高效液相色譜法（HPLC：High Performance Liquid Chromatography ）是70年代迅速發(fā)展起來的一種分離分析技術(shù)，是目前各種色譜模式中應(yīng)用廣泛的一個領(lǐng)域，據(jù)估計，世界上幾百萬種化合物中除20%宜用其相色譜分離分析外，其余80%的化合物，包括大分子化合物、熱不穩(wěn)定化合物以及有生物活性的化合物都可以用不同模式的HPLC進行分離分析。
?自80年代以來，HPLC以成為國際分析化學(xué)界發(fā)展較快的一個分支。隨著高效液相色譜設(shè)備的不斷更新?lián)Q代，功能和分析手段的逐漸增加，高效液相色譜儀在生物化學(xué)、生物工程、醫(yī)藥研究、食品分析等各個領(lǐng)域中被廣泛應(yīng)用；是分析化學(xué)家、生物化學(xué)家等用以解決他們面臨的各種實際分離分析課題必不可缺少的工具。高效液相具有簡便、快速、分辨率高、檢測限低、重復(fù)性好，定量精度高等特點的同時，還必將會在提高檢測質(zhì)量和速度上有更大的發(fā)展前景。
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高效液相色譜儀是實驗中常見的儀器之一，色譜柱的靈敏度是確保實驗準(zhǔn)確性的重要原因，那么當(dāng)色譜柱的靈敏度不夠時，我們該如何去解決呢？應(yīng)該從以下幾個方面去分析：
1、樣品量不足：解決辦法為增加樣品量
2、樣品未從柱子中流出：可根據(jù)樣品的化學(xué)性質(zhì)改變流動相或柱子
3、樣品與檢測器不匹配：根據(jù)樣品化學(xué)性質(zhì)調(diào)整波長或改換檢測器
4、檢測器衰減太多：調(diào)整衰減即可。
5、檢測器時間常數(shù)太大：解決辦法為降低時間參數(shù)
6、檢測器池窗污染：解決辦法為清洗池窗。
7、檢測池中有氣泡：解決辦法為排氣。
8、記錄儀測壓范圍不當(dāng)：調(diào)整電壓范圍即可。
9、流動相流量不合適：調(diào)整流速即可。
10、檢測器與記錄儀超出校正曲線：解決辦法為檢查記錄儀與檢測器，重作校正曲線。
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