偏光顯微鏡被廣泛地應(yīng)用在礦物、化學(xué)等領(lǐng)域,在生物學(xué)和植物學(xué)也有應(yīng)用。例如:在植物學(xué)方面,如鑒別纖維、染色體、紡錘絲、淀粉粒、細(xì)胞壁以及細(xì)胞質(zhì)與組織中是否含有晶體等。醫(yī)學(xué)上的應(yīng)用則是用偏光顯微鏡檢查關(guān)節(jié)液中的結(jié)晶,檢驗(yàn)淀粉我們都知道可以用碘液染色來(lái)確定,但使用偏光顯微鏡,不用染色就可以確定是不是淀粉了。這是馬鈴薯的淀粉粒,只要切一小片馬鈴薯,然后在載玻片上涂抹,滴一滴水制成水埋玻片就可以觀察了。在低倍下,沒(méi)有染色只是一般的顆粒。
一般淀粉呈白色或類(lèi)白色,不溶于、乙醇、丙酮等有機(jī)溶劑,也不溶于冷水。淀粉是以顆粒狀態(tài)存在于胚乳細(xì)胞中,不同來(lái)源的淀粉其形狀、大小各不相同,應(yīng)用顯微鏡觀察可以區(qū)別不同的淀粉或確定未知試樣的種類(lèi)。淀粉顆粒的形狀大致可分為圓形、橢圓形和多角形3種。一般水分高,蛋白質(zhì)含量少的植物淀粉顆粒較大,多呈圓形或橢圓形,如馬鈴薯淀粉;反之顆粒較小,呈多角形,如米淀粉。在400~600倍顯微鏡下觀察,可以看到有些淀粉表面有輪紋,與樹(shù)木的年輪相似,馬鈴薯淀粉輪紋極明顯。
不過(guò)只要旋轉(zhuǎn)偏光片,世界就不一樣了,淀粉粒上會(huì)出現(xiàn)十字,這個(gè)十字有特殊的名字,稱(chēng)為馬耳他十字(MalteseCross),十字的交點(diǎn)就在淀粉粒的臍。這個(gè)馬耳他十字可是有歷史的。再放大一點(diǎn),可以看見(jiàn)淀粉粒上的環(huán)紋,中心點(diǎn)就是臍的位置。
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在實(shí)際操作中,偏正顯微鏡的上下偏振鏡的振動(dòng)方向要互相正交,或東西和南北方向,各自與目鏡十字絲的橫、縱向一致。有時(shí)只用一個(gè)下偏振鏡來(lái)觀測(cè),必須確定下偏振鏡的振動(dòng)方向,因此操作時(shí)必須對(duì)偏振鏡進(jìn)行校正。
(1) 目鏡十字絲的檢測(cè)
一般要檢查目鏡十字絲是否正交,以及是否與上下偏振鏡振動(dòng)方向一致,同時(shí)選一塊解理極完全的黑云母,移至目鏡十字絲的中心,將解理縫平行于十字絲的一根絲,記下載物臺(tái)的刻度數(shù),再轉(zhuǎn)動(dòng)物臺(tái)使解理縫平行于另一十字絲,記下載物臺(tái)的刻度數(shù),兩個(gè)刻度數(shù)之差為90°,說(shuō)明十字絲正交。
(2) 下偏振鏡振動(dòng)方向的確定和校正
一般用黑云母來(lái)檢查下偏振鏡的振動(dòng)方向,這是因?yàn)楹谠颇甘且环N分布廣泛的透明礦物,在單偏光下很有特征。首先找一塊解理和清晰的黑云母,移至目鏡十字絲中心,推出上偏光鏡,轉(zhuǎn)動(dòng)載物臺(tái)一周,觀察黑云母顏色的變化,因?yàn)楹谠颇笇?duì)解理方向的振動(dòng)光吸收較強(qiáng),所以使黑云母顏色達(dá)到最深時(shí),解理縫的方向就是下偏光鏡的振動(dòng)方向。
(3) 上下偏振鏡正交的校正
下偏振鏡的方向校正好之后,取下薄片,推人上偏振鏡,觀察視域是否全黑即是否處于消光狀態(tài)。如果全黑,則表明上下偏光的振動(dòng)方向互相正交。否則,上偏振鏡須進(jìn)行校正,即轉(zhuǎn)動(dòng)上偏振鏡,使視域達(dá)到最暗為止。轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)必須先松開(kāi)上偏振鏡的止動(dòng)螺絲,校正好后再擰緊。