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液相色譜儀的應(yīng)用 液相色譜如何操作

時(shí)間:2020-06-28    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導(dǎo)讀】液相色譜儀是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對(duì)混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。 基本介紹 液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是



    液相色譜儀是指利用混合物在液-固或不互溶的兩種液體之間分配比的差異,對(duì)混合物進(jìn)行先分離,而后分析鑒定的儀器。

 


    基本介紹


    液相色譜儀根據(jù)固定相是液體或是固體,又分為液-液色譜(LLC)及液-固色譜(LSC)。現(xiàn)代液相色譜儀由高壓輸液泵、進(jìn)樣系統(tǒng)、溫度控制系統(tǒng)、色譜柱、檢測(cè)器、信號(hào)記錄系統(tǒng)等部分組成。與經(jīng)典液相柱色譜裝置比較,具有高效、快速、靈敏等特點(diǎn)。


    液相色譜儀使用范圍


    應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)、環(huán)境化學(xué)、石油化工等部門(mén)。


    應(yīng)用范疇


    高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液,不受樣品揮發(fā)性的限制,流動(dòng)相可選擇的范圍寬,固定相的種類繁多,因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。


    與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合,HPLC所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度,使分離和同時(shí)測(cè)定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)成為可能,能夠分離復(fù)雜相體中的微量成分。隨著固定相的發(fā)展,有可能在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成其分離HPLC成為解決生化分析問(wèn)題比較為有前途的方法。


    由于HPLC具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用,流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn),因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無(wú)機(jī)分析等各種領(lǐng)域。


    高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。液相色譜-質(zhì)譜連用技術(shù)受到普遍重視,如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等;液相色譜-紅外光譜連用也發(fā)展很快如在環(huán)境污染分析測(cè)定水中的烴類,海水中的不揮發(fā)烴類,使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。





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相關(guān)熱詞:

等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,高效液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓滅菌器,集菌儀,接地電阻測(cè)試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場(chǎng)強(qiáng)儀萬(wàn)能材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。

【導(dǎo)讀】   高效液相色譜法的應(yīng)用遠(yuǎn)遠(yuǎn)廣于氣相色譜法。它廣泛用于合成化學(xué)、石油化學(xué)、生命科學(xué)、臨床化學(xué)、藥物研究、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品檢驗(yàn)及法學(xué)檢驗(yàn)等領(lǐng)域。   一. 在食品分析中的應(yīng)用   

  高效液相色譜法的應(yīng)用遠(yuǎn)遠(yuǎn)廣于氣相色譜法。它廣泛用于合成化學(xué)、石油化學(xué)、生命科學(xué)、臨床化學(xué)、藥物研究、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品檢驗(yàn)及法學(xué)檢驗(yàn)等領(lǐng)域。

  一. 在食品分析中的應(yīng)用

  1.食品營(yíng)養(yǎng)成分分析:蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、色素、維生素、香料、有機(jī)酸(鄰苯二甲酸、檸檬酸、蘋(píng)果酸等)、有機(jī)胺、礦物質(zhì)等;

  2.食品添加劑分析:甜味劑、防腐劑、著色劑(合成色素如檸檬黃、莧菜紅、靛藍(lán)、胭脂紅、日落黃、亮藍(lán)等)、抗氧化劑等;

  食品污染物分析:霉菌毒素(黃曲霉毒素、黃桿菌毒素、大腸桿菌毒素等)、微量元素、多環(huán)芳烴等。

  二. 在環(huán)境分析中的應(yīng)用

  多環(huán)芳烴(特別是稠環(huán)芳烴)、農(nóng)藥(如氨基甲酸脂類,反相色譜)殘留等。

  三. 在生命科學(xué)中的應(yīng)用

  HPLC技術(shù)目前已成為生物化學(xué)家和醫(yī)學(xué)家在分子水平上研究生命科學(xué)、遺傳工程、臨床化學(xué)、分子生物學(xué)等必不可少的工具。其在生化領(lǐng)域的應(yīng)用主要集中于兩個(gè)方面:

  1. 低分子量物質(zhì),如氨基酸、有機(jī)酸、有機(jī)胺、類固醇、卟啉、糖類、維生素等的分離和測(cè)定。

  2. 高分子量物質(zhì),如多肽、核糖核酸、蛋白質(zhì)和酶(各種胰島素、激素、細(xì)胞色素、干擾素等)的純化、分離和測(cè)定。

  過(guò)去對(duì)這些生物大分子的分離主要依賴于等速電泳、經(jīng)典離子交換色譜等技術(shù),但都有一定的局限性,遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足生物化學(xué)研究的需要。因?yàn)樵谏I(lǐng)域中經(jīng)常要求從復(fù)雜的混合物基質(zhì),如培養(yǎng)基、發(fā)酵液、體液、組織中對(duì)感性趣的物質(zhì)進(jìn)行有效而又特異的分離,通常要求檢測(cè)限達(dá)ng級(jí)或pg級(jí),或pmol,fmol,并要求重復(fù)性好、快速、自動(dòng)檢測(cè);制備分離、回收率高且不失活。在這些方面,HPLC具有明顯的優(yōu)勢(shì)。

  四. 在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用

  體液中代謝物測(cè)定;藥代動(dòng)力學(xué)研究;臨床藥物監(jiān)測(cè):

  1. 合成藥物:抗生素、抗憂郁藥物(冬眠靈、氯丙咪嗪、安定、利眠寧、****等)、黃胺類藥等。

  2. 天然藥物生物堿(吲哚堿、顛茄堿、**堿、強(qiáng)心甙)等

  五.在無(wú)機(jī)分析中的應(yīng)用

  陽(yáng)、陰離子的分析等。

  色譜柱是液相色譜中重要的一個(gè)組成部分。眾所周知,色譜是一種分離、分析手段,分離是其核心,而色譜柱擔(dān)負(fù)的就是其分離作用,可以說(shuō),色譜柱就是液相色譜儀的心臟。保護(hù)柱則是為了降低分析柱受污染程度,延長(zhǎng)分析柱使用壽命的重要組成部分。
 
  如何使用保護(hù)柱
 
  1、專柱專用,避免保護(hù)柱成為不同項(xiàng)目間的交叉污染源。
 
  2、及時(shí)更換保護(hù)柱。當(dāng)峰的理論塔板數(shù)下降15%,或是柱壓上升15%,或是關(guān)鍵分離度下降15%時(shí),都應(yīng)該及時(shí)更換保護(hù)柱。
 
  3、不慎發(fā)生強(qiáng)污染時(shí),可以將分析柱卸下,單獨(dú)沖洗保護(hù)柱,可以使污染物更快的從保護(hù)柱中流出。但是不可以超聲清洗保護(hù)柱,以免損傷柱芯。
 
  保護(hù)柱使用注意事項(xiàng):
 
  1、獨(dú)立式保護(hù)柱與分析柱連接時(shí),連接管路盡可能短,且接口切面平滑,盡量減少死體積以降低柱外展寬效應(yīng)。
 
  2、卡套式保護(hù)柱一般未標(biāo)注液流方向,使用時(shí)應(yīng)自行標(biāo)注,并按照標(biāo)注方向來(lái)使用,以免正反向使用后,截留的雜質(zhì)污染分析柱。
 
  3、直接填裝的短柱型保護(hù)柱,出現(xiàn)柱壓升高或峰型變差時(shí),可不接分析柱進(jìn)行反向清洗,清洗溶劑可參考分析柱清洗溶劑。
 
  4、卡套式保護(hù)柱,柱芯替換時(shí),注意柱芯與柱套是否存在方向上的匹配,同時(shí)不易旋擰過(guò)緊,以防滑絲。
 
  5、保護(hù)柱或柱芯一般不建議超聲清洗,因可能對(duì)填料表面修飾有影響。
 
  6、如同一保護(hù)柱配不同的分析柱使用,每次使用前,保護(hù)柱需先清洗并用流動(dòng)相平衡保護(hù)柱一段時(shí)間后,再接分析柱使用。
 
  使用保護(hù)柱的目的在于延長(zhǎng)分析柱的使用壽命,但選擇合適的保護(hù)柱更加重要,選擇或使用不當(dāng)也可能帶來(lái)截然相反的效果


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