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液相色譜儀檢測分析脂肪酸案例 液相色譜操作規(guī)程

時間:2020-06-19    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導(dǎo)讀】LC600高效液相色譜儀(等度配置) P600寶石恒流泵1臺 UV600紫外檢測器1臺 7725i六通進樣閥1只 進口C18柱? 150x4.6 5u? 1根 WS600色譜工作站? 1套 液相色譜

LC600高效液相色譜儀(等度配置)
P600寶石恒流泵1臺
UV600紫外檢測器1臺
7725i六通進樣閥1只
進口C18柱? 150x4.6 5u? 1根
WS600色譜工作站? 1套

液相色譜儀檢測分析脂肪酸案例配置:
樣? 品:未經(jīng)衍生處理的亞麻酸等6組分的混合物
色譜儀:“南京科捷LC600”液相色譜儀,四元梯度泵,色譜工作站
檢測器:500型ELSD Alltech 蒸發(fā)光散射檢測器
漂移管溫度為65℃,氮氣流速為2.0L/min
色譜柱:AlltimaTM C18 ,5μm,柱長25cm,柱徑2.1mm
流動相:A為水,B為乙腈
梯? 度? 時間0min 10min 15min20min
A13%? 20%20%? 5%?
B77%? 80%80%? 95%
流? 速:0.4mL/min
進? 樣:20μL
結(jié)? 果:所有組分20min之內(nèi)全部流出,各組分完全分離,組分流出順序為:峰1為亞麻酸,峰2為肉豆蔻酸,峰3為亞油酸,峰4為棕櫚酸,峰5為油酸,峰6為硬脂酸。

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高效液相色譜儀在五大領(lǐng)域中的應(yīng)用

  高效液相色譜儀是利用混合物各組分在固定相和流動相中溶解、分配或吸附等化學(xué)作用性能的差異,使各組分在作相對運動的兩相中反復(fù)多次受到上述各作用力而達到相互分離。高效液相色譜儀在食品分析、環(huán)境分析、生命科學(xué)、醫(yī)學(xué)檢驗和無機分析等領(lǐng)域得到廣泛使用。一般來說,80%~85%的有機物原則上可采用高效液相色譜儀分析。

  一、在食品分析中:

  1、食品營養(yǎng)成分分析:蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、色素、維生素、香料、有機酸(鄰苯二甲酸、檸檬酸和蘋果酸等)、有機胺和礦物質(zhì)等分析。

  2、食品添加劑分析:甜味劑、防腐劑、著色劑(檸檬黃、莧菜紅、靛藍、胭脂紅、日落黃和亮藍等)和抗氧化劑等分析。

  3、食品污染物分析:霉菌毒素(黃qu霉毒素、黃桿菌毒素和大腸桿菌毒素等)、微量元素和多環(huán)芳烴等分析。

  二、在環(huán)境分析中:

  多環(huán)芳烴(特別是稠環(huán)芳烴)和農(nóng)藥殘留(氨基甲酸脂類,反相色譜)等分析。

  三、在生命科學(xué)中的應(yīng)用:

  1、低分子量物質(zhì):氨基酸、有機酸、有機胺、類固醇、卟啉、糖類和維生素等分析。

  2、高分子量物質(zhì):多肽、核糖核酸、酶(胰島素、激素、細胞色素和干擾素等)和蛋白質(zhì)等分析。

  四、在醫(yī)學(xué)檢驗中:

  1、合成藥物:抗生素、抗憂郁藥物和黃胺類藥等分析。

  2、天然藥物生物堿:吲哚堿、顛茄堿和強心甙等分析。

  五、在無機分析中:

  陽、陰離子等分析。

標簽: 高效液相色譜儀
高效液相色譜儀 高效液相色譜儀在五大領(lǐng)域中的應(yīng)用_高效液相色譜儀
  安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作
 
  1. 目的:明確安捷倫液相色譜儀的規(guī)范操作,確保數(shù)據(jù)的準確性。
 
  2. 范圍:適用于安捷倫液相色譜儀。
 
  3. 職責:檢驗人員對此負責。
 
  4. 操作規(guī)程:
 
  4.1 系統(tǒng)組成
 
  本系統(tǒng)由1個溶劑二元輸送泵(分主/A泵和副/B泵)、手動進樣閥、柱溫箱、檢測器、化學(xué)工作站和電腦等組成。
 
  4.2 準備
 
  4.2.1使用前應(yīng)根據(jù)待檢樣品的檢驗方法準備所需的流動相,用合適的0.45μm濾膜過濾,超聲脫氣20min。
 
  4.2.2 根據(jù)待檢樣品的需要更換合適的色譜柱(柱進出口位置應(yīng)與流動相流向一致)和定量環(huán)。
 
  4.2.3 配制樣品和標準溶液(也可在平衡系統(tǒng)時配制),用合適的0.45μm濾膜過濾。
 
  4.2.4 檢查儀器各部件的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常
 
  4.1 將待測樣品按要求前處理,準備HPLC 所需流動相,檢查線路是否連接完好,廢液瓶是否夠用等。
 
  4.3開機:
 
  4.3.1 打開計算機,進入中文Windows XP畫面,并運行CAG Bootp Server程序。
 
  4.3.2 打開 1200 LC 各模塊電源。
 
  4.3.3 待各模塊自檢完成后,雙擊[Instrument 1 Online]圖標,化學(xué)工作站自動與1200LC
 
  通訊,進入的工作站畫面如下所示。
 
  4.3.4 從[視圖]菜單中選擇[方法和運行控制]畫面, 點擊[視圖]菜單中的[顯示頂部 工具欄], [ 顯示狀態(tài)工具欄],[系統(tǒng)視圖],[樣品視圖],使其命令前有[√]標志,來調(diào)用所需的界面。
 
  4.3.5 把流動相放入溶劑瓶中。
 
  4.3.6 打開沖洗閥。
 
  4.3.7 點擊[泵]圖標,點擊[設(shè)置泵…]選項,進入泵編輯畫面。
 
  4.3.8 設(shè)流速:5ml/min,點擊[確定]。
 
  4.3.9 點擊[泵] 圖標,點擊[控制…]選項,選中[啟動],點擊[確定] ,則系統(tǒng)開始沖洗,直到管線內(nèi)(由溶劑瓶到泵入口)無氣泡為止,切換通道繼續(xù)沖洗,直到所有要用通道無氣泡為止。
 
  4.3.10 點擊[泵] 圖標,點擊[控制…]選項,選中[關(guān)閉],點擊[確定]關(guān)泵, 關(guān)閉沖洗閥。
 
  4.3.11 點擊[泵]圖標,點擊 [設(shè)置泵…選項],設(shè)流速:1.0ml/min。
 
  4.3.12 點擊泵下面的瓶圖標,如下圖所示(以單元泵為例),輸入溶劑的實際體積和瓶體積。 也可輸入停泵的體積,點擊[確定]。
 
  4.4 數(shù)據(jù)采集方法編輯
 
  4.4.1開始編輯完整方法:從[方法]菜單中選擇[編輯完整方法…] 項,如下圖所示選中除[數(shù)據(jù)分析 ]外的三項,點擊[確定],進入下一畫面。 4.4.2方法信息
 
  4.4.2.1在[方法注釋]中加入方法的信息(如:測試方法)。 4.4.2.2 點擊 [確定], 進入下一畫面。 4.4.3 泵參數(shù)設(shè)定
 
  4.4.3.1 在[流速]處輸入流量,如1ml/min,在[溶劑 B]處輸入80.0,(A=100-B) ,也可[插入 ]一行[時間表] ,編輯梯度。在[壓力限]處輸入柱子的zui大耐高壓,以保護柱子。
 
  4.4.3.2 點擊[確定],進入下一畫面。
 
  4.4.4 柱溫箱參數(shù)設(shè)定
 
  4.4.4.1 在[溫度]下面的空白方框內(nèi)輸入所需溫度,如:40度。并選中它,點擊[更多>>] 鍵,如圖所示,選中[與左側(cè)相同],使柱溫箱的溫度左右一致。
 
  4.4.4.2 點擊[確定],進入下一畫面。
 
  4.4.5 檢測器參數(shù)設(shè)定:檢測波長:一般選擇zui大吸收處的波長。樣品帶寬:一般選擇zui大吸收值一半處的整個寬度。參比波長:一般選擇在靠近樣品信號的無吸收或低吸收區(qū)域 。參比帶寬:至少要與樣品信號的帶寬相等,許多情況下用100nm作為缺省值。同時可以輸入采集光譜方式,步長,范圍,閾值。選中所用的燈。
 
  4.4.6 在[ 運行時選項表 ]中選中[ 數(shù)據(jù)采集],點擊[確定]。
 
  4.4.7 點擊[方法]菜單,選中[方法另存為…],輸入一方法名,如[測試],點擊[確定]。
 
  4.4.8 從菜單 [視圖]中選中[在線信號],選中[信號窗口1],然后點擊[改變…] 鈕,將所要繪圖的信號移到右邊的框中,點擊[確定]。(如同時檢測二個信號,則重復(fù)10,選中[信號窗口2]。
 
  單擊[改變]鍵,即可彈出右側(cè)的[編輯信號圖譜]窗口,進而選擇所需的譜圖信號。 4.4.9 從[運行控制]菜單中選擇[樣品信息]選項,如下圖所示,輸入操作者名稱,如[安裝工程師];在[數(shù)據(jù)文件 ]中選擇[手動]或[前綴/計數(shù)器]。區(qū)別: 手動--每次做樣之前必須給出新名字,否則儀器會將上次的數(shù)據(jù)覆蓋掉。 Pr—在前綴/計數(shù)器----[前綴]框中輸入前綴,在[計數(shù)器]框中輸入計數(shù)器的起始位,儀器會自動命名,如vwd數(shù)據(jù)0001,vwd數(shù)據(jù)0002……。
 
  4.4.10 點擊[確定] ,從[儀器] 菜單選擇[系統(tǒng)開啟]。
 
  4.4.11 等儀器準備好,基線平穩(wěn),用試樣溶液清洗注射器,并排除氣泡后抽取適量。


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