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液相色譜流動相的貯存方法 液相色譜操作規(guī)程

時間:2020-06-20    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導(dǎo)讀】液相色譜流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內(nèi),不能貯存在塑料容器中。因為許多有機(jī)溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑劑,導(dǎo)致溶劑被污染。被污染



    液相色譜流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內(nèi),不能貯存在塑料容器中。因為許多有機(jī)溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料中的增塑劑,導(dǎo)致溶劑被污染。被污染的溶劑如用于液相色譜系統(tǒng),可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴(yán),防止溶劑揮發(fā)引起組成的變化,同時防止空氣中的氧和二氧化碳溶入流動相中。
    磷酸鹽、乙酸鹽緩沖液極易長霉,應(yīng)盡量新鮮配制使用。如需貯存,可至于冰箱內(nèi)冷藏,并且一般不要超過3天。
    鹵代溶劑中可能含有微量的酸性雜質(zhì),能與液相色譜儀系統(tǒng)中的不銹鋼反應(yīng)。鹵代溶劑與水的混合物比較容易分解,不能存放太久。鹵代溶劑混合后,可能會反應(yīng)生成一些對不銹鋼有較大腐蝕性的化合物。因此,盡量不采用鹵代溶劑的混合流動相,或者使用之前新鮮配制。
    此外,鹵代溶劑與一些反應(yīng)性有機(jī)溶劑(如乙腈)混合靜置時,還可能產(chǎn)生結(jié)晶。
    貯液器是裝預(yù)混合流動相或流動相組分的容器,構(gòu)造相對簡單,但用于不合適的貯液器也可能帶來問題。貯液器被污染了可能阻塞燒結(jié)不銹鋼過濾片,影響液相色譜儀泵性能,在色譜圖種出現(xiàn)多余的峰或者產(chǎn)生噪聲。
    貯液器的容積一般為1L,有的貯液器僅能用于沖氦氣,而不能用于真空脫氣,因為有破裂的危險。用于真空脫氣的貯液器要加厚或者加外套。自備的貯液器要松松地蓋上蓋子,以擋灰塵。蓋得太緊會形成部分真空,使泵停止運(yùn)轉(zhuǎn)。





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液相色譜填料的粒度選擇

  現(xiàn)代高效液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,首先必須對此有一定的認(rèn)識和了解。

  液相色譜填料可以是陶瓷性質(zhì)的無機(jī)物基質(zhì),也可以是有機(jī)聚合物基質(zhì)。液相色譜填料中的有機(jī)物基質(zhì)主要是硅膠和氧化鋁。無機(jī)物基質(zhì)剛性大,在溶劑中不容易膨脹。

  液相色譜填料中有機(jī)聚合物基質(zhì)主要有交聯(lián)苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有機(jī)聚合物基質(zhì)剛性小、易壓縮,溶劑或溶質(zhì)容易滲入有機(jī)基質(zhì)中,導(dǎo)致填料顆粒膨脹,結(jié)果減少傳質(zhì),最終使柱效降低。

  液相色譜填料的粒度選擇

  液相色譜填料的粒度主要影響填充柱的兩個參數(shù),即柱效和背壓。粒度越小,填充柱的柱效越高;然而粒度越小,柱壓越大,柱壓的增加限制了粒度小于3μm的填料應(yīng)用。在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是唯一的因素。如果固定相選擇是正確,但是分離度不夠,那么選用更小粒度的填料是很有用的。3μm填料填充柱的柱效比相同條件下的5μm填料的柱效提高近30%;然而,3μm的色譜柱的背壓卻是5μm的2倍。與此同時,柱效提高意味著在相同條件下可以選用更短的色譜柱,以縮短分析時間。另外,可以采用低粘度的溶劑做流動相或增加色譜柱的使用溫度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色譜柱的壓力。

標(biāo)簽: 液相色譜
液相色譜 液相色譜填料的粒度選擇_液相色譜 【導(dǎo)讀】液相色譜儀是一種常見的色譜分析方法,與氣相色譜相比液相色譜可以在常溫中操作,且不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制。 這使得液相色譜非常適合相對分子量較大,



    液相色譜儀是一種常見的色譜分析方法,與氣相色譜相比液相色譜可以在常溫中操作,且不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制。


    這使得液相色譜非常適合相對分子量較大,難汽化;


    不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì)、離子型化合物和高聚物的分離分析。


    然而要選購一臺品質(zhì)優(yōu)良的液相色譜并不容易。


    液相色譜儀的指標(biāo)很多,有關(guān)于泵的、關(guān)于檢測器的、關(guān)于色譜柱的……不過,從選購角度考慮;


    可以優(yōu)先考慮噪音、漂移、最小檢測濃度、定性定量重復(fù)性等主要技術(shù)指標(biāo)。


    當(dāng)然,這些指標(biāo)都要放在系統(tǒng)、回路里去看去比較。


    1.噪音


    噪音指由儀器的電器元件、溫度波動、電壓的線性脈沖以及其他非溶質(zhì)作用產(chǎn)生的高頻噪聲和基線的無規(guī)則波動產(chǎn)生的聲音。


    噪音的大小直接關(guān)系到儀器的檢測靈敏度,噪音越大檢測的靈敏度就越低。


    對于檢測低含量的樣品就要求儀器的噪音越小越好,否則噪音過大將會導(dǎo)致基線不穩(wěn),甚至影響分析結(jié)果;


    2.最小檢測濃度(最小檢測限)


    最小檢測濃度是反映儀器靈敏度的重要參數(shù)。


    根據(jù)公式CL=2×Nd×C/H(CL:最小檢測濃度Nd:噪音C:樣品濃度最小檢測濃度H:樣品峰高);


    最小檢測濃度是和噪音成正比的,噪音越大,最小檢測濃度就越大,靈敏度就越低。


    如果選購的儀器回避了這個指標(biāo),說明他們不愿在最小檢測濃度的基礎(chǔ)上去比較噪音;


    3.漂移


    漂移是指儀器穩(wěn)定后一段時間內(nèi)基線漂離原點的距離,通常用來衡量儀器穩(wěn)定快慢。


    高品質(zhì)的儀器能在較短的時間內(nèi)達(dá)到穩(wěn)定,從而在一定程度上提高分析效率;


    4.定性定量重復(fù)性


    主要是考核儀器穩(wěn)定性的指標(biāo),這對于分析樣品來說是非常重要的。


    好的儀器其穩(wěn)定性應(yīng)該是十分不錯的,這就要求多次進(jìn)樣保留時間及含量的一致性,這樣做出來的結(jié)果才能使人信服。


    雖然這些指標(biāo)都屬于檢測器,但是就像前面所說的,條件是要放在整個回路和系統(tǒng)里去看去比較。


    例如:泵的脈動會直接影響噪音指標(biāo)、泵的流量準(zhǔn)確度指標(biāo),以及密封性不好也會影響相關(guān)指標(biāo)。


    所以要系統(tǒng)地看指標(biāo)才可以反應(yīng)出儀器的一些真實水平。





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