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液相色譜柱壓升高原因 液相色譜操作規(guī)程

時(shí)間:2020-06-19    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導(dǎo)讀】?色譜柱是高效液相色譜的心臟,在高效液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透性,延長(zhǎng)柱子的使用壽命非常重要。色譜柱壓升高一般是由于柱床內(nèi)產(chǎn)生了雜質(zhì),造成流體阻力加大所致。淺析其原因,大致有以

?色譜柱是高效液相色譜的心臟,在高效液相色譜儀的使用中,保持色譜柱的柱效、容量和滲透性,延長(zhǎng)柱子的使用壽命非常重要。色譜柱壓升高一般是由于柱床內(nèi)產(chǎn)生了雜質(zhì),造成流體阻力加大所致。淺析其原因,大致有以下幾方面:

1、流動(dòng)相的前處理
雜質(zhì)堵塞色譜柱進(jìn)口濾片,導(dǎo)致壓力升高。這往往是由于流動(dòng)相沒(méi)有過(guò)濾,或雖已過(guò)濾但過(guò)濾不徹底,使固體雜質(zhì)滯留于濾板上所造成的。

2、樣品的沉淀
當(dāng)溶解樣品的溶劑與流動(dòng)相不一致時(shí),樣品進(jìn)入色譜柱,有時(shí)可能因溶解度降低而沉淀出來(lái),造成壓力升高。

3、晶體的析出
使用含有緩沖液的流動(dòng)相時(shí),緩沖液中的無(wú)機(jī)鹽可能會(huì)殘留在體系之中,它們會(huì)因在新流動(dòng)相中的溶解度降低而析出,造成流體阻力加大、壓力升高。

4、細(xì)菌或霉菌孳生
霉菌在流動(dòng)相中、管路中或柱子進(jìn)口處繁殖、生長(zhǎng)堵塞濾板,導(dǎo)致壓力升高。所以在使用磷酸鹽緩沖液時(shí)一般要現(xiàn)配現(xiàn)用。

5、溶質(zhì)吸附
當(dāng)溶質(zhì)在柱子上有較強(qiáng)的吸附,且所用的流動(dòng)相難以將它們洗脫時(shí),累積的未洗脫溶質(zhì)也會(huì)造成阻力增大和壓力升高。

6、流動(dòng)相更換過(guò)度較快
當(dāng)改變流動(dòng)相體系時(shí),不徹底的更換使不同性質(zhì)、互不混溶的流動(dòng)相存在于同一個(gè)體系之中,也會(huì)造成壓力升高。

7、壓力脈沖
運(yùn)行過(guò)程中,有時(shí)會(huì)產(chǎn)生系統(tǒng)內(nèi)壓力的突然升降。如此所形成的壓力脈沖會(huì)造成多孔填料的崩壞和柱床結(jié)構(gòu)的微小變化,填料微屑的長(zhǎng)期積累也可能會(huì)使柱床阻力增大,造成壓力升高。

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相關(guān)熱詞:

等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,高效液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓滅菌器,集菌儀,接地電阻測(cè)試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場(chǎng)強(qiáng)儀萬(wàn)能材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。

【導(dǎo)讀】? 液相色譜儀使用時(shí)要非常的注意: ? 使用卡套柱時(shí),兩端的卡套應(yīng)時(shí)刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗,任何時(shí)候都不能將卡套取下來(lái),否則會(huì)造成填料的流失。 液相色譜柱使用注意: A.卡套柱的

?

液相色譜儀使用時(shí)要非常的注意:
? 使用卡套柱時(shí),兩端的卡套應(yīng)時(shí)刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗,任何時(shí)候都不能將卡套取下來(lái),否則會(huì)造成填料的流失。
液相色譜柱使用注意:
A.卡套柱的安裝(加預(yù)柱)
1.將卡套架套入柱芯??
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使夾套高于柱芯
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過(guò)夾套片?
4.將"子彈頭"預(yù)柱放入卡套片內(nèi)?
5.將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手?jǐn)Q緊
6.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
B.平衡色譜柱
? 反相色譜柱在經(jīng)過(guò)出廠測(cè)試后是保存在乙腈/水中的。請(qǐng)一定確保您所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過(guò)程中可能會(huì)干掉,因此在用流動(dòng)相分析樣品之前,應(yīng)使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱;如果您所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水"過(guò)渡"。
? 硅膠柱或極性色譜柱在經(jīng)過(guò)出廠測(cè)試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水的流動(dòng)相,請(qǐng)?jiān)谑褂昧鲃?dòng)相之前用乙醇或異丙醇平衡?
? 如何平衡色譜柱?
? 平衡過(guò)程中,將流速緩慢地提高用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對(duì)試劑度如果較低,則需要較長(zhǎng)的時(shí)間來(lái)平衡)
? 色譜柱的再生
? 進(jìn)行色譜柱再生時(shí),應(yīng)使用一個(gè)謙價(jià)的泵,我們建議可以不使用您的高效液相色譜儀上的泵。
? 注意:
? 在對(duì)NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時(shí),由于NH2可能成銨根離子的形式存在,因此應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。 如果簡(jiǎn)單的有機(jī)溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì),用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。
色譜柱的維護(hù):  
1.使用預(yù)柱保護(hù)分析柱(硅膠在極性流動(dòng)相/離子性流動(dòng)相中有一定的溶解度)
2.大多數(shù)反相色譜柱的pH穩(wěn)定范圍是2-7.5,盡量不超過(guò)該色譜柱的pH范圍
3.避免流動(dòng)相組成及極性的劇烈變化
4.流動(dòng)相使用前必須經(jīng)脫氣和過(guò)濾處理?
5.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動(dòng)相,應(yīng)在實(shí)驗(yàn)完畢柱子沖洗干凈,并保存大乙腈中
6.壓力升高是需要更換預(yù)柱的信號(hào)

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【導(dǎo)讀】一、技術(shù)指標(biāo)優(yōu)異首先是如何看指標(biāo)。液相色譜儀的指標(biāo)很多,有泵的、檢測(cè)器的、色譜柱等等。我們認(rèn)為要看主要技術(shù)指標(biāo),根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),儀器的主要指標(biāo)有噪音,漂移



    一、技術(shù)指標(biāo)優(yōu)異

    首先是如何看指標(biāo)。液相色譜儀的指標(biāo)很多,有泵的、檢測(cè)器的、色譜柱等等。我們認(rèn)為要看主要技術(shù)指標(biāo),根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn),儀器的主要指標(biāo)有噪音,漂移,最小檢測(cè)濃度,定性定量重復(fù)性等。這些指標(biāo)都要放在系統(tǒng),回路里去看,去比較。就是需要把各單元裝置都要聯(lián)接好,如接好色譜柱,進(jìn)樣閥,并且要通上流動(dòng)相。因?yàn)槟诜治鲋幸捕际锹?lián)接好以后才可以進(jìn)行分析的,而不是單單用個(gè)檢測(cè)器或是泵的。

    然后在這個(gè)基礎(chǔ)上,我們?cè)偃ケ容^這些主要指標(biāo)。

    1、噪音

    是指由儀器的電器元件、溫度波動(dòng)、電壓的線性脈沖以及其他非溶質(zhì)作用產(chǎn)生的高頻噪聲和基線的無(wú)規(guī)則波動(dòng)。噪音的大小直接關(guān)系到儀器的檢測(cè)靈敏度,噪音越大,檢測(cè)的靈敏度就越低。對(duì)于檢測(cè)低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好,否則噪音過(guò)大將會(huì)導(dǎo)致基線不穩(wěn),甚至影響分析結(jié)果。

    2、最小檢測(cè)濃度(最小檢測(cè)限)

    是反映儀器靈敏度的重要參數(shù)。CL=2×Nd×C/H(CL:最小檢測(cè)濃度Nd:噪音C:樣品濃度最小檢測(cè)濃度H:樣品峰高)由上式可見(jiàn),最小檢測(cè)濃度是和噪音成正比的,噪音越大,最小檢測(cè)濃度就越大,靈敏度就越低。某些廠家回避了這個(gè)指標(biāo),說(shuō)明他們不愿在最小檢測(cè)濃度的基礎(chǔ)上去比較噪音。

    3、漂移

    是指儀器穩(wěn)定后一段時(shí)間內(nèi)基線漂離原點(diǎn)的距離,通常用來(lái)衡量?jī)x器穩(wěn)定快慢。高品質(zhì)的儀器能在較短的時(shí)間內(nèi)達(dá)到穩(wěn)定,從而在一定程度上提高了分析效率。

    4、定性定量重復(fù)性

    主要是考核儀器穩(wěn)定性的指標(biāo),這對(duì)于分析樣品來(lái)說(shuō)是非常重要的。好的儀器其穩(wěn)定性應(yīng)該是十分優(yōu)秀的,這就要求多次進(jìn)樣保留時(shí)間及含量的一致性,這樣做出來(lái)的結(jié)果才能使人信服。

    二、系統(tǒng)的整體開(kāi)發(fā)

    這里指的是儀器的整體開(kāi)發(fā),是一個(gè)完整的系統(tǒng)。目前市場(chǎng)上有這個(gè)現(xiàn)象,說(shuō)我的泵是進(jìn)口的,或者是檢測(cè)器怎么好,用了什么很多的進(jìn)口件組裝等等。其實(shí)這是個(gè)誤區(qū)。液相色譜是個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng),不是整體開(kāi)發(fā)的,各項(xiàng)指標(biāo)之間、軟件和硬件、硬件和硬件等都不匹配,整體水平不會(huì)高到哪里去,而且在售后服務(wù)方面對(duì)用戶也是不負(fù)責(zé)任的。

    整體開(kāi)發(fā)的主要優(yōu)點(diǎn)有:各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)統(tǒng)一、儀器各單元的通信協(xié)調(diào)、能夠建立一個(gè)整體的數(shù)字化評(píng)價(jià)系統(tǒng)、體現(xiàn)了企業(yè)的科技及開(kāi)發(fā)實(shí)力。

    國(guó)外知名的儀器生產(chǎn)廠家的產(chǎn)品也是整體開(kāi)發(fā)的,所以能夠保證儀器的整體水平。

    三、操作方便

    操作方便性無(wú)論是對(duì)新手還是成熟的用戶都是很重要的。操作越簡(jiǎn)單,有利于提高分析效率,也為以后分析方法的拓展提供有力的幫助。

    四、穩(wěn)定可靠,故障率低。





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