一、簡介


在我們平常的工作當(dāng)中，液相色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要，液相色譜柱使用是否得當(dāng)，直接影響液相色譜柱的壽命，稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。


二、液相色譜柱的使用和維護(hù)規(guī)程


在液相色譜操作過程中，我們需要下面的問題，方便維護(hù)液相色譜柱。
Ａ柱子在裝卸、更換時，動作要輕，接頭擰緊要適度。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動，以免柱床產(chǎn)生空隙。


Ｂ.如果儀器用來做常規(guī)分析，樣品種類有限，但分析次數(shù)多，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱，這樣有助于延長柱子的壽命。　


Ｃ.避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動。溫度的突然變化或者使液相色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進(jìn)行，在閥進(jìn)樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。


Ｄ.應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬粗嗳弧?/span>


Ｅ.如使用柱溫控制裝置時，應(yīng)注意在通人流動相后才能升溫。


Ｆ.一般說來液相色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)。否則反沖會迅速降低柱效。


Ｇ.選擇使用適宜的流動相，以避免固定相被破壞。有時可以在進(jìn)樣器前面連接一個預(yù)柱，分析柱是鍵合硅膠時，預(yù)柱為硅膠，可使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。


Ｈ.避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi)，需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個保護(hù)柱。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。


Ｉ.經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗液相色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50-75mL。


Ｊ.保存液相色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間。


Ｋ.液相色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗；另一種可能是大分子進(jìn)人柱內(nèi)，使柱頭被污染;如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。
 

Ｌ.在完成分離分析工作之后，不能馬上就關(guān)機(jī)，需及時對色譜分析系統(tǒng)進(jìn)行沖洗，一般0.5h以上，以除去液相色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。

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通用的C18反向色譜柱。

反相色譜GP-C18描述：

GP-C18以全覆蓋的鍵合硅膠為填料，具有優(yōu)異的穩(wěn)定性。獨特的單官能團(tuán)化學(xué)鍵合技術(shù)可避免形成復(fù)合的C18分子層。均勻的涂層確保了固定相具有高選擇性和率的分離特點。

反相色譜GP-C18特點：

柱穩(wěn)定性

     GP-C18以全覆蓋的硅膠為填料，因此具有優(yōu)異的穩(wěn)定性。下圖顯示了苯胺、苯甲醚和甲苯在運行13,000倍柱體積流動相（85%甲醇:水=85:15, v/v）后保留時間依然高度重現(xiàn)。Sepax GP-C18的這種穩(wěn)定性使其非常適合于各種分析物的確認(rèn)。

    GP-C18固定相所采用的單層官能團(tuán)化學(xué)鍵合技術(shù)可避免形成復(fù)合的C18分子層。具備這種均勻涂層的固定相具有高選擇性和率的分離特點。圖2是在4.6mm I.D.×250mm Sepax GP-C18柱上進(jìn)行測試得到的色譜圖。

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