氣相色譜柱選擇的技巧:
一般,初次使用氣相色譜儀的朋友對色譜柱不知怎樣合理配置色譜柱,總希望柱子越多越好,盲目購置許多柱子或固定液、擔(dān)體等,結(jié)果有許多閑置造成浪費?,F(xiàn)在向大家推薦一些值得考慮的經(jīng)驗。
一般準(zhǔn)備幾個柱子就基本可以解決各類氣相色譜分析工作的要求,可優(yōu)先選擇固定液分別為SE-30(或者OV-101)、OV-17、PEG-20M、DEGS、FFAP,的柱子各一個。對于填充柱,擔(dān)體可選白色擔(dān)體、紅色擔(dān)體(包括未酸洗、酸洗、硅烷化)、GDX系列(或者Porapak系列),三種,基本可以解決工作中絕大部分項目。
對柱子長短的選擇:由于分辨率與柱長的平方根成正比。柱子長,則提高分辨率。一般來說:15m的短柱用于快速分離較簡單的樣品,也適于快速成分析;30m的色譜柱是常用的柱長,大多數(shù)分析在此長度的柱子上成;50m、60m或更長的色譜柱用于分離比較復(fù)雜的樣品。
對于口徑的選擇:柱徑直接影響柱子的效率、保留特性和樣品容量。小口徑柱比大口徑柱有更高柱效,但柱容量更小。
0.25mm:具有較高的柱效,柱容量較低。分離復(fù)雜樣品較好。0.32mm:柱效稍低于0.25mm的色譜柱,但柱容量約高60%。0.53mm:具有類似于填充柱的柱容量,可用于分流進樣,也可用于不分流進樣,當(dāng)柱容量是主要考慮因素時(如痕量分析),選擇大口徑毛細管柱較為合適。中科國環(huán)環(huán)境研究中心專家認為,對于普通用戶,可選30米或50米長的毛細管,口徑選0.32mm較為便利。
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色譜柱是化學(xué)實驗中常見、常用的化工儀器之一,正確而有效的使用方法,不僅能夠延長色譜柱的使用壽命,也能確保試驗的準(zhǔn)確性。
1、保護柱
保護柱是很短的色譜柱,填裝和液相色譜柱相同的填料。正確使用保護柱,可以起到阻攔一些容易損壞液相色譜柱的物質(zhì)的作用。從而達到延長柱子壽命的效果。相反,如果使用”保護柱”不當(dāng),可能會縮短色譜柱的使用壽命。例如,在保護柱使用過程中,如果污染達到一定程度而沒有及時更換,累積的雜物很可能會沖入色譜柱中,反而會造成色譜柱損壞。因此,在使用”保護柱”時,重要的是要知道什幺時候該換保護柱。該換的時候就必須要立即更換。
2、選擇高品質(zhì)的色譜柱
一般認為同一廠牌、同一型號的色譜柱之間的品質(zhì)都相同,對品質(zhì)管理很嚴(yán)格的廠家而言,這說法是成立的。但如果廠家品質(zhì)管理不夠嚴(yán)格,即使是同一批號的新色譜柱之間的品質(zhì)也有差異。所以,選用色譜柱時必須選擇管理嚴(yán)格的高品質(zhì)色譜柱,我們知道,任何色譜柱使用過后都會產(chǎn)生變化。尤其如在強酸或強堿條件下使用,色譜柱更易產(chǎn)生變化。因此,應(yīng)盡量選用pH適用范圍大的色譜柱。在開發(fā)新分析方法時,許多專家建議不要使用舊色譜柱。因色譜柱一經(jīng)使用。柱性會改變;如此一來,使用舊色譜柱開發(fā)出來的新分析方法,很可能在再使用同廠牌的新色譜柱分析時。發(fā)生無法達到預(yù)定效果的情況??偟恼f。開發(fā)新分析方法時要使用品質(zhì)好的新色譜柱;并且一支色譜柱使用在一種分析方法上;則色譜柱壽命可以延長。
3、定期沖洗色譜柱。
一般柱子使用一段時間后總會有一些雜質(zhì)累積在柱內(nèi),而且這些雜質(zhì)不會隨著流動相出來,會逐漸影響柱子的品質(zhì)。這些雜質(zhì)在后來的分析譜圖上出現(xiàn)。從而造成出現(xiàn)怪峰、基線不平等現(xiàn)象。簡單的解決方法是用較強的流動相沖洗。而且每次分析某一產(chǎn)品完成后沖洗。如果分析時使用緩沖劑﹐可以用水來取代緩沖劑。先使用有機和水的混合溶液為流動相沖洗緩沖劑。接著再用100%有機溶劑沖洗。如果直接用100%有機溶劑沖洗的話,緩沖劑很可能會沉淀出來,而損壞色譜柱的品質(zhì)。使用10-20倍柱體積的量來沖洗基本就足夠了。可以將100%有機溶劑沖洗的條件加在分析實驗程序完畢后,如此一來每天在開機前都會用100%機溶劑沖洗。一般硅膠柱可以反沖洗處理﹐即是在將沖洗前將色譜柱倒反接后再沖洗。打算使用反沖洗處理前,先參考色譜柱的保養(yǎng)說明書。所以要真正保護色譜柱,使柱子的壽命延長,是使用”保護柱”和定期沖洗色譜柱
吸附的主要原因
反相硅膠柱填充介質(zhì)(固定相)與樣品間常常會發(fā)生下列吸附現(xiàn)象:
(1) 殘存硅醇基與堿性物質(zhì)間的離子吸附;
(2) 硅膠表面的金屬雜質(zhì)與金屬配位物質(zhì)間的吸附;
(3) 疏水性極強的物質(zhì)在柱中的蓄積。以上現(xiàn)象,會引起反相色譜柱柱效下降、拖尾、重復(fù)性不良等狀況的發(fā)生
安捷倫色譜柱
色譜柱清洗方法
1、疏水性物質(zhì)的去除:使用有機溶劑(乙腈、甲醇、乙腈與THF的混合溶劑)進行清洗。 考慮樣品成分對于有機溶劑的溶解性,選用比淋洗液濃度高的有機溶劑、或選用極性較低的有機溶劑進行過柱清洗。這種情況下,有必要注意淋洗液中鹽的析出現(xiàn)象。
2、堿性物質(zhì)(金屬配位物質(zhì))的去除:使用酸性水溶液與有機溶劑的混合液(0.1%磷酸、0.1%TFA/乙腈、甲醇的混合液)進行過柱清洗。
*一般來說,清洗時間可選擇為過柱5-10個柱體積便可。
在附吸成分其吸附力極強時,即使進行過清洗,柱性能也有可能得
不到恢復(fù)。另外,請充分考慮淋洗液的pH值,以避免損壞色譜柱。
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