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液相色譜進樣前分析的幾個問題 液相色譜解決方案

時間:2020-06-03    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

液相色譜進樣是很精確的一個過程,關系分離的效果,所以一定要小心進樣,以下是為你分析的進樣實驗總結: ?應當注意以下幾個問題: ?(1)樣品在流動相中可以是可溶的,如果可能的話,應當用流動相溶解樣品,它可使色譜圖中低k’段的虛假峰盡可能減少。 ?(2)選擇合適的進樣閥或注射器。一般說來只要選擇適當,都能獲得很好的重復性。在選擇進樣閥時,要考慮它應有較好的清洗條件,并能減少而不是加劇近樣過程中通過柱和檢測器的紊亂狀態(tài)。無論使用進樣閻還是注射器,部應當盡可能地減小結構和死體積。 ?(3)為了位監(jiān)控嚴密,應當盡可能地選用一種內標,尤其是在遇到復雜樣品時,更應如此。

  液相色譜柱是液相色譜的核心部件,它主要起到了分離作用。色譜柱同樣也是一個消耗品,在流動相沖刷的過程和樣品在分析的過程,填料損失和污染使得色譜柱的性能慢慢下降。所以,對于液相色譜尤其是常用的C18柱,需要在一定時間內對其性能做一個評估,同樣,新的色譜柱也要對色譜柱做一個有效的體檢。

  液相色譜柱的十大常見故障:

  1、若操作過程發(fā)現(xiàn)壓力很小,則可能管件連接有漏,注意檢查。當出現(xiàn)錯誤警告(各組件指示燈均為紅色),一般為漏液,其中一個感應器中已有溶劑,漏液故障排除后,擦干,點擊On line操作界面中的Instrument/System Off,然后再點擊操作界面中的Instrument/System On即可。

  2、連接柱子與管線時,應注意擰緊螺絲的力度,過度用力可導致連接螺絲斷裂。柱接頭處易發(fā)生漏液,可能情況為接頭Fittings中間的管子未和接口處貼緊。不同廠家的管線及色譜柱頭結構有差異,不要混用,必要時可使用PEEK管及活動接頭;

  3、操作過程若發(fā)現(xiàn)壓力非常高,則可能管路已堵,應先卸下色譜柱,然后用分段排除法檢查,確定何處堵塞后解決。若是保護柱或色譜柱堵塞,可用小流量流動相或以小流量異丙醇沖洗,還可采用小流量反沖的辦法(新柱不提倡),若還是無法通暢,則需換柱;

  4、運行過程中自動停泵,可能為壓力超過上限或流動相用完;

  5、樣品瓶中樣品較少,自動進樣器進樣針無法到達液面,可采用調低進樣針進樣高度的辦法,注意設置時不要使進樣針碰到瓶底,微量樣品分析應使用微量樣品瓶;

  6、自動進樣器進樣針未與樣品瓶瓶口對準時,需重新定位。

  7、泵壓不穩(wěn)或流量不準,可能為柱塞桿密封圈問題或seal wash墊圈問題,需更換;

  8、基線產生不規(guī)則噪聲,可能原因為系統(tǒng)不穩(wěn)定或沒達到化學平衡(使其平衡,若用離子對試劑,在使用使需要足夠的時間和溶劑體積,色譜柱才能達到足夠的平衡),流動相被污染(更換流動相,清洗儲液器、過濾器,沖洗并重新平衡系統(tǒng)),色譜柱被污染(為證明可能的原因更換系統(tǒng)的色譜柱或使用一根同類的被證明性能好的色譜柱),檢測器不穩(wěn)定;

  9、短期有規(guī)則的噪聲,可能原因為泵壓不穩(wěn)或泵脈沖,調節(jié)溶劑不適當(如兩種溶劑的互溶性問題),泵入口管路松或堵塞,泵太臟,泵柱塞磨損,檢測器不穩(wěn)定;

  10、長期有規(guī)則噪聲,可能原因為室溫不穩(wěn)(未使用柱溫箱)或使用柱溫箱不當;

液相色譜儀的應用

    液相色譜儀是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對混合物進行先分離,而后分析鑒定的儀器。

 

    基本介紹

    液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、信號記錄系統(tǒng)等部分組成。與經典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點。

    液相色譜儀使用范圍

    應用于生物醫(yī)學、環(huán)境化學、石油化工等部門。

    應用范疇

    高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質。

    與試樣預處理技術相配合,HPLC所達到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時測定性質上十分相近的物質成為可能,能夠分離復雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問題比較有前途的方法。

    由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復利用,流出組分易收集等優(yōu)點,因而被廣泛應用到生物化學、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機分析等各種領域。

    高效液相色譜儀與結構儀器的聯(lián)用是一個重要的發(fā)展方向。液相色譜-質譜連用技術受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展很快如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。

標簽: 液相色譜儀
液相色譜儀標簽: 液相色譜儀的應用_液相色譜儀組合標題:

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