氣相色譜分析的分離原理：
如果把色譜柱比作一個分餾塔，那么色譜柱就是由許多的塔板構(gòu)成。一部分空間被涂在擔(dān)體上的液相占據(jù)，另一部分空間充滿著載氣（氣相），基于不同物質(zhì)在兩相間具有不同的分配系數(shù)，當(dāng)兩相作相對運(yùn)動時，試樣中的各組分就在兩相中進(jìn)行反復(fù)多次的分配，使得原來分配系數(shù)只有微小差異的各組分產(chǎn)生很大的分離效果，從而各組分彼此分離開來。
結(jié)果分析
1.出現(xiàn)拖尾峰
分析原因：
有可能汽化室的溫度低；汽化室污染；進(jìn)樣操作不當(dāng)；色譜柱不合適；柱子溫度低。
2.色譜峰出現(xiàn)前沿現(xiàn)象
分析原因：
有可能是進(jìn)樣量過多色譜柱超載；
試樣在系統(tǒng)內(nèi)部凝聚。
3.出現(xiàn)峰尾偏向負(fù)測
分析原因：
可能是檢測器污染。
4.升溫時基線也會上升
分析原因：
載氣流量沒有調(diào)整好；色譜柱污染；
5.升溫時基線發(fā)生不規(guī)則變動
分析原因：
柱子未老化好；載氣流量未調(diào)整好；色譜柱污染。
6.基線不能回零，峰呈平頂狀
分析原因：
有可能是裝置接地不良。
7.本底噪聲大
分析原因：
有可能是色譜柱污染；也有可能是載氣污染；汽化室污染；色譜柱和檢測器的連接導(dǎo)管污染；檢測器污染；空氣或者氫氣污染。
小結(jié)
無論是酒樣上機(jī)過程，還是結(jié)果分析過程，都需要注意細(xì)節(jié)，馬虎不得，不然，可是會鑄成大錯的哦！
2.氣相色譜分析的常規(guī)步驟
在實(shí)際工作中，當(dāng)我們拿到一個樣品，我們該怎樣如何定性和定量，建立一套完整的分析方法是關(guān)鍵，下面介紹一些常規(guī)的步驟：
1、樣品的來源和預(yù)處理方法
GC能直接分析的樣品必須是氣體或液體，固體樣品在分析前應(yīng)當(dāng)溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，而且還要保證樣品中不含GC不能分析的組分（如無機(jī)鹽），可能會損壞色譜柱的組分。這樣，我們在接到一個未知樣品時，就必須了解的來源，從而估計樣品可能含有的組分，以及樣品的沸點(diǎn)范圍。如能確認(rèn)樣品可直接分析。如果樣品中有不能用GC直接分析的組分，或樣品濃度太低，就必須進(jìn)行必要的預(yù)處理，包括采用一些預(yù)分離手段，如各種萃取技術(shù)、濃縮和稀釋方法、提純方法等。
2、確定儀器配置
所謂儀器配置就是用于分析樣品的方法采用什么進(jìn)樣裝置、什么載氣、什么色譜柱以及什么檢測器。
3、確定初始操作條件
當(dāng)樣品準(zhǔn)備好，且儀器配置確定之后，就可開始進(jìn)行嘗試性分離。這時要確定初始分離條件，主要包括進(jìn)樣量、進(jìn)樣口溫度、檢測器溫度、色譜柱溫度和載氣流速。進(jìn)樣量要根據(jù)樣品濃度、色譜柱容量和檢測器靈敏度來確定。樣品濃度不超過mg/mL時填充柱的進(jìn)樣量通常為1-5uL，而對于毛細(xì)管柱，若分流比為50：1時，進(jìn)樣量一般不超過2uL。進(jìn)樣口溫度主要由樣品的沸點(diǎn)范圍決定,還要考慮色譜柱的使用溫度。原則上講，進(jìn)樣口溫度高一些有利，一般要接近樣品中沸點(diǎn)的組分的沸點(diǎn)，但要低于易分解溫度。
4、分離條件優(yōu)化
分離條件優(yōu)化目的就是要在最短的分析時間內(nèi)達(dá)到符合要求的分離結(jié)果。在改變柱溫和載氣流速也達(dá)不到基線分離的目的時，就應(yīng)更換更長的色譜柱，甚至更換不同固定相的色譜柱，因?yàn)樵贕C中，色譜柱是分離成敗的關(guān)鍵。
5、定性鑒定
所謂定性鑒定就是確定色譜峰的歸屬。對于簡單的樣品，可通過標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對照來定性。就是在相同的色譜條件下，分別注射標(biāo)準(zhǔn)樣品和實(shí)際樣品，根據(jù)保留值即可確定色譜圖上哪個峰是要分析的組分。定性時必須注意，在同一色譜柱上，不同化合物可能有相同的保留值，所以，對未知樣品的定性僅僅用一個保留數(shù)據(jù)是不夠的，雙柱或多柱保留指數(shù)定性是GC中較為可靠的方法，因?yàn)椴煌幕衔镌诓煌纳V柱上具有相同保留值的幾率要小得多。
6、定量分析
要確定用什么定量方法來測定待測組分的含量。常用的色譜定量方法不外乎峰面積（峰高）百分比法、歸一化法、內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法和標(biāo)準(zhǔn)加入法（又叫疊加法）。峰面積（峰高）百分比法比較簡單，但最不準(zhǔn)確。只有樣品由同系物組成、或者只是為了粗略地定量時該法才是可選擇的。相比而言，內(nèi)標(biāo)法的定量精度，因?yàn)樗怯孟鄬τ跇?biāo)準(zhǔn)物（叫內(nèi)標(biāo)物）的響應(yīng)值來定量的，而內(nèi)標(biāo)物要分別加到標(biāo)準(zhǔn)樣品和未知樣品中，這樣就可抵消由于操作條件（包括進(jìn)樣量）的波動帶來的誤差。至于標(biāo)準(zhǔn)加入法，是在未知樣品中定量加入待測物的標(biāo)準(zhǔn)品，然后根據(jù)峰面積（或峰高）的增加量來進(jìn)行定量計算。其樣品制備過程與內(nèi)標(biāo)法類似但計算原理則完全是來自外標(biāo)法。標(biāo)準(zhǔn)加入法定量精度應(yīng)該介于內(nèi)標(biāo)法和外標(biāo)法之間。
7、方法的驗(yàn)證
所謂的方法驗(yàn)證，就是要證明所開發(fā)方法的實(shí)用性和可靠性。實(shí)用性一般指所用儀器配置是否全部可作為商品購得，樣品處理方法是否簡單易操作，分析時間是否合理，分析成本是否可被同行接受等。可靠性則包括定量的線性范圍、檢測限、方法回收率、重復(fù)性、重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度等。
3.氣相色譜分析常見峰形異變可能原因分析
在日常色譜定量分析中，出現(xiàn)色譜峰形異變或鬼峰，不但嚴(yán)重影響定量精度，甚至使分析工作無法進(jìn)行。為此，本篇把峰形異變常見類型(15種)加以分析，并給出可能原因，供工作經(jīng)驗(yàn)不足的色譜工作者參考。
在此討論的峰形異變是指在色譜分析方法確定后，與曾經(jīng)記錄的已知色譜圖比較時，出現(xiàn)某些色譜峰形的偏離畸變或多余峰?；蛘哒f，對于一已經(jīng)設(shè)立好的色譜分析方法，由于不要求或出于無奈時有些峰分離不開、拖尾或峰形不對稱等并不影響方法的實(shí)施情況，不屬于上述因儀器故障、經(jīng)驗(yàn)不足或操作失誤造成的峰形異變。否則需要重新審定或修改原來的分析方法。
<色譜峰" src="http://12326877.s21i.faiusr.com/2/ABUIABACGAAgsZXJ0AUo_NGN8gIw9gQ42AM.jpg" style="border:0px; float:none; height:450px; max-width:100%; text-size-adjust:100%; vertical-align:top; width:601px" title="色譜峰" />
另外，還應(yīng)指出：由于無亂安裝使用沒有評價過的色譜柱可能出現(xiàn)的峰形拖尾，分離不好或峰形畸變，也不屬于討論內(nèi)容。顯然叫一個普通色譜分析工作者，在常規(guī)工作條件下去判斷色譜柱的優(yōu)劣，要求似乎高了一些。在懷疑峰形異變尋找可能原因、排除方法之前先做以下工作：
仔細(xì)核查操作條件，與分析方法要求是否一致；
和當(dāng)初分析所存的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖對照，判斷是否真出了問題；
逐項(xiàng)仔細(xì)觀察儀器或設(shè)備工作狀態(tài)，看有無操作失誤而引起的出峰失常。
然后在依據(jù)以下15種異常峰形分析可能原因與排除方法。
1．臺階峰：
(1) TCD熱絲被樣品中所含鹵素、氧、硫等元素腐蝕；
(2) 氣體流量突變?nèi)纾鹤⑸鋲|突然漏氣，氣路受阻等；
(3) 記錄色譜峰裝置故障如：拉線松；
2．負(fù)峰：
(1) TCD用氮做載氣，由于待測組分在N2中濃度不同，熱傳導(dǎo)值呈現(xiàn)非線性而可能 出現(xiàn)負(fù)峰,有時可以通過改變載 氣流量或進(jìn)樣量克服；
(2) 操作ECD時進(jìn)樣量過大而出負(fù)峰，這是由于工作原理由電子捕獲轉(zhuǎn)變?yōu)殡婋x檢測，此時靈敏度還會大大降低；
(3) 操作FID，低電離效率的溶劑(如CS2)或雜質(zhì)出現(xiàn)，使原基流較高的輸出基線減小而顯示為負(fù)峰；
(4) 操作FID，在無極化電壓，樣品量較大可能出現(xiàn)負(fù)峰；
(5) 操縱NPD、FPD時氣流比不合適，溶劑或某些組分會出現(xiàn)負(fù)峰；
3."N" 或 “W”峰：
(1) TCD操作，用N2作載氣由于熱傳導(dǎo)率非線性引起；
(2) FID操作時，樣品溶劑電離效率低(如CS2)，或氣流比欠佳時；
(3) ECD操作時，由于檢測器被污染，溶劑峰或待測組分含量較高，或脈沖電源有毛??；
4．舌頭峰（前延峰）：
(1) 汽化溫度偏低；
(2) 載氣流量小；
(3) 進(jìn)樣量大，汽化時間長；
(4) 汽化室被污染，樣品有吸附效應(yīng)；
(5) 樣品在柱頭有冷凝或色譜柱被污染；
(6) 進(jìn)樣技術(shù)差(揮發(fā)性組分的進(jìn)樣速度太慢)；
(7) 峰前出現(xiàn)了“鬼”峰。
5．拖尾峰：
(1) 色譜柱安裝不合格，樣品不能以“塞子”形進(jìn)入色譜柱，柱與檢測器安裝的死體積太大；
(2) 樣品未能注射入柱頭中(柱頭進(jìn)樣方式)；
(3) 汽化管沒有安裝好或破損，樣品只能脫尾進(jìn)入色譜柱；
(4) 化室的溫度低或偏高；
(5) 載氣流量偏低；
(6) 進(jìn)樣量大；
(7) 載氣系統(tǒng)(如注射墊處)有漏氣；
(8) 進(jìn)樣器(汽化室)，被樣品中高沸點(diǎn)雜質(zhì)或注射墊殘?jiān)廴荆?/span>
(9) 色譜柱被污染至使被分析組分和高沸點(diǎn)污染物作用；
(10) 補(bǔ)充氣未開或偏低；
(11) 色譜柱溫度偏低或失效；
(12) 甲烷化Ni催化劑失效；
(13) 進(jìn)樣技術(shù)差(如速度不合適)；
(14) 正好有干擾峰(鬼峰)出現(xiàn)(如誤用被污染的注射針)；
(15) 無極化電壓(FID)，此時伴隨靈敏度偏低；
(16) 樣品前處理有毛??；
6．出峰后基線下移：
(1) 樣品量大，特別是溶劑改變了工作狀態(tài)；
(2) FID被污染狀況發(fā)生改變，或氣流比發(fā)生變化；
(3) 系統(tǒng)出現(xiàn)漏氣，或出現(xiàn)堵塞；
(4) 色譜柱被污染；
(5) 樣品處理不當(dāng)，如：樣品中有些物質(zhì)和固定相發(fā)生作用；7．程序升溫時基流增加（漂移大），噪聲增加：
(1) 色譜柱需重新老化或失效；
(2) 新?lián)Q載氣純度欠佳；
(3) 過濾器失效；
(4) 樣品前處理不當(dāng)，如：雜質(zhì)干擾物太多；
(5) 靈敏度太高。
(6) 數(shù)據(jù)處理裝置的判峰參數(shù)設(shè)置不合理。
8．圓頂寬峰
(1) 樣品量大起出了色譜柱容量；
(2) 汽化溫度低；
(3) 色譜柱沒按要求安裝；
(4) 檢測器工作狀態(tài)不對，如載氣太小、沒開補(bǔ)充氣；
(5) 數(shù)據(jù)處理裝置的判峰參數(shù)(半峰寬)設(shè)置偏大；
9．平頂峰（未到滿量程）：
(1) 樣品量大，放大器量程高，衰減大，信號輸出飽和；
(2) 檢測器已工作在飽和區(qū)；
(3) 數(shù)據(jù)處理輸入信號極性接錯，或零點(diǎn)失調(diào)；
10．基線出現(xiàn)波浪狀峰：
(1) 高靈敏度操作儀器未穩(wěn)定之前；
(2) 操作TCD、ECD時，柱箱或檢測器箱溫度周期變化；
(3) 環(huán)境溫度對儀器控溫影響；
(4) 電壓不穩(wěn)，對柱溫控制精度影響；
(5) 過溫保護(hù)設(shè)置低于控制溫度；
(6) 壓力(流量)調(diào)節(jié)閥失調(diào)，周期變化；
11．原來能分開的峰分不開：
(1)色譜柱安裝不合要求 ；
(2)色譜柱被污染，需重新活化 ；
(3) 色譜柱壽命已到，需更換；
(4)新更換的氣源，純度不佳；
(5) 濾器失效，重新老化或更換；
(5) 色譜柱溫度和載氣流量需要微調(diào)優(yōu)化(色譜分析一般允許)；
(6) 檢測器工作狀態(tài)變化(如ECD漏氣、FID氣流比欠佳)；
(7) 汽化室被污染，注射墊漏氣；
(8) 樣品處理不當(dāng)，雜質(zhì)干擾物太多；
(9) 樣技術(shù)太差；
(10) 進(jìn)樣量超出了色譜柱容量；
(11) 數(shù)據(jù)處理的判峰參數(shù)，半峰寬或斜率設(shè)置不合理；
(12) 放大器量程或衰減設(shè)置失誤；
12．直角峰
(1) 儀器輸出負(fù)信號超出了數(shù)據(jù)處理的范圍；
(2) 數(shù)據(jù)處理裝置零點(diǎn)未校正，或量程設(shè)置太大無法判斷基線位置；
(3) 數(shù)據(jù)處理裝置輸入信號極性接反，零點(diǎn)設(shè)置不對；
13．帶毛刺峰
(1) 儀器工作不穩(wěn)定，噪聲大于要求；
(2) 數(shù)據(jù)處理裝置的判峰參數(shù)，半峰寬和斜率設(shè)置太??；
(3) 極化電壓(FID)不穩(wěn)；
14．操作條件未變，原來能判別的峰不見了：
(1) 色譜柱被污染或失效；
(2) 氣路系統(tǒng)被污染(如氣源純度低，過濾器失效)；
(3) 注射墊漏氣；
(4) 注射針密封性差；
(5) 數(shù)據(jù)處理的判峰參數(shù)，如：半峰寬和斜率設(shè)置偏大；
(6) 進(jìn)樣方法不對；
15．“鬼峰”（怪峰，多余峰，記憶峰）：
(1) 上一次進(jìn)樣的高沸點(diǎn)雜質(zhì)峰自然流出；
(2) 載氣不純過濾器失效使低沸點(diǎn)的污染物冷凝在色譜柱頭，程序升溫時正常流出；
(3) 注射墊未經(jīng)老化或無隔墊清洗而出的污染峰；
(4) 汽化溫度太高或嚴(yán)重污染至使樣品某些組分分解；
(5) 樣品某些組分與被污染固定相產(chǎn)生了作用；
(6) 色譜柱溫度太高固定相分解；
(7) 使用了被污染的注射針( 本身不合格，手摸或進(jìn)過易污染的樣品)；
(8) 樣品予處理不完善或用錯溶劑；
(9) 樣品中有空氣；
(10) TCD、ECD等密封性差(漏氣)；
(11) 電源不穩(wěn)，對控溫或放大器有不良影響
(12) 色譜柱堵塞物使用不當(dāng)，如玻璃棉未按要求進(jìn)行處理。
<
上一篇：【氣壓表】氣壓表三個常見問題
449717568
