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通用型反相色譜柱樣品的前處理 色譜柱解決方案

時間:2020-06-03    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

    通用型反相色譜柱在使用前,可以進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為今后評價柱性能變化的參考。但要留意:液相色譜柱柱性能可能由于所使用的樣品、活動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是較佳條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。

    通用型反相色譜柱樣品的前處理:

    a、可以使用活動相溶解樣品。

    b、使用予處理柱除往樣品中的強極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質。

    c、使用0.45μm的過濾膜過濾除往微粒雜質。

    通用型反相色譜柱的保養(yǎng):

    通用型反相色譜柱在使用前,可以進行柱的性能測試,并將結果保存起來,作為評價柱性能變化的參考。

    但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是較佳條件),只有這樣,測得的結果才有可比性。在對色譜柱使用前進行測試以后,要根據(jù)不同的情況對色譜柱進行保養(yǎng):

    ①通用型反相色譜柱每天實驗后的保養(yǎng):使用緩沖液或含鹽的流動相,實驗完成后應用10%的甲醇/水沖洗30分鐘,洗掉色譜柱中的鹽,再用甲醇沖洗30分鐘。

    注意:不能用純水沖洗柱子,應該在水中加入10%的甲醇,防止將填料沖塌陷。

    ②長期保存色譜柱:如色譜柱要長時間保存,必須存于合適的溶劑下。對于反相柱可以儲存于純甲醇或乙腈中,正相柱可以儲存于嚴格脫水后的純正己烷中,離子交換柱可以儲存于水(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中,并將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度可以是室溫。

影響色譜柱使用壽命五個因素

  通常影響色譜柱使用壽命的主要因素有以下幾點。

 ?、偕V柱破損

  石英毛細管柱的聚酰亞胺層,如有少許破損就很難再保護脆弱的石英毛細管。當柱箱連續(xù)地加熱和冷卻、柱箱風扇的震動和柱架等都會對毛細管造成應力,最終在色譜柱有弱點處破裂。大內徑柱更容易破裂,也就是說,在操作0.45~0.53mm內徑柱時,要比0.18~0.32mm內徑柱更要小心。

  如果已經(jīng)斷裂的色譜柱,仍在高溫下連續(xù)運行或是作多階溫度程序運行,很可能損壞色譜柱,因破裂的后半段暴露在高溫的氧氣中,這樣會很快地破壞固定相;而斷裂的前半段,由于有載氣流過,氧的影響會小些。如斷裂的色譜柱沒有再加熱或只暴露在高溫或空氣中很短時間,斷裂的后半部分不會受到明顯損壞,可考慮作為它用。

  ②熱損傷

  超過色譜柱溫度上限,會造成色譜柱固定相和管表面加速損壞,色譜柱的過量流失會使活性組分拖尾,降低柱效。一般熱損壞是一個很慢的過程,但有氧存在時,會大大加速熱損壞。另外在有漏氣情況下,色譜柱過熱也會加速損壞或永久性損壞色譜柱。

  ③氧損傷

  氧是毛細管柱的大敵,在接近室溫下,不會對色譜柱有太大損害,柱溫升高時會嚴重損壞色譜柱。對于極性固定相,即使溫度和氧濃度很低時,也會發(fā)生嚴重損壞。雖然,短時間地暴露在空氣中,如注射空氣或更換隔墊不會有太大問題,但也應避免。

  在氣路上有漏氣的地方(如氣路、接頭和進樣器),往往是進入氧氣的源頭,當色譜柱加熱時,就會很快地損壞固定相,會過早地引起固定液的過度流失,至使活性化合物有拖尾,降低柱效。在不太嚴重的情況下,色譜柱還會有一定的分離功能,但柱效已經(jīng)下降。在嚴重的情況下,色譜柱就會完全失效。

 ?、芑瘜W損傷

  有少數(shù)化合物會使固定相遭到破壞。不揮發(fā)性化合物,進入色譜柱常常會降低色譜柱的性能,但是不會破壞固定相,有條件時這些沉積的殘留物可以用溶劑沖洗而除去,能恢復色譜柱的性能。

  要避免進入色譜柱的主要化合物是無機和礦物堿和酸,這些礦物堿和酸不會揮發(fā),通常積累在色譜柱的前端,如果使其停留在那里就會破壞固定相,使色譜柱過早的大量流失,使活性化合物拖尾,以及使柱效下降,其征兆和熱損壞及氧損壞類似。

  由于化學損壞多發(fā)生在色譜柱的前端,所以可把色譜柱的前端切掉0.5~1m,在比較嚴重的情況下,可以截去5m或更長的一段。如果使用保護柱就會減小色譜柱被損害的長度,但是需要經(jīng)常處理或更換保護柱。酸或堿還常常會破壞石英管內的去活表面,因而會引起活性化合物的峰形變壞。

  ⑤污染

  氣相色譜中,毛細管色譜柱被污染是很普遍的問題,不幸的是,它和各種各樣常見的故障相似,常常被錯誤的判斷為其它的故障,雖然被污染了的色譜柱并沒有損壞,但已失去效能。通常有兩種基本類型的污染物,不揮發(fā)性污染物和半揮發(fā)性污染物。不揮發(fā)性污染殘留物不能從色譜柱里洗脫出來,而是累計在色譜柱里,這樣它就成為涂漬了殘留物的色譜柱,因而影響溶質的分配。而且殘留物還會和活性化合物相互作用,甚至造成峰的拖尾,減少峰面積。

  活性溶質是指那些含有羥基或氨基(一些硫醇基)及醛的物質;半揮發(fā)性污染物最后會洗脫出去,但需要幾個小時或幾天時間,半揮發(fā)性污染物和不揮發(fā)性殘留物一樣,他們也會引起峰形變壞和峰面積減小。此外,還常常引起基線不穩(wěn)定(漂移、噪音增加)或出鬼峰等。

  污染物的來源有許多,其中進樣是最主要的來源。生物液體和組織、土壤、廢水、地下水和類似的含有大量半揮發(fā)的和不揮發(fā)物質的基體,甚至使用凈化方法,樣品也會含有少許這些物質并帶到注射樣品中,幾次到幾百次進樣就會造成殘留物的積累故障。柱上進樣、不分流進樣和大口徑柱直接進樣等進樣方法常常會造成上述色譜柱的嚴重污染。

  污染物還會來源于氣體管路、凈化器、密封墊、隔墊的碎屑或其他與樣品可能接觸的物質,如樣品瓶、溶劑、注射器、移液管等,這些類型的污染物可能會突然性的引起故障。

標簽: 色譜柱
色譜柱 影響色譜柱使用壽命五個因素_色譜柱

色譜柱常見問題與解決辦法

  色譜柱在使用中常見的問題就是柱壓升高,如果柱壓是在長時間使用過程中緩慢增加,屬于正?,F(xiàn)象。但柱壓在使用過程中突然升高(系統(tǒng)管路堵塞及壓力傳感器故障除外),以下列舉部分色譜柱常見問題與解決辦法:

  1、色譜柱頭的過濾篩板堵塞或污染解決方法:如確定是色譜柱頭的過濾篩板被污染,可以將色譜柱反方向用甲醇沖洗至正常壓力,或者卸下色譜柱頭,將其放在10%的稀硝酸內超聲清洗10分鐘,后再用純水超聲10分鐘,重新裝入色譜柱。

  2、色譜柱頭的填料被樣品污染解決方法:如確定色譜柱頭的填料被污染,將柱頭螺絲卸下,挖出柱內前段被污染的填料,用相同的柱填料重新填入,仔細修復后,重新安裝上柱頭螺絲。

  3、色譜柱內緩沖液中的鹽遇到高濃度的甲醇或其他有機溶劑,形成結晶析出解決方法:如確定定是鹽結晶,用10%的甲醇/水沖洗色譜柱使柱內鹽全部溶解,再換高濃度甲醇。

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色譜柱 色譜柱常見問題與解決辦法_色譜柱

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