1、防止任何固體微粒進(jìn)入泵體,因?yàn)閴m?;蚱渌魏坞s質(zhì)微粒都會(huì)磨損柱塞、密封環(huán)、缸體和單向閥,因此應(yīng)預(yù)先除去流動(dòng)相中的任何固體微粒。流動(dòng)相可以在玻璃容器內(nèi)蒸餾,而常用的方法是濾過(guò),可采用Millipore濾膜(0.2?m或0.45?m)等濾器。泵的入口都應(yīng)連接砂濾棒(或片)。輸液泵的濾器應(yīng)經(jīng)常清洗或更換。
2、泵工作時(shí)要留心防止溶劑瓶?jī)?nèi)的流動(dòng)相被用完,否則空泵運(yùn)轉(zhuǎn)也會(huì)磨損柱塞、缸體或密封環(huán),最終產(chǎn)生漏液。
3、輸液泵的工作壓力決不要超過(guò)規(guī)定的最高壓力,否則會(huì)使高壓密封環(huán)變形,產(chǎn)生漏液。
Series1500恒流泵專為分析或小型制備色譜應(yīng)用而設(shè)計(jì)。專利的雙柱塞設(shè)計(jì)和低死體積的隔膜貯能式脈沖阻尼器的使用消除了泵的脈沖波動(dòng),可滿足廣泛的分析應(yīng)用,具有無(wú)可比擬的性能??煞€(wěn)定提供0.001到12.0mL/min的流速。
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安捷倫液相色譜儀的維修與保養(yǎng)
1、安捷倫液相色譜儀用不同批號(hào)的色譜柱后如何對(duì)分析方法進(jìn)行測(cè)試并確認(rèn)可用此柱?
首先,在色譜柱包裝盒的外面找到它的批號(hào)。批號(hào)的字體比較小,通常在條形碼的下面。批號(hào)通常以字母“B”開(kāi)頭,后面是 5 位阿拉伯?dāng)?shù)字。例如,下面示例中的色譜柱批號(hào)為 B99091。 如果找不到包裝盒,則查看色譜柱標(biāo)簽上的序列號(hào)。要從序列號(hào)來(lái)確定批號(hào),請(qǐng)安捷倫科技公司 HPLC 色譜柱的。他們會(huì)請(qǐng)公司生產(chǎn)部門(mén)來(lái)查詢批號(hào),同時(shí)確定其它哪些批號(hào)的色譜柱可用。 獲得所需的批號(hào)或知道您的批號(hào)后,可使用以下步驟進(jìn)行訂購(gòu): 從安捷倫科技公司。使用特殊的部件號(hào) 899999-888, 該號(hào)碼表示此訂單是專用色譜柱。 說(shuō)明要訂購(gòu)的色譜柱的類型、尺寸和填料粒度大小,包括通用部件號(hào)。指出您希望色譜柱是哪個(gè)批號(hào),或者哪個(gè)批號(hào)的色譜柱不能用。示例說(shuō)明: 部件號(hào) 899999-888 Eclipse XDB-C18 分析色譜柱,4.6mm x 250mm,(963967-902) 除了批號(hào)為 B99091 和 B99079 的專用色譜柱 用于方法確認(rèn)目的的色譜柱
2、安捷倫液相色譜儀-如何避免峰拖尾和峰分叉?
與色譜柱相關(guān)的原因及處理方法
1 色譜柱污染; 處理方法:清洗或更換色譜柱
2色譜柱填料有問(wèn)題;處理方法:反沖色譜柱或更換柱頭過(guò)濾片
3 色譜柱中間出現(xiàn)間斷;處理方法:更換色譜柱或填充空隙
4 保護(hù)柱失效;處理方法:更換保護(hù)柱
5 樣品分布差;處理方法:改進(jìn)色譜柱進(jìn)口的設(shè)計(jì)
6 與色譜柱無(wú)關(guān)的原因:柱外體積大、樣品過(guò)量、流動(dòng)相組分(添加劑、pH值、緩沖液濃度)改變。
3、什么原因?qū)е掳步輦愐合嗌V儀出現(xiàn)神秘峰”?
與色譜柱相關(guān)的原因:
1 色譜柱污染; 處理方法:清洗或更換色譜柱
2 保護(hù)柱失效; 處理方法:更換保護(hù)柱
3 與色譜柱無(wú)關(guān)的原因:流動(dòng)相溶不純、樣品里有其他成分、系統(tǒng)里有氣泡、電路問(wèn)題。
更多關(guān)于安捷倫液相色譜儀與色譜柱的產(chǎn)品相關(guān)信息,可訪問(wèn)我公司或致電銷售工程師。
怎樣選擇色譜柱
現(xiàn)代高效液相色譜中,分離效果好壞很大程度上取決于色譜填料的選擇。但是色譜填料的選擇范圍很寬,要做合適的選擇,必須對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。
1、正相色譜
正相色譜用的固定相通常為硅膠(Silica),以及其他具有極性官能團(tuán),如胺基團(tuán)(NH2,APS)和氰基團(tuán)(CN,CPS)的鍵合相填料。
由于硅膠表面的硅羥基(SiOH)或其他團(tuán)的極性較強(qiáng),因此,分離的次序是依據(jù)樣品中的各組份的極性大小,即極性強(qiáng)弱的組份最先被沖洗出色譜柱。
正相色譜使用的流動(dòng)相極性相對(duì)比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯仿
(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
2、反相色譜
反相色譜填料常是以硅膠為基礎(chǔ),表面鍵合有極性相對(duì)較弱的官能團(tuán)的鍵合相。反相色譜所使用的流動(dòng)相極性較強(qiáng),通常為水,緩沖液與甲醇,已腈等混合物。樣品流出色譜柱的順序是極性較強(qiáng)組合最先被沖出,而極性弱的組份會(huì)在色譜柱上有更強(qiáng)的保留。常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
二、聚合物填料
聚合物調(diào)料多為聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要優(yōu)點(diǎn)是在PH值為1~14均可使用。
相對(duì)與硅膠基質(zhì)的C18填料,這類填料具有更強(qiáng)的疏水性;大孔的聚合物填料對(duì)蛋白質(zhì)等樣品的分離非常有效。
現(xiàn)在的聚合物填料的缺點(diǎn)是相對(duì)硅膠基質(zhì)填料,色譜柱柱效較低。
三、其他無(wú)機(jī)填料
其它HPLC的無(wú)機(jī)填料色譜柱也已經(jīng)商品化。由于其特殊的性質(zhì),一般僅限于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐漸成為反相色譜填料。這種填料的分離不同與硅膠基質(zhì)烷基鍵合相,石墨化碳的表面即是保留的基礎(chǔ),不再需其它的表面改性,該柱填料一般比烷基鍵合硅膠或多孔聚合物填料的保留能力更強(qiáng),石墨化碳可用于分離某些幾何導(dǎo)構(gòu)體,又由于流動(dòng)相中不會(huì)被溶解,這類柱可在任何PH與溫度下使用。氧化鋁也可用于HPLC,氧化鋁微粒剛性強(qiáng),可制成穩(wěn)定的色譜柱柱床,其優(yōu)點(diǎn)是可在PH高達(dá)12的流動(dòng)相中使用。但由于氧化鋁與堿性化合物作用也很強(qiáng),應(yīng)用范圍受到一定的限制,所以未能廣泛應(yīng)用,新型氧化鋯填料也可用于HPLC,商品化的僅有聚合物涂層的多孔氧化鋯微球色譜柱,應(yīng)用PH范1~14,溫度可達(dá)100℃。由于氧化鋯填料幾年才開(kāi)始研究,加之面臨的實(shí)驗(yàn)難度,其重要用途與優(yōu)勢(shì)尚在進(jìn)行中。
怎樣選擇填料粒度
目前,商品化的色譜料粒度從1um到超過(guò)30um均有銷售,而目前分析分離主要用3um、5um和10um填料,填料的粒度主要影響填充柱的兩個(gè)參數(shù),即柱效和背壓。粒度越小,填充柱的柱效越高;小于3um的填料應(yīng)用,在相同選擇性條件下,提高柱效可提高分離度,但不是唯一的因素。如果固定相選擇是正確,但是分離度不夠,那么選擇更小粒度的填料
是很有用的,3um填料填充柱的柱數(shù)比相同條件下的5um填料的柱效提高近30%;然而,3um的色相譜的背壓卻是5um的2倍。與此同時(shí),柱效提高意味著在相同條件下可以選擇更短的色譜柱,以縮短分析時(shí)間,另外,可以采用低粘度的溶劑做流動(dòng)相或增加色譜柱的使用溫度,比如用乙腈代替甲醇,以降低色譜柱的壓力。