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微生物檢測(cè)中如何應(yīng)用恒溫培養(yǎng)箱 培養(yǎng)箱操作規(guī)程

時(shí)間:2020-06-19    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導(dǎo)讀】常規(guī)菌檢測(cè)的目的是一種指示菌,一般以CFU/ML來(lái)計(jì)量,比如總菌數(shù)和大腸菌群,這兩個(gè)一般是用來(lái)評(píng)價(jià)食品被污染的程度,因?yàn)榘闯@恚覀兩町?dāng)中接觸的致病菌還是相對(duì)較少的,而且人體本身也具有免疫功能,

常規(guī)菌檢測(cè)的目的是一種指示菌,一般以CFU/ML來(lái)計(jì)量,比如總菌數(shù)和大腸菌群,這兩個(gè)一般是用來(lái)評(píng)價(jià)食品被污染的程度,因?yàn)榘闯@?,我們生活?dāng)中接觸的致病菌還是相對(duì)較少的,而且人體本身也具有免疫功能,所以如果這兩個(gè)指示菌如果不超標(biāo)的話,我們就有理由相信該食品是相對(duì)安全的,注意:不是絕對(duì)安全。所以我們就要對(duì)微生物進(jìn)行檢測(cè),二恒溫培養(yǎng)箱是檢測(cè)中必不可少的。

  傳統(tǒng)的檢測(cè)方法也很簡(jiǎn)單,一般就是培養(yǎng)富集后計(jì)數(shù),其大致流程是這樣:

  1)取樣,一般都是取25g樣品加入到225ml的生理鹽水中,取樣方法會(huì)根據(jù)樣品不同有所不同。比如肉制品,可以用剪刀剪碎。

  2)計(jì)數(shù),找一個(gè)比較容易計(jì)數(shù)的梯度進(jìn)行計(jì)數(shù),然后根據(jù)稀釋倍數(shù)反推出樣品中的微生物,計(jì)數(shù)說(shuō)簡(jiǎn)單點(diǎn)就是數(shù)菌落的數(shù)量,如果你涂抹夠開(kāi)的話,每個(gè)培養(yǎng)前的微生物會(huì)長(zhǎng)成一個(gè)菌落,所以個(gè)1個(gè)菌落就代表1個(gè)使用恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)前的微生物。(說(shuō)到這,我就想起我以前老是想,一個(gè)菌落是由很多個(gè)微生物組成的,光數(shù)菌落怎么會(huì)得出樣品中微生物的個(gè)數(shù)呢?這就是沒(méi)有考慮培養(yǎng)前與培養(yǎng)后的變化。

  3)稀釋,一般來(lái)說(shuō)稀釋3個(gè)梯度,10倍,100倍,1000倍,而且每個(gè)稀釋梯度要倒兩個(gè)平板。

  4)均質(zhì),要保證均質(zhì)的力度不能太大,如果太大有可能損害樣品中的微生物,有些檢驗(yàn)人員可能就是用手捏一捏,甩一甩,也有用拍擊式均質(zhì)器的

  5)培養(yǎng),把事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基(培養(yǎng)基的制備,一般要經(jīng)過(guò)配比,高壓滅菌等過(guò)程,當(dāng)然也有配制好的商業(yè)培養(yǎng)基,進(jìn)口的有MERCK,國(guó)產(chǎn)的也很多,比如陸橋)倒平板,然后劃線培養(yǎng)或者涂抹均勻即可,只要保證盡量把含菌的稀釋液涂抹開(kāi),不要有菌落重疊的現(xiàn)象,然后放入恒溫培養(yǎng)箱的進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)溫度與所檢測(cè)微生物不同而不同,比如大腸菌群是37度,糞大腸菌群要略高一點(diǎn),具體多少,我也記得不是很清楚了

  常規(guī)菌大概就是這樣啦,目前大多數(shù)檢驗(yàn)單位都在使用這種傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法,其優(yōu)點(diǎn)就是便宜,廉價(jià),但是比較慢,如今市面上有很多總菌數(shù)和大腸菌群的快速商業(yè)方法,比如3M,他們?cè)诩埰咸峁┈F(xiàn)成的培養(yǎng)基,只需把稀釋液直接接種到培養(yǎng)基即可,相比較而言,節(jié)省了我們制備培養(yǎng)基的時(shí)間,不過(guò)貌似在培養(yǎng)時(shí)間上并沒(méi)有縮短。還有檢測(cè)培養(yǎng)基電導(dǎo)率方法來(lái)檢測(cè)的,因?yàn)榕囵B(yǎng)前,培養(yǎng)基都是大分子物質(zhì),這些物質(zhì)的電導(dǎo)率相對(duì)較低,經(jīng)過(guò)微生物代謝后,被分解為小分子物質(zhì),所以電導(dǎo)率急劇增加,通過(guò)建一個(gè)曲線來(lái)反推微生物的個(gè)數(shù)。

  致病菌的檢測(cè)是不得檢出的,所以要比常規(guī)菌要復(fù)雜,所耗時(shí)間更長(zhǎng),有可能還需要用沒(méi)有選擇性的培養(yǎng)基進(jìn)行前增菌,然后再用選擇性培養(yǎng)基在恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行增菌,如果有可疑菌落再挑取利用生化反應(yīng)進(jìn)行鑒定。

  比如沙門氏菌,檢測(cè)流程大致如下:

  1)取樣,同常規(guī)菌
 2)均質(zhì),同常規(guī)菌
 3)前增菌,先要用無(wú)選擇性的培養(yǎng)基進(jìn)行富集增菌,因?yàn)橛锌赡軜悠分兴纳抽T氏菌受傷,或較少,直接用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)的話,沙門氏菌不會(huì)生長(zhǎng),從而出現(xiàn)假陰性。
 4)增菌,用選擇性的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),這樣大部分的微生物在選擇性的培養(yǎng)基上都不會(huì)生長(zhǎng),就如同過(guò)濾一樣,如果長(zhǎng)菌,根據(jù)菌落形態(tài)學(xué)來(lái)判斷到底是否為可疑菌落,如果沒(méi)有可疑菌落,可以判定為陰性,如果有,挑取并做生化反應(yīng)鑒定是否是真的沙門氏菌。

掌握好這些恒溫培養(yǎng)箱的使用方式,可以讓我們?cè)诩?xì)菌檢測(cè)的過(guò)程中,更加的準(zhǔn)備,迅速。

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【導(dǎo)讀】振蕩培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用在科研、農(nóng)業(yè)、化工等領(lǐng)域。振蕩培養(yǎng)箱是培養(yǎng)箱和振蕩器相結(jié)合的一種設(shè)備,具有加熱和制冷雙向調(diào)溫系統(tǒng)兩種功能,而且溫度是可以控制的,是水體



    振蕩培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用在科研、農(nóng)業(yè)、化工等領(lǐng)域。振蕩培養(yǎng)箱是培養(yǎng)箱和振蕩器相結(jié)合的一種設(shè)備,具有加熱和制冷雙向調(diào)溫系統(tǒng)兩種功能,而且溫度是可以控制的,是水體分析和BOD測(cè)定細(xì)菌、霉菌、微生物的培養(yǎng)、保存、植物的栽培、育種實(shí)驗(yàn)的專用恒溫設(shè)備。

    振蕩培養(yǎng)箱主要特點(diǎn):

    ①箱體的隔熱材料采用聚胺酯現(xiàn)場(chǎng)發(fā)泡的泡沫塑料,對(duì)外來(lái)熱(冷)源有較強(qiáng)的抗干擾能力。

    ②工作腔內(nèi)設(shè)有風(fēng)道,溫度分布均勻。

    ③內(nèi)壁采用不銹鋼制作,抗腐蝕性能良好。

    ④加熱系統(tǒng)在環(huán)境溫度為-5℃時(shí)能升溫至50℃。

    ⑤制冷系統(tǒng)在環(huán)境溫度為32℃時(shí)能降溫至5℃。

    ⑥萬(wàn)能彈簧試瓶架特別適合作多種對(duì)比試驗(yàn)的生物樣品的培養(yǎng)設(shè)備。

    ⑦無(wú)級(jí)調(diào)速,操作安全。

    ⑧溫控精確,數(shù)字顯示。

    振蕩培養(yǎng)箱的使用技巧如下:

    1、振蕩培養(yǎng)箱使用前,各控制開(kāi)關(guān)均應(yīng)處于非工作狀態(tài),調(diào)速旋鈕應(yīng)置于最小位置。

    2、振蕩培養(yǎng)箱應(yīng)放置在平整的地面上,環(huán)境應(yīng)清潔整齊,干燥通風(fēng)。

    3、接通外電源,將電源開(kāi)關(guān)置于“開(kāi)"的位置,指示燈亮。

    4、選擇培養(yǎng)溫度:請(qǐng)參考使用說(shuō)明書(shū)。

    5、開(kāi)振蕩培養(yǎng)箱“振蕩開(kāi)關(guān)",指示燈亮,緩慢調(diào)節(jié)調(diào)速旋鈕,升至所需轉(zhuǎn)速。

    6、在調(diào)速范圍內(nèi)中速使用,可延長(zhǎng)全溫振蕩培養(yǎng)箱的使用壽命。

    7、振蕩培養(yǎng)箱每次停機(jī)前,各控制開(kāi)關(guān)均應(yīng)處于非工作狀態(tài),切斷電源。

    8、裝培養(yǎng)試瓶,為了使全溫振蕩培養(yǎng)箱在振蕩時(shí)平衡性能好,避免產(chǎn)生較大的振動(dòng),裝瓶時(shí)應(yīng)將所有試瓶位布滿,各瓶的培養(yǎng)液應(yīng)大致相等。若培養(yǎng)液不足數(shù),可將試瓶對(duì)稱放置。





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