在色譜分析中，使用自動進樣器可以減少偶然誤差，又加上非人工操作，所以快速準(zhǔn)確。配置好足夠的樣品任其自動取樣、進樣，色譜工作者可以做其他的事情，然后由電腦控制的色譜系統(tǒng)自動分離、自動檢測、自動打印報告。
目前市面上大部分色譜自動進樣器的結(jié)構(gòu)、原理都差不多，大致由四部分組成：連著步進電機的注射器、外裝式六通進樣閥、代替樣品環(huán)管的進樣針頭和樣品盤架、與檢測系統(tǒng)信號相關(guān)的計時器和觸動器。
不同自動進樣器的差異在于如何從樣品小瓶中轉(zhuǎn)移樣品到支架環(huán)管中，一般有注射法和頂替法兩種類型。這里克萊克特自動進樣器主要講講注射法的知識。
每個樣品分析周期由計時器控制，樣品分析完畢后有三個自動化的動作：①促動器發(fā)出信號轉(zhuǎn)動進樣閥到裝樣位；②提升進樣針頭，同時轉(zhuǎn)動支架，將準(zhǔn)備進樣的小瓶對準(zhǔn)進樣針頭，進樣針頭下降刺破樣品小瓶密封膜進入樣品溶液；③步進電機向上拉動注射芯子抽取小瓶中的樣品，完成裝樣步驟。
在轉(zhuǎn)動進樣閥到進樣位的同時向上提升進樣針頭，轉(zhuǎn)動支架移開已進過樣的小瓶后，進樣針頭下降接通支架管道，流動相的流向和“復(fù)位”狀態(tài)一樣，將樣品送入色譜柱進行分離，再到檢測器測定。
自動進樣器的故障容易被發(fā)現(xiàn)，有時液相色譜儀系統(tǒng)出了故障而不能確定是否是進樣器故障，可以用手動進樣幾次，或用一臺好的自動進樣器代替，如排除了故障，說明自動進樣器有了問題。不同廠商的自動進樣器差異很大，除一些共性故障外，較好查閱操作手冊或與供應(yīng)商聯(lián)系。
除自動進樣器機械、控制系統(tǒng)可能出現(xiàn)故障外，在操作及方法學(xué)方面也可能出現(xiàn)相應(yīng)的問題，這里主要根據(jù)自動進樣器的設(shè)計特點，對試驗過程中可能出現(xiàn)的問題進行說明。
一、滯后體積
高效液相色譜儀中滯后體積是指流動相混合器到柱頭的體積，包括溶劑混合器和混合器到柱頭之間連接管的體積，對于低壓混合系統(tǒng)，也包括泵體積。滯后體積較大可能導(dǎo)致實驗的重復(fù)性差、方法移植困難。通常的HPLC系統(tǒng)中，滯后體積一般在0.2mL～5mL之間，主要取決于裝置的設(shè)計。
滯后體積中較重要的部分為自動進樣器的定量環(huán)體積。只有定量環(huán)體積小于100μL時，其對滯后體積的影響才可以近似不計。當(dāng)定量環(huán)體積較大時，這種影響將表現(xiàn)出來。例如，采用50μL的定量環(huán)時滯后體積為300μL，如果改用1mL定量環(huán)，滯后體積將變成1250μL，這種變化直接影響到色譜分離結(jié)果。在實際分離過程中，采用的色譜柱較細時，必須考慮滯后體積的影響，解決的辦法為更換較小的定量環(huán)，減小滯后體積。
二、樣品瓶過滿
如果樣品瓶過滿，在瓶蓋較緊、進樣量較大的情況下，可能會導(dǎo)致進樣重復(fù)性變差。其原因為樣品瓶中的樣品被抽出時，蓋緊的瓶蓋不能使空氣及時進入，造成部分真空。由于這種真空作用，注射器不能夠吸取足夠量的樣品體積。在極端的情況下，對于揮發(fā)性稀溶液樣品，針內(nèi)甚至?xí)霈F(xiàn)氣泡，影響分析工作的正常進行。
有些自動進樣器采用加排空針的方法克服這一問題，但這種方法并不常用。較簡單的解決辦法為不要使樣品瓶過滿。一般裝樣量在樣品瓶的1／2到3／4之間較為適宜。
三、進針深度的調(diào)節(jié)
樣品量足夠多時，不必考慮這一問題。但對于痕量分析而言，進針深度的調(diào)節(jié)問題將較為突出。理想的情況下可以使進針深入到接近樣品瓶底部，這樣可以較大限度地利用樣品。當(dāng)可用的樣品體積有限時，可以采用微量樣品瓶以增加給定體積樣品的相對深度。如果進針過深，可能插入樣品瓶的底部，甚至導(dǎo)致針尖阻塞。如果進針深度不足，樣品只及針尖部分，針將不能抽取足夠量的樣品，部分空氣取而代之。
對于進針深度的調(diào)節(jié)，一般采用機械或電動的方法，目前大部分廠商可以在液相色譜儀色譜工作站上設(shè)置。無論采用哪種方法，實驗之前都必須認真調(diào)節(jié)，更換樣品瓶類型時還需要重新調(diào)整。
在氣相色譜分析中，記憶效應(yīng)是指當(dāng)前分析的色譜圖上有的峰是來自前次分析的樣品。記憶效應(yīng)的存在，會導(dǎo)致出現(xiàn)不正確的色譜峰，影響分析結(jié)果的精準(zhǔn)性。
下面就來說說如何消除樣品的記憶效應(yīng)。
一般來說，自動進樣器可以通過執(zhí)行溶劑洗針、樣品洗針以及樣品抽?。ㄉ舷峦评樞荆﹣砜刂葡龢悠返挠洃浶?yīng)。這三個功能都可以降低進樣后殘留在進樣針中的樣品濃度，確保樣品不會被前次進樣的樣品所污染。
溶劑洗針：在溶劑洗針過程中，進樣器從A或B瓶中抽取注射器體積80%的溶劑，然后將溶劑排放到一個廢液瓶中。溶劑洗針的設(shè)置可以在取樣之前，也可以在進樣之后立即進行。
樣品洗針：在樣品洗針過程中，進樣器從下一次要進樣的樣品瓶中抽取進樣針體積80%的樣品，然后將進樣針中的樣品排放到一個廢液瓶中。樣品洗針在取樣之前進行。當(dāng)樣品量有限時，您可用一種溶劑在抽取樣品之前預(yù)先濕潤進樣針。
樣品抽取（上下推拉針芯）：在樣品抽?。ㄉ舷峦评樞荆┻^程中，進樣器從下一次要進樣的樣品瓶中抽取進樣針體積80%的樣品，然后將樣品排放到該樣品瓶中。抽?。ㄉ舷峦评樞荆┰跇悠废瘁樦蠛腿又斑M行，作用是消除氣泡。
自動進樣器的圓形密封墊和固定底座緊密結(jié)合，操作時可以轉(zhuǎn)動，一般用較為柔軟的材料組成，比如碳氟聚合物。自動進樣器的圓形密封墊是通過電動馬達帶動的，上面刻有一些細小的刻槽用于連接到不同的固定底座位置。
隨著自動進樣器的不斷發(fā)展，越來越多型號和功能的自動進樣器出現(xiàn)在實驗室分析中，自動進樣器所能容納的樣品量越來越多，進樣速度越來越快，進樣精度越來越高，智能化程度越來越好，可應(yīng)用范圍也越來越廣。
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