色譜柱的柱效能是評價色譜性能的一項重要指標，混合物能否在色譜柱中得到分離，除取決于選擇合適的固定相外，還與色譜操作條件及色譜柱的裝填狀況等因素有關(guān)。在一定的色譜操作條件下，色譜柱的柱效可用理論塔板數(shù)或理論塔板高度來衡量。要提高液相色譜的效率可從以下幾方面入手。
（1）降低移動相的流速,但會使分析時間延長。
（2）減少固定相的量,但色譜柱中樣品的負載量也隨之減小。
（3）減小固定相的顆粒度,但不能過分,過分后色譜柱的滲透率也會減小。
（4）選用低粘度的移動相,以利于快速傳質(zhì),但卻不利于多組份分析。
（5）適當提高柱溫,可降低移動相的粘度,但柱效和分離度也隨之降低。
（6）盡量減小停滯移動相的體積,但卻加快了移動相的流速。
從以上介紹可看出,在色譜分析過程中,各種因素是互相聯(lián)系和制約的。只有通過對柱效值的跟蹤測算,對自己分析方法不斷的研究和實踐,才能找到較佳的工作條件。
高效液相色譜儀的原理：
造成液相色譜儀流動相供給不暢的原因可能是：流動相已經(jīng)接近用完了，管路中吸入氣體引起泵壓力不穩(wěn)定。 應(yīng)經(jīng)常觀察貯液器中流動相的量，加足流動相保證所有樣品分析完畢。輸液管路上安裝沉子至瓶底，貯液器蓋上留一小孔正好夾住進液器，使其不能上下移動。 過濾器阻塞會引起管道和泵腔真空變化，使壓力不穩(wěn)。當過濾器被微粒所阻塞或長霉時，去掉過濾器后系統(tǒng)會運轉(zhuǎn)正常，換上新的過濾器即可，有時候換上新過濾器任然不暢，那么就需要檢查流動相的制備過程，或者換上大孔徑的過濾器。不管如何，流動相都要重新過濾。 流速過高、阻力大，造成真空化現(xiàn)象，這是由于過濾器孔徑、管道內(nèi)徑、流速和溶劑粘度等引起的。如果流速大于10mL/min，常會出現(xiàn)這種現(xiàn)象，試著用下列方法解決。 1、試用低流速，若問題解決了則再進行下一步； 2、換大孔徑的過濾器； 3、增加進液管內(nèi)徑； 4、抬高或加壓貯液器； 5、改低流速； 6、不用入口過濾器（但流動相一定要先過濾）。 當貯液器蓋子太緊，在貯液器內(nèi)形成真空，打出的流動相不連續(xù)。應(yīng)松開蓋子或留有1mm縫隙。 進液管路阻塞或彎曲折疊會使泵抽不到液，注意調(diào)整進液路道或更新。
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