guān)閉; 透過率“100%”旋到底了。解決方法:重新調(diào)整“100%”旋鈕; 儀器嚴(yán)重受潮:可打開光電管暗盒,用電吹風(fēng)吹上一會兒使其干燥,并更換干燥劑;以上為紫外可見分光光度計的具體操作方法及使用注意事項,希望能給予您幫助。
紫外分光光度計主要應(yīng)用于對有機(jī)物、無機(jī)物、蛋白、細(xì)菌生長濃度進(jìn)行定量,被廣泛的應(yīng)用于科研、化工、制藥、環(huán)保、衛(wèi)生、防疫等多個行業(yè)當(dāng)中。我們在選擇紫外分光光度計的時候?qū)τ谒倪x購方法是必須要掌握的,今天小編就來為大家具體介紹一下紫外分光光度計的選擇方法吧?! ?、儀器的光度準(zhǔn)確度 光度準(zhǔn)確度指實際測量的光度讀數(shù)值與真值之差。它是用戶對儀器的關(guān)鍵要求,需要優(yōu)先考慮?! ?、儀器的雜散光 它指不應(yīng)該有光的地方有了光。它是光譜測量中誤差的主要來源,一般這個值越小越好?! ?、儀器的光譜帶寬 是指從單色器射出的單色光譜線強(qiáng)度輪廓曲線的1/2高度處的譜帶寬度。體現(xiàn)儀器的光譜分辨率。按照比耳定律,一般情況下光譜帶寬應(yīng)該是越小越好,但如果儀器的光源能量弱,光學(xué)傳感器的靈敏度低時,光譜帶寬小了,也得不到理想的測量結(jié)果的。所以,選擇和使用儀器時一定注意多方面考慮。 4、儀器的穩(wěn)定性 穩(wěn)定性是用戶較為關(guān)注的核心指標(biāo)了,性能穩(wěn)定可靠是基本的要求?! ?、儀器的噪聲 噪聲也是儀器的重要參數(shù)指標(biāo),它體現(xiàn)了儀器的做稀溶液的能力。噪音指標(biāo)無疑越小越好。 6、儀器波長的準(zhǔn)確度及重復(fù)性 儀器的每個值都是在一定的波長下測得的,如果所示的波長和實際波長偏差過大,那么測出的值和真值的同樣相差很大,就談不上準(zhǔn)確了,所以說準(zhǔn)確度這個指標(biāo)非常重要。