一．壓 力 異 常
操作壓力的變化往往是故障的征兆。從下表中找出所觀察到的現(xiàn)象，并在右側(cè)的列表中參考相應(yīng)的解決方法。
A、 沒有壓力顯示，沒有流動相流動
原 因 解決方法
1、電源問題 1、接通電源，開機(jī)
2、保險絲被燒壞 2、更換保險絲
3、控制器設(shè)定不正確或設(shè)定失敗 3、a、采取恰當(dāng)?shù)脑O(shè)定 b、修理或更換控制器
4、柱塞桿折斷 4、更換柱塞桿
5、泵頭內(nèi)有空氣 5、溶劑脫氣、啟動泵抽出空氣
6、流動相不足 6、a、補(bǔ)充流動相 b、更換入口濾頭
7、單向閥損壞 7、更換單向閥
8、漏液 8、擰緊或更換手緊接頭
B、 流動相流動正常，但沒有壓力顯示
原 因 解決方法
1、儀表損壞 1、更換儀表
2、壓力傳感器損壞 2、更換壓力傳感器
C、 壓力持續(xù)偏高
原 因 解決方法
1、流速設(shè)定過高 1、調(diào)整流速設(shè)定
2、柱前篩板堵塞 2、a、在允許情況下反沖色譜柱 b、更換篩板 c、更換色譜柱
3、流動相使用不當(dāng)或緩沖鹽的結(jié)晶沉淀 3、a、使用恰當(dāng)?shù)牧鲃酉?b、沖洗色譜柱
4、色譜柱選擇不當(dāng) 4、選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱
5、進(jìn)樣閥損壞 5、清洗或更換進(jìn)樣閥
6、柱溫過低 6、提高溫度
7、控制器失常 7、修理或更換控制器
8、保護(hù)柱阻塞 8、清洗或更換保護(hù)柱
9、在線過濾器阻塞 9、清洗或更換在線過濾器
D、 壓力持續(xù)偏低
原 因 解決方法
1、流速設(shè)定過低 1、調(diào)整流速
2、系統(tǒng)漏液 2、確定漏液位置并維修
3、色譜柱選擇不當(dāng) 3、選擇恰當(dāng)?shù)纳V柱
4、柱溫過高 4、降低溫度
5、控制器失常 5、維修或更換控制器
E、 壓力不斷上升
原 因 解決方法
1、見列表C 1、見列表C
F、 壓力降為零
原 因 解決方法
1、見列表A、B 1、見列表A、B
G、 壓力不斷下降，但不回零
原 因 解決方法
1、見列表D 1、見列表D
H、 壓力波動
原 因 解決方法
1、泵中有氣體 1、a、溶劑脫氣 b、從泵中除去氣體
2、單向閥損壞 2、更換單向閥
3、泵密封損壞 3、更換泵密封
4、脫氣不充分 4、a、溶劑脫氣 b、改變脫氣方法（使用在線脫氣法等）
5、系統(tǒng)漏液 5、確定漏液位置并維修
6、使用梯度洗脫 6、由于流動相粘度的變化引起的壓力波動

二．漏液的問題通?？梢酝ㄟ^擰緊或更換管路接頭來解決漏液的問題。但值得注意的是過份擰緊會導(dǎo)致金屬接頭的漏液和塑料接頭的磨損。如果通過稍微擰緊接頭不能解決漏液的問題，就必須將接頭取下，檢查是否損壞（例如，卡套損壞、密封表面有雜質(zhì)）；損壞的接頭應(yīng)該更換掉。A、 接頭處漏液原 因 解決方法
1、接頭松動 1、擰緊
2、接頭磨損 2、更換
3、接頭過緊 3、a、擰松，再重新擰緊 b、更換
4、接頭被污染 4、a、拆下清洗 b、更換
5、部件不匹配 5、使用同一品牌的配件
B、 泵漏液原 因 解決方法
1、單向閥松動 1、a、擰緊單向閥（不必擰的過緊） b、更換單向閥
2、接頭松動 2、擰緊接頭（不必擰的過緊）
3、混合器密封損壞 3、a、更換混合器密封 b、更換混合器
4、泵密封損壞 4、維修或更換泵密封件
5、壓力傳感器損壞 5、維修或更換壓力傳感器
6、脈沖阻尼器損壞 6、更換脈沖阻尼器
7、比例閥損壞 7、a、檢查隔膜，如果漏液立即更換 b、檢查手緊接頭，損壞的立即更換
8、放空閥的損壞 8、a、擰緊放空閥 b、更換放空閥
C、 進(jìn)樣閥漏液原 因 解決方法
1、轉(zhuǎn)子密封損壞 1、重新安裝或更換進(jìn)樣閥
2、定量環(huán)阻塞 2、更換定量環(huán)
3、進(jìn)樣口密封松動 3、調(diào)整
4、進(jìn)樣針頭尺寸不合適 4、使用恰當(dāng)?shù)倪M(jìn)樣針
5、廢液管中產(chǎn)生虹吸 5、保持廢液管高于廢液液面
6、廢液管阻塞 6、更換或疏通廢液管
D、 色譜柱漏液原 因 解決方法
1、尾端接頭松動 1、擰緊接頭
2、卡套內(nèi)有填料 2、拆下、清洗卡套、重新安裝
3、篩板厚度不合適 3、使用合適的篩板（參考下表）
篩板選擇指導(dǎo)物質(zhì)粒徑 篩板孔徑
3-4u 0.5u
5-20u 2u
E、 檢測器漏液原 因 解決方法
1、流通池墊片損壞 1、a、避免過大的背景壓力（壓力降） b、更換墊片
2、流通池窗破碎 2、更換窗口
3、手緊接頭漏液 3、擰緊或更換
4、廢液管阻塞 4、更換廢液管
5、流通池阻塞 5、重新安裝或更換
三.譜圖的各種問題
液相色譜系統(tǒng)的許多問題都能在譜圖上反映出來。其中有一些問題可以通過改變設(shè)備參數(shù)得到解決；而其他的問題必須通過修改操作程序來解決。對于色譜柱和流動相的正確選擇是得到好的色譜圖的關(guān)鍵。
A、 峰拖尾
原 因 解決方法
1、篩板阻塞 1、a、反沖色譜柱 b、更換進(jìn)口篩板 c、更換色譜柱
2、色譜柱塌陷 2、填充色譜柱
3、干擾峰 3、a、使用更長的色譜柱 b、改變流動相或更換色譜柱
4、流動相PH選擇錯誤 4、調(diào)整PH值。對于堿性化合物，低PH值更有利于得到對稱峰
5、樣品與填料表面的溶化點發(fā)生反應(yīng)圖 5、a、加入離子對試劑或堿性揮發(fā)性修飾劑 b、更改色譜柱
B、 峰前延
原 因 解決方法
1、柱溫低 1、升高柱溫
2、樣品溶劑選擇不恰當(dāng) 2、使用流動相作為樣品溶劑
3、樣品過載 3、降低樣品含量
4、色譜柱損壞 4、見A1、A2
C、 峰分叉
原 因 解決方法
1、 保護(hù)柱或分析柱污染圖 1、取下保護(hù)柱再進(jìn)行分析。如果必要更換保護(hù)柱。如果分析柱阻塞，拆下來清洗。如果問題仍然存在，可能是柱子被強(qiáng)保留物質(zhì)污染，運用適當(dāng)?shù)脑偕胧?。如果問題仍然存在，入口可能被阻塞，更換篩板或更換色譜柱。
2、樣品溶劑不溶于流動相 2、改變樣品溶劑。如果可能采取流動相作為樣品溶劑。
D、 峰變形
原 因 解決方法
1、樣品過載 1、減少樣品載量
E、 早出的峰變形
原 因 解決方法
1、樣品溶劑選擇不恰當(dāng) 1、a、減少進(jìn)樣體積 b、運用低極性樣品溶劑
F、 早出的峰拖尾程度大于晚出的峰
原 因 解決方法
1、柱外效應(yīng) 1、a、調(diào)整系統(tǒng)連接（使用更短、內(nèi)徑更小的管路） b、使用小體積的流通池
G、 K’增加時，脫尾更嚴(yán)重
原 因 解決方法
1、二級保留效應(yīng)，反相模式 1、a、加入三乙胺（或堿性樣品） b、加入乙酸（或酸性樣品） c、加入鹽或緩沖劑（或離子化樣品） d、更換一支柱子
2、二級保留效應(yīng)，正相模式 2、a、加入三乙胺（或堿性樣品） b、加入乙酸（或酸性樣品） c、加入水（或多官能團(tuán)化合物） d、試用另一種方法
3、二級保留效應(yīng)，離子對 3、加入三乙胺（或堿性樣品）
H、 酸性或堿性化合物的峰拖尾
原 因 解決方法
1、緩沖不合適 1、a、使用濃度50-100mM的緩沖液 b、使用Pka等于流動相PH值的緩沖液
I、 額外的峰
原 因 解決方法
1、樣品中有其他組份 1、正常
2、前一次進(jìn)樣的洗脫峰 2、a、增加運行時間或梯度斜率 b、提高流速
3、空位或鬼峰 3、a、檢查流動相是否純凈 b、使用流動相作為樣品溶劑 c、減少進(jìn)樣體積
J、 保留時間波動
原 因 解決方法
1、溫控不當(dāng) 1、調(diào)好柱溫
2、流動相組分變化 2、防止變化（蒸發(fā)、反應(yīng)等）
3、色譜柱沒有平衡 3、在每一次運行之前給予足夠的時間平衡色譜柱
K、 保留時間不斷變化
原 因 解決方法
1、流速變化 1、重新設(shè)定流速
2、泵中有氣泡 2、從泵中除去氣泡
3、流動相選擇不恰當(dāng) 3、a、更換合適的流動相 b、選擇合適的混合流動相
L、 基線漂移
原 因 解決方法
1、柱溫波動。（即使是很小的溫度變化都會引起基線的波動。通常影響示差檢測器、電導(dǎo)檢測器、較低靈敏度的紫外檢測器或其它光電類檢測器。） 1、控制好柱子和流動相的溫度，在檢測器之前使用熱交換器圖
2、流動相不均勻。（流動相條件變化引起的基線漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移。） 2、使用HPLC級的溶劑，高純度的鹽和添加劑。流動相在使用前進(jìn)行脫氣，使用中使用氦氣。
3、流通池被污染或有氣體 3、用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸。（不要用鹽酸）
4、檢測器出口阻塞。（高壓造成流通池窗口破裂，產(chǎn)生噪音基線） 4、取出阻塞物或更換管子。參考檢測器手冊更換流通池窗。
5、流動相配比不當(dāng)或流速變化 5、更改配比或流速。為避免這個問題可定期檢查流動相組成及流速。
6、柱平衡慢，特別是流動相發(fā)生變化時 6、用中等強(qiáng)度的溶劑進(jìn)行沖洗，更改流動相時，在分析前用10-20倍體積的新流動相對柱子進(jìn)行沖洗。
7、流動相污染、變質(zhì)或由低品質(zhì)溶劑配成 7、檢查流動相的組成。使用高品質(zhì)的化學(xué)試劑及HPLC級的溶劑
8、樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)（高K’值）以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個逐步升高的基線。 8、使用保護(hù)柱，如有必要，在進(jìn)樣之間或在分析過程中，定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。
9、使用循環(huán)溶劑，但檢測器未調(diào)整。 9、重新設(shè)定基線。當(dāng)檢測器動力學(xué)范圍發(fā)生變化時，使用新的流動相。
10、檢測器沒有設(shè)定在最大吸收波長處。 10、將波長調(diào)整至最大吸收波長處
M、 基線噪音（規(guī)則的）
原 因 解決方法
1、在流動相、檢測器或泵中有空氣 1、流動相脫氣。沖洗系統(tǒng)以除去檢測器或泵中的空氣。
2、漏液圖 2、見第三部分。檢查管路接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換泵密封。
3、流動相混合不完全 3、用手搖動使混合均勻或使用低粘度的溶劑
4、溫度影響（柱溫過高，檢測器未加熱） 4、減少差異或加上熱交換器
5、在同一條線上有其他電子設(shè)備 5、斷開LC、檢測器和記錄儀，檢查干擾是否來自于外部，加以更正。
6、泵振動 6、在系統(tǒng)中加入脈沖阻尼器
N、 基線噪音（不規(guī)則的）
原 因 解決方法
1、 漏液圖 1、見第三部分。檢查接頭是否松動，泵是否漏液，是否有鹽析出和不正常的噪音。如有必要，更換密封。檢查流通池是否漏液。
2、流動相污染、變質(zhì)或由低質(zhì)溶劑配成 2、檢查流動相的組成。
3、流動相各溶劑不相溶 3、選擇互溶的流動相
4、檢測器/記錄儀電子元件的問題 4、斷開檢測器和記錄儀的電源，檢查并更正。
5、系統(tǒng)內(nèi)有氣泡 5、用

色譜儀檢定的特點
檢定時間長
檢定一臺色譜儀一般需要3-5個小時，時間較長。色譜儀在運行前首先要進(jìn)行1-2小時的預(yù)熱，否則儀器的基線難以穩(wěn)定。另外在在檢定過程中，基線和重復(fù)性的檢定也都需要較長的時間。
儀器型號繁多、操作復(fù)雜
色譜儀在運行前，需要更換色譜柱、流動相，啟動泵和檢測器，并對衰減、流速、紙速等進(jìn)行設(shè)置，所以操作比較復(fù)雜。另外，色譜儀的型號比較多，各種型號色譜儀的操作界面都不盡相同，尤其是計算機(jī)工作站的引入，使得各種型號色譜儀的操作差別更大。
維修困難
色譜儀的內(nèi)部電路非常復(fù)雜，而且零部件的更換必須使用相應(yīng)廠家生產(chǎn)的配套產(chǎn)品，因而維修比較困難。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是主要的計量裝置 不論是氣相色譜儀，還是液相色譜儀，基線噪聲、基線漂移、最小檢測濃度都是三個重要的指標(biāo)，而對它們的檢定只需使用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)即可進(jìn)行
分布不均衡
色譜儀檢定的方法
1、液相色譜儀
實驗室液相色譜儀是由輸液系統(tǒng)、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器和數(shù)據(jù)記錄處理裝置等幾部分組成的分析儀器。圖3是典型的液相色譜儀組成方框圖。它利用樣品中各組分在色譜柱中固定相和流動相間分配系數(shù)或吸附系數(shù)的差異，將各組分分離后進(jìn)行檢測，并根據(jù)各組分的保留時間和響應(yīng)值進(jìn)行定性、定量分析。
主要檢定項目：
泵流量設(shè)定值誤差SS、流量穩(wěn)定性誤差
檢定輸液系統(tǒng)
定性、定量重復(fù)性
最小檢測濃度、基線噪聲、基線漂移
關(guān)于最小檢測濃度的檢定，規(guī)程規(guī)定“在靜態(tài)條件下，用注射器注入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)”然后用最小檢測限公式計算，得出結(jié)論（所謂靜態(tài)條件，即在不開泵的情況下，把樣品直接注入樣品池）。但由于近年來液相色譜儀結(jié)構(gòu)設(shè)計有了較大的改變，尤其是計算機(jī)工作站的引入，使它的超作方式更為簡化。因而，原來規(guī)程所規(guī)定的檢測方法已不在適用。對于它的檢定應(yīng)在動態(tài)條件下（即正常的開機(jī)進(jìn)樣情況），注入20ΜL標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，然后用最小檢測限公式進(jìn)行計算。若儀器的進(jìn)樣筏小于20ΜL應(yīng)把測得的峰高換算成20ΜL時的峰高（20ΜL/進(jìn)樣筏容量*所測峰高）。以上測量方法與即將出版的液相色譜儀新檢定規(guī)程上的方法是相同的。
至于基線噪聲和基線漂移按照規(guī)程所規(guī)定的條件對儀器進(jìn)行設(shè)定后，使儀器空走半小時即可在色譜圖中讀出。單位AU是一個紫外吸收的單位，一般它與單位MV是相對應(yīng)的，如果儀器色譜圖上顯示的單位是MV，可以通過查找儀器說明書找到換算關(guān)系。
檢定原理：依據(jù)JJG705-90《實驗室液相色譜儀計量檢定規(guī)程》。
檢定周期：兩年
2、氣相色譜儀
氣相色譜儀是根據(jù)試樣中各組分在氣固或氣液兩相間的吸附或分配系數(shù)的不同隨載氣移動而進(jìn)行分離的儀器。分離后的組分按保留時間的先后順序進(jìn)入檢測器，并自動記錄檢測信號，依據(jù)組分的保留時間和響應(yīng)值進(jìn)行定性、定量分析。氣相色譜儀由氣源、氣路控制系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、色譜柱、檢測器、電氣系統(tǒng)、記錄及處理系統(tǒng)組成。
主要檢定項目：載氣流速穩(wěn)定性、柱箱溫度穩(wěn)定性、基線噪聲、基線漂移、靈敏度、檢測限
檢定原理：依據(jù)JJG700-1999《氣相色譜儀計量檢定規(guī)程》。
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