菌落計(jì)數(shù)器有手動(dòng)計(jì)數(shù)與自動(dòng)計(jì)數(shù)二種選擇。其中的手動(dòng)計(jì)數(shù)器因費(fèi)時(shí)又費(fèi)力所以逐漸的被市場(chǎng)淘汰，取而代之的就是全自動(dòng)計(jì)數(shù)器。全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀因其使用的自動(dòng)化程度高、分析結(jié)果可核對(duì)、樣品信息可留存等，已逐漸被越來越多的科研院所、衛(wèi)生疾控部分所喜愛。如何選型，才能獲得性能卓越的菌落計(jì)數(shù)儀，并取得高性價(jià)比呢？這得從該類儀器的原理來解釋?，F(xiàn)今面市的所有全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀均是采用成像分析法實(shí)現(xiàn)自動(dòng)計(jì)數(shù)的，即由成像硬件+分析軟件所組成，這二塊內(nèi)容的任何一塊上出現(xiàn)失分，都會(huì)嚴(yán)重影響計(jì)數(shù)分析結(jié)果的穩(wěn)定性。 成像硬件的選型 成像硬件用于獲得清晰有效的菌落圖像，以便分析計(jì)數(shù)。現(xiàn)今的成像硬件有拍照成像的、掃描成像的。由攝像頭拍照成像的優(yōu)點(diǎn)是：成像速度快，能確保在0.5秒內(nèi)獲得菌落圖像。由單反相機(jī)、卡片機(jī)拍照成像的優(yōu)點(diǎn)是：能自動(dòng)對(duì)焦、且像素分辨率一般更高，但其成像需要3～4秒的時(shí)間。然而，拍照成像的致命弱點(diǎn)是：成像環(huán)境中的光線強(qiáng)度，無論是暗視野，還是背光，想要做到圖像中心與邊緣保持完全一致，是不可能的。從而引起平皿上亮度的不一致，這就嚴(yán)重干擾了菌落目標(biāo)的自動(dòng)識(shí)別。因此，如果要選購拍照成像的，其分析軟件就一定要具有背景矯正功能，以便自動(dòng)改善成像的效果。掃描成像與在燈箱中營造均勻面光源不同，是將線光源通過移動(dòng)變成面光源的，因此光線強(qiáng)度非常均勻，其均勻度通常比拍照燈箱的面光源要高一個(gè)數(shù)量級(jí)，從成像硬件的根本上解決了菌落目標(biāo)的亮度不勻問題，因此計(jì)數(shù)分析非常穩(wěn)定。目前，以300dpi分辨率（3482×2396像素成像）掃描6個(gè)90mm直徑平皿的速度，暗視野成像約12秒、背光成像約20秒，就其成像速度而言，與單反相機(jī)、卡片機(jī)拍照成像的速度相當(dāng)。由于掃描成像的光線均勻度遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于拍照成像，為獲得高質(zhì)量的成像效果，以便實(shí)現(xiàn)“傻瓜式”分析。掃描成像的另一優(yōu)點(diǎn)是：成像分辨率可調(diào)，單平皿成像最高可達(dá)4800dpi（即：25.4／4800＝0.00529mm/像素），是任何拍照成像遠(yuǎn)不及的?？梢灶A(yù)期：掃描成像將很快成為主流選擇。 分析軟件的選型 分析軟件是全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀的另一塊核心成分。因?yàn)榫渖锏拇嬖诙鄻有?，在培養(yǎng)基上的表現(xiàn)或顯像不可能大體一致，針對(duì)這類變化，在分析軟件選型上要考慮：對(duì)于各類成像干擾的自動(dòng)排除能力。比如：是否能自動(dòng)矯正背景，等等。另外，對(duì)于嚴(yán)重粘連在一起的團(tuán)裝、鏈狀分布菌落，將其自動(dòng)分割開來的水平，也是評(píng)價(jià)分析軟件的考量指標(biāo)。尤其是：對(duì)于同類菌落的“一鍵”化的智能分類計(jì)數(shù)能力，以及對(duì)于菌落計(jì)數(shù)分類的自動(dòng)識(shí)別學(xué)習(xí)能力，更是評(píng)價(jià)分析軟件的關(guān)鍵考量指標(biāo)?，F(xiàn)在比較好的分析軟件，還集成了對(duì)6個(gè)90mm直徑平皿的抑菌圈全自動(dòng)測(cè)量功能，以及對(duì)抗生素效價(jià)分析、藥敏分析功能，可避免用戶重復(fù)購置成像用的硬件。一般分析軟件都具應(yīng)具備對(duì)于分析結(jié)果和標(biāo)記圖像的保存、查看功能。 精準(zhǔn)、穩(wěn)定的傻瓜式操作 全自動(dòng)菌落計(jì)數(shù)儀就是為了減輕工作人員工作強(qiáng)度的，在現(xiàn)今的高技術(shù)下，若還需要估算才能測(cè)出菌落數(shù)的話，應(yīng)是比較落后了?？梢缘氖牵耗堋安蛔儜?yīng)變”精準(zhǔn)、穩(wěn)定地傻瓜式操作的分析軟件，其對(duì)于菌落形態(tài)和樣品狀態(tài)的不確定性，能夠自動(dòng)適應(yīng)，以避免不斷地調(diào)節(jié)菌落分割參數(shù)，其較多由對(duì)話交互來擦除那些個(gè)污染部分，即可。
菌落計(jì)數(shù)器由計(jì)數(shù)器、探筆、計(jì)數(shù)池等部分組成，計(jì)數(shù)器采用CMOS集成電路精心設(shè)計(jì)，LED數(shù)碼管顯示，字高13mm，清晰明亮，配合專用探筆，計(jì)數(shù)靈敏準(zhǔn)確，菌落對(duì)比清楚。便于觀察?？蓮V泛用于食品、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛(wèi)生用品、飲用水、生活污水、工業(yè)廢水、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗(yàn)。那么菌落計(jì)數(shù)器都是怎樣進(jìn)行計(jì)數(shù)的呢？上海巴玖來為您詳細(xì)講解菌落計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)方法。
1.計(jì)數(shù)器測(cè)定法
即用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行計(jì)數(shù)。取一定體積的樣品細(xì)胞懸液置于血細(xì)胞計(jì)數(shù)器的計(jì)數(shù)室內(nèi)，用顯微鏡觀察計(jì)數(shù)。由于計(jì)數(shù)室的容積是一定的(O.1mm3)，因而根據(jù)計(jì)數(shù)器刻度內(nèi)的細(xì)菌數(shù)，可計(jì)算樣品中的含菌數(shù)。本法簡(jiǎn)便易行，可立即得出結(jié)果（本法不僅適于細(xì)菌計(jì)數(shù)，也適用于酵母菌及霉菌孢子計(jì)數(shù)）。
2.電子計(jì)數(shù)器計(jì)數(shù)法
電子計(jì)數(shù)器的工作原理是測(cè)定小孔中液體的電阻變化，小孔僅能通過一個(gè)細(xì)胞，當(dāng)一個(gè)細(xì)胞通過這個(gè)小孔時(shí)，電阻明顯增加，形成一個(gè)脈沖，自動(dòng)記錄在電子記錄裝置上。
該法測(cè)定結(jié)果較準(zhǔn)確，但它只識(shí)別顆粒大小，而不能區(qū)分是否為細(xì)菌。因此，要求菌懸液中不含任何碎片。
3.活細(xì)胞計(jì)數(shù)法
常用的有平板菌落計(jì)數(shù)法，是根據(jù)每個(gè)活的細(xì)菌能長出一個(gè)菌落的原理設(shè)計(jì)的。取一定容量的菌懸液，作一系列的倍比稀釋，然后將定量的稀釋液進(jìn)行平板，根據(jù)培養(yǎng)出的菌落數(shù)，可算出培養(yǎng)物中的活菌數(shù)。此法靈敏度高，是一種檢測(cè)污染活菌數(shù)的方法，也是目前國際上許多國家所采用的方法。使用該法應(yīng)注意：①一般選取菌落數(shù)在30～300之間的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，過多或過少均不準(zhǔn)確；②為了防止菌落蔓延，影響計(jì)數(shù)，可在培養(yǎng)基中加入O．001％2，3，5一氯化三苯基四氮唑(TTC)；③本法限用于形成菌落的微生物。
廣泛應(yīng)用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細(xì)菌檢驗(yàn)，是常用的活菌計(jì)數(shù)法。
4.比濁法
比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測(cè)定細(xì)菌的數(shù)量。細(xì)菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)與透光度成反比，與光密度成正比，所以，可用光電比色計(jì)測(cè)定菌液，用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。
此法簡(jiǎn)便快捷，但只能檢測(cè)含有大量細(xì)菌的懸浮液，得出相對(duì)的細(xì)菌數(shù)目，對(duì)顏色太深的樣品，不能用此法測(cè)定。
5.測(cè)定細(xì)胞重量法
此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后將濕菌體進(jìn)行稱重；干重法系單位體積培養(yǎng)物經(jīng)離心后，以清水洗凈放人干燥器加熱烘干，使之失去水分然后稱重。此法適于菌體濃度較高的樣品，是測(cè)定絲狀真菌生長量的一種常用方法。
6.測(cè)定細(xì)胞總氮量或總碳量
氮、碳是細(xì)胞的主要成分，含量較穩(wěn)定，測(cè)定氮、碳的含量可以推知細(xì)胞的質(zhì)量。此法適于細(xì)胞濃度較高的樣品。
7、顏色改變單位法（colour change unit,簡(jiǎn)稱CCU）
這種方法通常用于很小，用一般的比濁法無法計(jì)數(shù)的微生物，比如支原體等，因?yàn)橹гw的液體培養(yǎng)物是完全透明的，呈現(xiàn)為清亮透明紅色，因此無法用比濁法來計(jì)數(shù)，由于支原體固體培養(yǎng)很困難，用cfu法也不容易計(jì)數(shù)，因此需要用特殊的計(jì)數(shù)方法，即CCU法。它是以微生物在培養(yǎng)基中的代謝活力為指標(biāo)，來計(jì)數(shù)微生物的相對(duì)含量的。
菌落計(jì)數(shù)器使用方法：
1將電源插頭插入實(shí)驗(yàn)室220伏電源插座內(nèi)。
2.將探筆插頭插入儀器上的探筆插孔內(nèi)。
3.將電源開關(guān)撥向“開”，計(jì)數(shù)池內(nèi)燈亮。同時(shí)顯示窗內(nèi)顯示明亮的“000”，表示允許進(jìn)行計(jì)數(shù)。
4.將待檢的培養(yǎng)皿，皿底朝上放入計(jì)數(shù)池內(nèi)。
5.用探筆在培養(yǎng)底面對(duì)所有的菌落逐個(gè)點(diǎn)數(shù)。此時(shí)，菌落處被抹上顏色，顯示窗內(nèi)數(shù)字自動(dòng)累加。
6.用放大鏡仔細(xì)檢查，確認(rèn)點(diǎn)數(shù)無遺漏，計(jì)數(shù)即已完畢。
7．顯示窗內(nèi)的數(shù)字即為該培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。
8.記錄數(shù)字后取出培養(yǎng)皿，按“復(fù)0”按鈕，顯示恢復(fù)“000”。為另一培養(yǎng)皿的計(jì)數(shù)做好準(zhǔn)備。
菌落計(jì)數(shù)器注意事項(xiàng):
1.儀器應(yīng)放置在平整牢固的試驗(yàn)臺(tái)上使用。
2.點(diǎn)數(shù)菌落時(shí)，探筆不要過于傾斜，輕輕點(diǎn)下至有彈跳感時(shí)，數(shù)字即被輸入。
3.儀器應(yīng)防潮，放劇烈震動(dòng)，防直接日光曝曬防酸堿侵蝕。用后應(yīng)加防塵罩。
4.注意防止細(xì)菌培養(yǎng)物污染計(jì)數(shù)池。
5.儀器及探筆均不能隨意拆卸。若發(fā)現(xiàn)故障，應(yīng)請(qǐng)有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員檢修。
菌落計(jì)數(shù)是微生物實(shí)驗(yàn)中比較普遍的實(shí)驗(yàn)之一，菌落計(jì)數(shù)器利用圖像采集器采集圖像,通過計(jì)算機(jī)對(duì)圖像進(jìn)行分析,自動(dòng)計(jì)數(shù)和測(cè)量細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上生長而形成的肉眼可見的菌落或菌斑，是統(tǒng)計(jì)物品含菌數(shù)的有效方法，廣泛用于食品、飲料、藥品、生物制品、化妝品、衛(wèi)生用品、飲用水、生活污水、工業(yè)廢水、臨床標(biāo)本中細(xì)菌數(shù)的檢驗(yàn)。
菌落計(jì)數(shù)器的使用：
1、將電源插頭插入220伏電源插座內(nèi)。
2、將計(jì)數(shù)筆插頭插入儀器上的插孔內(nèi)。
3、將電源開關(guān)撥向“開”，計(jì)數(shù)池內(nèi)燈亮，同時(shí)數(shù)字顯示應(yīng)為“000”，表示允許進(jìn)行計(jì)數(shù)。如數(shù)字不為“000”，應(yīng)按復(fù)零鍵
4、將待檢的培養(yǎng)皿(皿底朝上)，放入計(jì)數(shù)池內(nèi)。
5、用計(jì)數(shù)筆在培養(yǎng)皿底面對(duì)所有的菌落逐個(gè)點(diǎn)數(shù)。每個(gè)數(shù)一個(gè)應(yīng)聽到“嘟”聲才說明有效，否則應(yīng)重點(diǎn)。此時(shí)，點(diǎn)到的菌落被標(biāo)上顏色，顯示數(shù)字自動(dòng)累加。
6、用放大鏡仔細(xì)檢查，確認(rèn)點(diǎn)數(shù)無遺漏，計(jì)數(shù)即已完畢。
7、顯示的數(shù)字即為該培養(yǎng)皿內(nèi)的菌落數(shù)。
8、記錄數(shù)字后取出培養(yǎng)皿。按復(fù)“0”鍵，顯示恢復(fù)“000”，為另一培養(yǎng)皿的計(jì)數(shù)作好準(zhǔn)備。
菌落計(jì)數(shù)器的注意事項(xiàng)：
1、儀器應(yīng)放置在平整牢固的實(shí)驗(yàn)臺(tái)上使用。
2、點(diǎn)數(shù)菌落時(shí)，計(jì)數(shù)筆不要過于傾斜，輕輕點(diǎn)下至有彈跳感，聽到“嘟”聲即可，如點(diǎn)按過重，易損壞計(jì)數(shù)筆。
3、儀器應(yīng)防潮、防劇烈震動(dòng)、防直接日光暴曬、防酸堿侵蝕，用后應(yīng)加防塵罩。
4、注意防止細(xì)菌污染計(jì)數(shù)池。
5、如儀器發(fā)生不計(jì)數(shù)的問題，可按檢驗(yàn)鍵。如計(jì)數(shù)，說明計(jì)數(shù)筆壞。如仍不計(jì)數(shù)，說明儀器本身有問題，若發(fā)現(xiàn)故障，請(qǐng)不要隨意拆卸，應(yīng)請(qǐng)有經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)人員檢修。
菌落計(jì)數(shù)器的作用：
食品殺菌技術(shù)近幾年來逐漸被食品企業(yè)認(rèn)可的一種方式。該技術(shù)在工人工作的同時(shí)，可以同步對(duì)空間空氣殺菌，對(duì)人體沒有任何傷害。
使得經(jīng)高溫后基本無菌的食品半成品，流轉(zhuǎn)至冷卻、挑選、包裝及灌裝等環(huán)節(jié)時(shí)，有效降低或避免這些空氣中含有的微生物附著在食品表面，再次污染食品，有效提高車間空氣和食品衛(wèi)生質(zhì)量。
極大的避免了休閑食品企業(yè)在檢測(cè)中出現(xiàn)菌落總數(shù)超標(biāo)的現(xiàn)象。另外菌落計(jì)數(shù)器在這一技術(shù)中起到了非常重要的作用，菌落計(jì)數(shù)器可以把菌種放大2倍以上，以避免人為的失誤。
菌落計(jì)數(shù)器是一種數(shù)字顯示式自動(dòng)細(xì)菌檢驗(yàn)儀器。由計(jì)數(shù)器、探筆、計(jì)數(shù)池等部分組成，計(jì)數(shù)器采用CMOS集成電路精心設(shè)計(jì)，LED數(shù)碼管顯示，字高13mm，清晰明亮，配合專用探筆，計(jì)數(shù)靈敏準(zhǔn)確。黑色背景式記數(shù)池內(nèi)，熒光燈照明，菌落對(duì)比清楚，便于觀察。
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