熒光分光光度計與紫外分光光度計屬一類產(chǎn)品，結(jié)構(gòu)均由激發(fā)光源、單色器、樣品室、光電倍 增管和讀出（記錄）裝置所組成。
但是它們光源是不同的，熒光分光光度計多采用高壓汞燈、氙燈和?激光光源。
同時，熒光測量多采用激發(fā)光和發(fā)射光成直角的光路，儀器組件的布置有所不同。
(1)激發(fā)光源：要比吸收法中光源強度大。
汞燈：發(fā)射強度大、穩(wěn)定，不需復(fù)雜電源，但譜線不連續(xù)，數(shù)目少，主要用于濾片熒光計。
碘鎢燈：提供連續(xù)光譜300~700mn。
氙燈：發(fā)出射線的強度大，譜線連續(xù)，分布于200~700 nm光域內(nèi)；
且在300~400nm 波段內(nèi)射線強度幾乎相等，但該燈的電源功率要求大，且電源穩(wěn)定，因此電源結(jié)構(gòu)復(fù)雜。
激光：發(fā)光強度大，能極大地提高熒光分析的靈敏度。
(2)樣品池：
通常由石英池（液體樣品用）或固體樣品架（粉末或片狀樣品）組成。
測量液體時，光源與檢測器成直角安排；
測量固體時，光源與檢測器成銳角安排。
低溫?zé)晒鉁y定時在一樣品池外套一個液氮的透明石英真空瓶。
(3)單色器：
熒光分光計通常具有兩個濾光片：第一濾光片在光源與樣品池之間，濾去不需要的光，讓需要的激發(fā)光通過。
第二濾光片在樣品池與檢測器之間，濾去溶劑散射 光、容器表面散射光、雜質(zhì)發(fā)出的光等，讓待測物質(zhì)發(fā)射的熒光通過。
熒光分光光度計通常具有兩個光柵，位置同濾光片，單色性好。
(4)檢測器：
因熒光通常較弱，采用光電倍增管作檢測器，靈敏度高。
選擇光電倍增管要考慮：響應(yīng)波長、靈敏度和嗓聲水平。
藍(lán)敏管對蛋白質(zhì)、核酸的測量適用，而紅敏管則適用于熒光染料檢測。
(5)顯示系統(tǒng)：光度表、計算機操作系統(tǒng)等。
微量分光光度計能夠快速準(zhǔn)確的定量檢測核酸、蛋白質(zhì)等溶液。具有使用方便、消耗樣品少(僅2μl)、不用預(yù)熱、能迅速清理殘留樣品、不需要比色皿或其它樣品定位裝置、樣品不需要稀釋等特點，常用于核酸，蛋白定量以及細(xì)菌生長濃度的定量，目前已成為眾多實驗室的常規(guī)儀器。
工作原理
超微量分光光度計進(jìn)行濃度測定的原理是根據(jù)朗伯-比爾（Lamber-Beer）定律，A＝K·C·L 式中，A為吸光度；K為吸（消）光系數(shù)；C為溶液的濃度；L為液層厚度。此公式說明：在入射光一定時，溶液的吸光度與溶液的濃度及液層厚度成正比。此式就是光的吸收定律的數(shù)學(xué)表達(dá)式，又叫朗伯-比爾定律。
核酸定量
核酸的定量是超微量分光光度計使用頻率最大的功能?？梢远繙y定溶于緩沖液的寡核苷酸，單鏈、雙鏈DNA以及RNA含量。這是由于核酸、核苷酸及其衍生物都具有共軛雙鍵，具有紫外吸收的特性，最大的吸收波長在260nm，吸收波谷在230nm。
除了核酸濃度，分光光度計同時顯示幾個非常重要的比值表示樣品的純度，如A260/A280的比值，用于評估樣品的純度，因為蛋白的吸收峰是280nm。純凈的樣品，比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白質(zhì)或者酚類物質(zhì)的影響。A230表示樣品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等，較純凈的核酸A260/A230的比值大于2.0。
蛋白質(zhì)直接定量
這種方法是在280nm波長，直接測試蛋白。蛋白質(zhì)直接定量方法，適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質(zhì)。紫外直接定量法相對于比色法來說，速度快，操作簡單；但是容易受到平行物質(zhì)的干擾，如DNA的干擾；另外敏感度低，要求蛋白的濃度較高。
比色法蛋白質(zhì)定量
蛋白質(zhì)通常是多種蛋白質(zhì)的化合物，比色法測定的基礎(chǔ)是蛋白質(zhì)構(gòu)成成分：氨基酸（如酪氨酸，絲氨酸）與外加的顯色基團(tuán)或者染料反應(yīng)，產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物質(zhì)的濃度與蛋白質(zhì)反應(yīng)的氨基酸數(shù)目直接相關(guān)，從而反應(yīng)蛋白質(zhì)濃度。
比色方法一般有BCA，Bradford，Lowry 等幾種方法。
與傳統(tǒng)分光光度計相比，超微量分光光度計要求的樣品體積小，不需要比色皿，比色杯清洗方便，只需用干凈的吸水紙將樣品從檢測平臺上擦拭干凈即可。除此之外，實驗過程也更為簡單，不需預(yù)熱，可隨時檢測，檢測結(jié)果顯示吸光度值的同時，程序直接給出濃度值。超微量分光光度計與傳統(tǒng)相比，體積更小，更方便使用。
3.紅外分光光度計基本原理及用途
紅外分光光度計由光源發(fā)出的光，被分為能量均等對稱的兩束，一束為樣品光通過樣品，另一束為參考光作為基準(zhǔn)。這兩束光通過樣品室進(jìn)入光度計后，被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制，形成交變信號。
紅外分光光度計基本原理：
分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后，發(fā)生了電子能級躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團(tuán)的信息?？梢杂脴?biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。
根據(jù)Lambert-Beer定律：
A=εbc，（A為吸光度，ε為摩爾吸光系數(shù)，為液池厚度，c為溶液濃度）可以對溶液進(jìn)行定量分析。
由光源發(fā)出的光，被分為能量均等對稱的兩束，一束為樣品光通過樣品，另一束為參考光作為基準(zhǔn)。這兩束光通過樣品室進(jìn)入光度計后，被扇形鏡以一定的頻率所調(diào)制，形成交變信號，然后兩束光和為一束，并交替通過入射狹縫進(jìn)入單色器中，經(jīng)離軸拋物鏡將光束平行地投射在光柵上，色散并通過出射狹縫之后，被濾光片濾除高級次光譜，再經(jīng)橢球鏡聚焦在探測器的接收面上。探測器將上述交變的信號轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的電信號，經(jīng)放大器進(jìn)行電壓放大后，轉(zhuǎn)入A/D轉(zhuǎn)換單位，計算機處理后得到從高波數(shù)到低波數(shù)的紅外吸收光譜圖。
特點和主要用途：
一般的紅外光譜是指2.5-50微米（對應(yīng)波數(shù)4000--200厘米-1）之間的中紅外光譜，這是研究研究有機化合物常用的光譜區(qū)域。紅外光譜法的特點是：快速、樣品量少（幾微克-幾毫克），特征性強（各種物質(zhì)有其特定的紅外光譜圖）、能分析各種狀態(tài)（氣、液、固）的試樣以及不破壞樣品。紅外光譜儀是化學(xué)、物理、地質(zhì)、生物、醫(yī)學(xué)、紡織、環(huán)保及材料科學(xué)等的重要研究工具和測試手段，而遠(yuǎn)紅光譜更是研究金屬配位化合物的重要手段。
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