色譜柱的安裝：
（1）拆開柱包裝盒，確認色譜柱的類型、 尺寸、出廠日期以及柱內(nèi)貯存的溶劑。
?。?）擰下柱兩端接頭的密封堵頭放回包裝盒供備用。
?。?）按柱管上標示的流動相流向，將色譜柱的入口端通過連接管與進樣閥出口相連接(如條件允許，建議在柱前使用保護柱)；柱的出口與檢測器連接。連接管是外徑為1.57mm、內(nèi)徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管。連接管的兩端均有空心螺釘及密封用壓環(huán)。在接管時一定要設(shè)法降低柱外死體積。連接管通過空心螺釘、壓環(huán)后盡量用力插到底，然后順時針擰緊空心螺釘，直到擰不動為止，再用扳手繼續(xù)順時針擰1／4-1／2圈，切記不要用力過大。如色譜柱通過流動相加壓后有漏液現(xiàn)象，請用扳手繼續(xù)順時針擰1／4圈，直至不漏液為止。
色譜柱的儲存:
1．防止緩沖溶液和水溶液流動相產(chǎn)生微生物，做到流動相用多少配多少，或在水流動相中加200ppm的疊氮鈉以抑制細菌成長（一定當(dāng)心其毒性和潛在的爆炸性）；或在流動相中加20%的有機改性劑，也可抑制微生物生長，有機改性劑還有助于流動相脫氣。
2．盡可能將色譜柱貯存于100%有機溶劑（乙晴比較好）中，避免在緩沖溶液中保存。
3．使用緩沖溶液后的色譜柱，應(yīng)用15～20倍柱體積的不含緩沖劑的同種水—有機溶劑流動相沖洗色譜柱，后換成100%有機溶劑儲存。
4．避免用純凈水沖洗鍵合致密的C18柱。
5．將色譜柱的兩端用堵頭擰好，以免柱床填料干裂。
在色譜分析過程中常常需要使用緩沖鹽來調(diào)節(jié)流動相的pH值，緩沖鹽的不當(dāng)使用對色譜柱可能造成柱壓升高、柱效下降以及使化合物的保留時間發(fā)生變化等影響： 1、柱壓升高； 原因：
緩沖鹽使用不當(dāng)導(dǎo)致緩沖鹽析出，堵塞塞板和鍵合相顆粒之間的孔隙，阻礙流動相質(zhì)，引起柱壓升高?！ ?、相同化合物的保留時間發(fā)生變化； 原因：
如果沒有沖洗干凈就進行進樣，色譜柱內(nèi)含有的鹽會使化合物的保留時間發(fā)生變化?！ ?、柱效下降； 原因： 1）有些緩沖鹽會滲入到鍵合相的深處，損害硅膠基體，導(dǎo)致色譜柱鍵合相流失，柱床變松，柱效下降； 2）凝結(jié)在鍵合相表面，使C18碳鏈難以舒展，對物質(zhì)的保留能力下降，導(dǎo)致柱效降?！ ∫虼擞眠^緩沖鹽后需要對色譜柱進行沖洗，水中緩沖鹽濃度較大時應(yīng)特別引起注意。
當(dāng)色譜柱使用一段時間以后，柱內(nèi)由于各種原因，滯留了一些高沸點組分或氧化物等，除柱效有所下降外，還可能出現(xiàn)基線波動或“鬼峰”。為了去除污染物，使柱效和基線恢復(fù)到原來的狀態(tài)，稱為色譜柱的再生。色譜柱的再生和柱老化有一定區(qū)別和不同，它是柱在使用一段時間柱性能下降，經(jīng)處理后盡量恢復(fù)到原來性能的過程?！ 、色譜柱在以下幾種情況必須再生處理 a.使一段時間，柱效明顯下降； b.柱被污染，特別是在程序升溫時，基線漂移和噪聲超過容忍程度或出現(xiàn)“鬼峰”； c.柱頭塌陷，柱床短路或斷位(在玻璃柱中容易發(fā)現(xiàn))，而出現(xiàn)尖峰或雙重峰； d.峰形展寬，保留時間明顯變化； e.待分離組分和固定相表面非特異性相互作用，引起保留時間較短的峰拖尾或出現(xiàn)雙峰； B、毛細管柱再生的幾種方法 a.用載氣將色譜柱污染物沖洗出來； b.將柱頭截去100mm 或更長一些； c.若使用交聯(lián)的色譜柱，可在儀器上反復(fù)注射溶劑進行沖洗。常用的溶劑依次為丙酮、甲苯、乙醇、氯仿和二氯甲烷，每次可進樣5～10μL； d.交聯(lián)柱在儀器上沖洗無效時，可把柱拆下來用二氯甲烷或氯仿沖洗，溶劑用量視柱的污染程度而定，一般20mL 左右?！ 、色譜柱再生前應(yīng)注意的問題 當(dāng)分析出現(xiàn)問題時，不能只考慮是柱問題，而馬上進行再生。除上述情況外，還應(yīng)考慮樣品處理、進樣技術(shù)、操作有無失誤、數(shù)據(jù)處理參數(shù)有無改變等可能帶來的問題。 a.襯管、預(yù)柱和檢測器被污染也會引起基線不穩(wěn)定、出現(xiàn)“鬼峰”或裂解峰； b.新的注射墊也會引起基線漂移和出現(xiàn)“鬼峰”； c.襯管密封欠佳、柱安裝死體積或檢測器固有特性也會引起較早出現(xiàn)峰的拖尾； d.分析系統(tǒng)發(fā)生變化(如漏氣嚴重)也可能使保留時間突變； e.峰變寬，除柱效下降外也可能由柱外效應(yīng)引起； f.進樣量太大也會引起峰變寬、拖尾或保留時間變短； g.色譜柱長時間樣品過載，保留時間也會變小等。 D、色譜柱再生時應(yīng)注意的幾個問題 1.如前所述和色譜柱老化一樣，不是溫度越高越好，時間越長越好；建議不要使用長時間烘烤的方法，來處理受到污染的色譜柱，因為烘烤時，溫度會把污染的殘留物變成不能溶解的物質(zhì)，再用溶劑清洗也無濟于事； 2.儀器在高靈敏度操作時，如：量程在1×10-11A/mV以下，痕量分析程序升溫過程中，溫度升到大于180℃后，基線明顯漂移是不可避免的； 3.不同類型柱子，再生方法不同； 4.樣品種類、組分、進樣量不同或操作時間長短不同，再生方法也不同； 5.儀器本身條件如：氣源種類、純度、凈化條件、進樣口結(jié)構(gòu)和操作檢測器不同，再生柱方法也有區(qū)別； 6.高分子量組分污染色譜柱后，高溫再生時間長會導(dǎo)致固定相的老化；使用交聯(lián)或鍵合柱可以用溶劑漂洗再生，漂洗溶劑流動方向一定要從柱出口注入。應(yīng)該注意，毛細管柱交聯(lián)鍵合率通常不到90%，因此會漂洗掉未化學(xué)結(jié)合的液相部分，所以保留時間和分離狀態(tài)會有所變化； 7.對于難揮發(fā)物，碳化物是不能通過再生除去，對于填充柱可以使用帶襯管氣化室進樣器，對于毛細管可通過把柱入口切去30～50cm的方法除去污物段。有條件的可以使用預(yù)柱，把不揮發(fā)的有機物、無機物和顆粒材料阻留在預(yù)柱中，需要時更換預(yù)柱； 8.在某些情況下，色譜柱要在溫度極限附近使用，這時基線漂移和大噪聲已不可避免，柱的再生要求只能視情況而定； 9.不是所有色譜柱通過再生均能恢復(fù)原來性能。
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