我們?cè)撊绾问褂米贤饪梢姽?font color="#0268CA">光度計(jì)進(jìn)行雜光散光測(cè)試呢?下面跟我一起來了解一下吧。
據(jù)了解，有的紫外可見光光度計(jì)只測(cè)試220nm處的雜散光，不測(cè)試340nm處的雜散光，這樣是不正確的，需測(cè)試220nm處雜散光是因?yàn)椋?/p>
①根據(jù)儀器學(xué)理論中的電光源理論，氘燈在220nm處能量很小，即信號(hào)很小，容易顯現(xiàn)雜散光;
②根據(jù)儀器學(xué)理論中的光電發(fā)射理論，光電倍增管在220nm處的光譜響應(yīng)(靈敏度)低，容易顯現(xiàn)雜散光。
③根據(jù)量子光學(xué)理論，波長(zhǎng)是能量的倒數(shù)，波長(zhǎng)短能量大，容易產(chǎn)生雜散光，而220nm處屬于短波部分;
而測(cè)試340nm處雜散光的原因是完全不同的，因?yàn)?40nm處一般是氘燈換鎢燈和儀器調(diào)換濾光片的地方，此時(shí)最容易產(chǎn)生雜散光。所以，對(duì)于紫外可見光光度計(jì)來講，應(yīng)該測(cè)試220nm和340nm兩處的雜散光。
紫外可見光光度計(jì)雜散光測(cè)試步驟：
1、首先將參比液注入配對(duì)石英石吸收池，分別放置在參比池座和試樣池座內(nèi)。再測(cè)定波段掃描基線并使之平滑。
2、將減光片插入試樣光路的濾光片槽內(nèi)，其讀數(shù)即為減光片的衰減值K，然后將減光片插入?yún)⒈裙饴返臑V光片座內(nèi)，
3、將石英吸收池中的蒸餾水依次換成上述截止濾光液，插入試樣試樣池座中，在相應(yīng)的波段內(nèi)掃描、打印;在記錄紙的作標(biāo)上量取測(cè)定波長(zhǎng)處的透光度，乘以衰減值K，即得各測(cè)定波長(zhǎng)處的雜散光值。
紫外可見光光度計(jì)儀器設(shè)計(jì)的理論依據(jù)是比耳定律。研究的是物質(zhì)對(duì)光的吸收。比耳定律的真正物理意義可以描述為：當(dāng)一束平行的單色光通過某一均勻的有色溶液時(shí)，溶液的吸光度與溶液的濃度和光程的乘積成正比。它是吸收光度分析中定量分析的最基礎(chǔ)、最根本的依據(jù)，更是紫外可見光光度計(jì)的基礎(chǔ)的原理。
紫外可見分光光度計(jì)可達(dá)到檢測(cè)質(zhì)量與成分的目的。在對(duì)不同的儀器進(jìn)行分析時(shí)，紫外可見光光度計(jì)是常規(guī)的分析儀器之一，原理就是紫外可見光度法。
紫外可見光光度計(jì)有很多的特點(diǎn)：
如第一，由于選擇性好而且靈敏度較高，維護(hù)管理很方便，所以在使用中更為常見；
第二，它的結(jié)構(gòu)較為簡(jiǎn)單，可以很方便地進(jìn)行操作而且在成本上又不是非常貴。
以光路設(shè)計(jì)為基礎(chǔ)，對(duì)紫外可見分光光度計(jì)進(jìn)行分類，可以依據(jù)光路設(shè)計(jì)分為三種類型：?jiǎn)喂馐止夤舛扔?jì)、雙光束分光光度計(jì)以及雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)。
鑒于此，本文主要分析紫外可見分光光度計(jì)主要技術(shù)指標(biāo)及其檢定方法。
1.紫外可見分光光度法工作原理以及相關(guān)應(yīng)用
紫外可見分光光度法的工作原理就是利用不同物質(zhì)的分子在紫外可見光譜區(qū)上的輻射吸收的不同，利用分子的這一特性來進(jìn)行有效地區(qū)分辨別。
紫外可見分光光度法在物質(zhì)的定性定量分析以及物質(zhì)純度分析物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析等多種方面都有著廣泛的應(yīng)用，起著不可或缺的作用。
例如：此種檢測(cè)方法在食品行業(yè)中的運(yùn)用，可以對(duì)食品的質(zhì)量進(jìn)行有效地安全監(jiān)測(cè)。而對(duì)于生活質(zhì)量方面來說，食品衛(wèi)生及質(zhì)量是較為重要的一點(diǎn)，只有確保食品不會(huì)出現(xiàn)安全問題，才能夠有效地促進(jìn)國(guó)民健康生活。
現(xiàn)階段，我國(guó)出現(xiàn)的食品安全問題有以下幾種：食品造假；在食品添加對(duì)人體有害的添加劑；一些非法添加物的濫用；除了這些主要問題之外還存在食品殘留農(nóng)（獸）藥、微生物或者重金屬等有害物質(zhì)的情況，以上情況都會(huì)造成食品出現(xiàn)質(zhì)量安全問題，因此必須對(duì)食品進(jìn)行安全分析、檢測(cè)，確保食品不會(huì)出現(xiàn)質(zhì)量安全問題。
2.紫外可見分光光度計(jì)主要技術(shù)指標(biāo)
波長(zhǎng)準(zhǔn)確度及其檢定方法
波長(zhǎng)的實(shí)際測(cè)定值和理論值相減，就是紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度。它在測(cè)試不同的儀器時(shí)，作用非常大，是非常關(guān)鍵的技術(shù)指標(biāo)。
在我國(guó)，計(jì)量檢定工作，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是很重要的。檢定紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度有很多的方式，下面將通過兩種方法進(jìn)行壽命說明：汞燈和氖燈的利用。
汞燈
我國(guó)在對(duì)紫外分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度進(jìn)行檢定時(shí)，很多的生產(chǎn)廠一般都廣泛利用汞燈進(jìn)行測(cè)試。具體的操作流程就是：
將原光源拆下來，采用標(biāo)準(zhǔn)燈，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)光源燈各條的特征譜線進(jìn)行測(cè)試，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度就是測(cè)量值和理論值做差。
自利用汞燈進(jìn)行測(cè)試的過程中，能量測(cè)量作為測(cè)量的方式，波段的范圍設(shè)置在245-560nm范圍之內(nèi)，空氣作為樣品的參考系，光譜帶的寬設(shè)置為2nm，再通過波長(zhǎng)掃描。波長(zhǎng)準(zhǔn)確度就是汞燈的各特征波長(zhǎng)的測(cè)量值和其相應(yīng)的理論值之差。為了確保準(zhǔn)確度，可以重復(fù)進(jìn)行3次，波長(zhǎng)準(zhǔn)確度就選擇3次的平均值。
氖燈
在對(duì)紫外可見分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，通常人們?cè)谶x用標(biāo)準(zhǔn)燈時(shí)用氖燈。在儀器紫外區(qū)，由于氖燈的連續(xù)光譜優(yōu)勢(shì)，就會(huì)在紫外區(qū)作為光源。
在可見區(qū)，由于光譜中波長(zhǎng)為656.1nm和為486.0nm是很容易分離的，而且具有高的強(qiáng)度，譜線特征非常明顯，所以對(duì)儀器波長(zhǎng)準(zhǔn)確度進(jìn)行檢定時(shí)可以利用譜線。在我國(guó)，對(duì)于儀器進(jìn)行計(jì)量檢定都會(huì)用波長(zhǎng)準(zhǔn)確度較為高的標(biāo)準(zhǔn)燈-氖燈。
波長(zhǎng)重復(fù)性及其檢定方法
多次測(cè)試波長(zhǎng)之后數(shù)據(jù)符合程度，也就是多次測(cè)試波長(zhǎng)的數(shù)據(jù)離散性就是波長(zhǎng)的重復(fù)性(WavelengthRepeatability)。檢定波長(zhǎng)的重復(fù)性方法，操作簡(jiǎn)單。第一種方法，測(cè)試波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度之后，測(cè)試三次取平均值，波長(zhǎng)重復(fù)性就是通過和3次測(cè)試中最小值或者最大值做的差；第二種，測(cè)試波長(zhǎng)的準(zhǔn)確度，要經(jīng)過3次測(cè)試，波長(zhǎng)重復(fù)性就是最大值與最小值之差。
光度準(zhǔn)確度及其檢定方法
光度的實(shí)際測(cè)定值和理論值之差就是光度準(zhǔn)確度(PhotoMtricAccuracy)。它倆之間的差越小，測(cè)量就會(huì)更準(zhǔn)確，光度的準(zhǔn)確度就會(huì)更高。一般，表示紫外可見分光光度計(jì)光度的準(zhǔn)確度有以下兩種方式：
①透射比誤差或者透射比準(zhǔn)確度（TransmittanceAccuracy)，表示用TA(或AT);②吸光度誤差（AbsorbanceError)或者是吸光度準(zhǔn)確度(Absorbd-nceAccuracy)，在表示用AA(或AA)時(shí)，要注意測(cè)量時(shí)具體的吸光度情況。
3.紫外可見分光光度法的合理化運(yùn)用
溶液中物質(zhì)含量的測(cè)定
應(yīng)用紫外可見分光光度計(jì)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液和未知液的吸光度進(jìn)而進(jìn)行比較；也可先測(cè)出不同濃度標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，在一定濃度范圍內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)曲線為直線，然后測(cè)定出未知液吸光度，即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查到其對(duì)應(yīng)濃度。
化合物的鑒定
用不同波長(zhǎng)的單色光分別通過某一濃度溶液，測(cè)定每一種單色光的吸光度，之后分別以波長(zhǎng)和分光度作為橫坐標(biāo)和縱坐標(biāo)，繪制得到吸收光譜曲線。
不同食品有其特定的吸收光譜曲線，借此可以鑒定食品種類。紫外吸收光譜分析主要用于已知物質(zhì)定量分析，測(cè)定化合物中含有微量的具有紫外吸收的雜質(zhì)。
反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研宄
借助于分光光度法可得出特定化學(xué)反應(yīng)速度常數(shù)，借此從兩個(gè)或兩個(gè)以上溫度條件下的速度數(shù)據(jù)得出反應(yīng)活化能。
絡(luò)合物組成和穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定金屬離子可與有機(jī)物形成絡(luò)合物且在紫外可見區(qū)有吸收，據(jù)此可利用分光光度法來研宄其組成。
總之，紫外可見分光光度法是利用物質(zhì)分子對(duì)紫外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來進(jìn)行分析的一種儀器分析，這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子和分子軌道上的電子在電子能級(jí)間的躍遷。
朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律，是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎(chǔ)。紫外可見分光光度計(jì)在食品檢驗(yàn)中應(yīng)用廣泛，主要包括定量、定性和結(jié)構(gòu)分析以及反應(yīng)動(dòng)力學(xué)和溶液平衡研宄。
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