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熒光分光光度計(jì)的基本原理 光度計(jì)工作原理

時(shí)間:2020-05-24    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
熒光分光光度計(jì)的發(fā)展經(jīng)歷了手控式熒光分光光度計(jì),自動記錄式熒光分光光度計(jì),計(jì)算機(jī)控制式熒光分光光度計(jì)三個(gè)階段;熒光分光光度計(jì)還可分為單光束式熒光分光光度計(jì)和雙光束式熒光分光光度計(jì)兩大系列。其他的還有低溫激光Sh p ol’skill熒光分光光度計(jì),配有壽命和相分辨測定的熒光分光光度計(jì)等。
熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。通過對這些參數(shù)的測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化, 從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計(jì)的激發(fā)波長掃描范圍一般是190~650nm,發(fā)射波長掃描范圍是200~800nm??捎糜谝后w、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描。
熒光分光光度計(jì)的基本原理
由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過濾過和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。
物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光.
在溶液中,當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時(shí),其熒光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即IF=KC,利用這種關(guān)系可以進(jìn)行熒光物質(zhì)的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似,熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進(jìn)行。
不同物質(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜;,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。

需要關(guān)注的雙光束紫外可見分光光度計(jì)特點(diǎn)

    雙光束紫外分光光度計(jì)開發(fā)出能夠進(jìn)行定量測量(標(biāo)準(zhǔn)曲線測量,可對物質(zhì)進(jìn)行濃度直讀);動力學(xué)測試(測出物質(zhì)濃度隨時(shí)間變化OD值的變化);光譜掃描(可以對某一種物質(zhì)進(jìn)行全波段掃描,分析物質(zhì)的特征波長,判斷實(shí)驗(yàn)過程的誤差);還有可以進(jìn)行DNA/蛋白質(zhì)測試、總磷總氮測試、重金屬測試、農(nóng)藥殘留測試、食品安全檢測、熱力發(fā)電金屬離子測試等等,廣泛應(yīng)用于食品、藥品、電力、生物研究、教學(xué)科研、化學(xué)化工、質(zhì)量監(jiān)督、水質(zhì)環(huán)保和商檢等各大領(lǐng)域。

    雙光束紫外分光光度計(jì)儀器特點(diǎn):

    1、使用32位微控制器ARM11,其主頻可達(dá)到533MHz,采用美國BB公司專為光電數(shù)據(jù)采集處理的20位高性能AD,性能穩(wěn)定,可通過USB接口存儲轉(zhuǎn)移數(shù)據(jù)。

    2、功能強(qiáng)大,主機(jī)可獨(dú)立完成光度測量、定量測量、光譜掃描、動力學(xué)、DNA/蛋白質(zhì)測試,多波長測試及數(shù)據(jù)打印等功能。

    3、儀器采用7英寸LCD彩屏顯示器,直接顯示掃描圖譜,屏幕界面簡單,方便使用。

    4、設(shè)計(jì)獨(dú)特的光學(xué)系統(tǒng),高性能1200條/mm光柵和進(jìn)口接收器確保儀器有優(yōu)良的性能指標(biāo)。

    5、插座式氛燈和鎢燈設(shè)計(jì),換燈后免光學(xué)調(diào)試。

    6、 24位高速、高精度A/D轉(zhuǎn)換,儀器精度高,反應(yīng)速度快。

    7、寬大的樣品室,可容納5-100mm各種規(guī)格的比色皿

    8、可直接連接打印機(jī),打印圖譜和實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

    9、儀器采用懸架式光學(xué)系統(tǒng)設(shè)計(jì)和長光程光路設(shè)計(jì),從而大大提高了儀器的穩(wěn)定性和可靠性以及儀器的光學(xué)分辨率

    10、WINDOWS圖形化界面,方便選擇,快捷操作。

    11、全新改良的絲桿傳動機(jī)構(gòu),使儀器波長精度重復(fù)性好,波長精度高。

    其它附屬功能:

    A:波長校準(zhǔn)

    B:光度精度復(fù)核

    C:波長精度復(fù)核

    D:能量最大點(diǎn)尋找(用于微量測試)

    E:可直接連接HP和Epson打印機(jī)打印實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和圖譜。

    準(zhǔn)雙光束掃描型紫外可見分光光度計(jì)主要特點(diǎn):

    1.具有高分辨率、良好的穩(wěn)定性、重復(fù)性。外觀新穎操作方便。

    2.斷電保持:斷電時(shí)可保持內(nèi)存的測量數(shù)據(jù)不丟失。

    3.LCD大屏幕顯示、菜單式操作界面,輕觸式按鍵,外觀新穎操作方便。

    4.儀器內(nèi)部采用插鍵式組裝方法,更換零件無須專用工具,維修方便。

    5.所有設(shè)置參數(shù)和試驗(yàn)結(jié)果均能存儲,自動記錄燈的點(diǎn)亮?xí)r間。

    紫外可見分光光度計(jì)是一種應(yīng)用很廣的分析儀器。當(dāng)前已成為全世界使用較多、覆蓋應(yīng)用面廣泛的分析儀器。它的應(yīng)用領(lǐng)域涉及制藥、醫(yī)療衛(wèi)生、化學(xué)化工、環(huán)保、地質(zhì)、機(jī)械、冶金、石油、食品、生物、材料、計(jì)量科學(xué)、農(nóng)業(yè)、林業(yè)、漁業(yè)等領(lǐng)域中的科研、教學(xué)等各個(gè)方面,用來進(jìn)行定性分析、純度檢查、結(jié)構(gòu)分析、絡(luò)合物組成及穩(wěn)定常數(shù)的測定、反應(yīng)動力學(xué)研究等。因?yàn)閮x器涉及到光學(xué)、電學(xué)和結(jié)構(gòu)等,所以它需要在一定的環(huán)境中應(yīng)用。

標(biāo)簽: 光度計(jì)
光度計(jì) 需要關(guān)注的雙光束紫外可見分光光度計(jì)特點(diǎn)_光度計(jì)

熒光分光光度計(jì)的優(yōu)缺點(diǎn)

  熒光分光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強(qiáng)度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個(gè)角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。

  熒光分光光度計(jì)的基本原理:

  由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍(lán)紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過濾過和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。 物質(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子 吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光。

  不同物質(zhì)由于分子 結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜;,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進(jìn)行物質(zhì)的鑒定。

  熒光分光光度計(jì)的優(yōu)缺點(diǎn):

  優(yōu)點(diǎn):靈敏度高,可以用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜,不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化, 從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。

  缺點(diǎn):

  1、熒光的光強(qiáng)并不高,所以呈線性情況有時(shí)不很理想;

  2、某些反應(yīng)熒光持續(xù)的時(shí)間較短;

  3、熒光的發(fā)散方向不集中,不像透射光那樣集中,強(qiáng)度高;

  4、受某些離子的干擾影響,熒光會湮滅,試驗(yàn)速度必須要快。

標(biāo)簽: 熒光分光光度計(jì)
熒光分光光度計(jì) 熒光分光光度計(jì)的優(yōu)缺點(diǎn)_熒光分光光度計(jì)

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