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實驗室分光光度計的使用方法 光度計是如何工作的

時間:2020-06-29    來源:儀多多儀器網    作者:儀多多商城     
【導讀】實驗室分光光度計是利用分光光度法,通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析。不同種類的分光光度計的基本原理相似



    實驗室分光光度計是利用分光光度法,通過測定被測物質在特定波長處或一定波長范圍內光的吸收度,對該物質進行定性和定量分析。
    不同種類的分光光度計的基本原理相似,都是利用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源。光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,通過測量樣品的吸光值,經過計算可以轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
    分光光度計采用一個可以產生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
    實驗室分光光度計的使用方法
    ①首先接通電源,打開電源開關1,指示燈亮,打開比色皿暗箱蓋8,預熱20分鐘。②波長選擇旋鈕6,選擇所需的單色光波長,用靈敏度旋鈕2選擇所需的靈敏檔。
    ③放入比色皿,旋轉零位旋鈕5調零,將比色皿暗箱蓋合上,推進比色皿拉桿3,使參比比色皿處于空白校正位置,使光電管見光,旋轉透光率調節(jié)旋鈕4,使微安表9指針準確處于100%。按上述方法連續(xù)幾次調整零位和100%位,即可進行測定工作(儀器面板見圖5-6)。
    實驗室分光光度計使用和維護中應注意事項:
    ①連續(xù)使用儀器的時間不應超過2小時,可以是間歇0.5小時后,再繼續(xù)使用。
    ②比色皿每次使用完畢后,要用去離子水洗凈并倒置晾干后,存放在比色皿盒內。在日常使用中應注意保護比色皿的透光面,使其不受損壞或產生劃痕,以免影響透光率。
    ③儀器不能受潮。在日常使用中,應經常注意單色器上的防潮硅膠(在儀器的底部)是否變色,如硅膠的顏色已變紅,應立即取出烘干或更換。
    ④在托運或移動儀器時,應注意小心輕放。





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熒光分光光度計的發(fā)展經歷了手控式熒光分光光度計,自動記錄式熒光分光光度計,計算機控制式熒光分光光度計三個階段;熒光分光光度計還可分為單光束式熒光分光光度計和雙光束式熒光分光光度計兩大系列。其他的還有低溫激光Sh p ol’skill熒光分光光度計,配有壽命和相分辨測定的熒光分光光度計等。
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個角度反映了分子的成鍵和結構情況。通過對這些參數(shù)的測定, 不但可以做一般的定量分析, 而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構象變化, 從而闡明分子結構與功能之間的關系。熒光分光光度計的激發(fā)波長掃描范圍一般是190~650nm,發(fā)射波長掃描范圍是200~800nm??捎糜谝后w、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描。
熒光分光光度計的基本原理
由高壓汞燈或氙燈發(fā)出的紫外光和藍紫光經濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質發(fā)出熒光,熒光經過濾過和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來。
物質熒光的產生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài), 這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產生熒光.
在溶液中,當熒光物質的濃度較低時,其熒光強度與該物質的濃度通常有良好的正比關系,即IF=KC,利用這種關系可以進行熒光物質的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似,熒光分析通常也采用標準曲線法進行。
不同物質由于分子結構的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜;,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進行物質的鑒定。



    可見分光光度計(又名可見光度計、分光光度計)是可見光分光光度法是采用新型單片機技術,開發(fā)出能夠進行定量測量(標準曲線測量,可對物質進行濃度直讀);


    OD值直接測量(吸光度、透過率和能量等直讀);動力學測試(測出物質濃度隨時間變化OD值的變化);


    光譜掃描(可以對某一種物質進行全波段掃描,分析物質的特征波長,判斷實驗過程的誤差);


    多波長測試(可以對物質同時進行多個波長的測試,分析物質的相關特性);


    還有可以進行DNA蛋白質測試、總磷總氮測試、重金屬測試、農藥殘留測試、食品安全檢測、熱力發(fā)電金屬離子測試等等;


    紫外/可見分光光度計已通過ISO9001質量體系認證、國內的計量合格認證和英國dB Technology測試中心CE認證。


    軟件功能強大,如:動力學測試:


    A:最小采樣間隔0.5秒,最大運行時間9小時


    B:可設定延時時間、運行時間、采樣時間間隔


    C:T/A模式轉換


    D:有計算功能


    多波長測試:


    A:測試波長點多達32個


    B:測試樣品多個


    建立標準曲線、定量測試:


    A:可同時建立8個點的標準曲線


    B:可做一階過零、不過零線性回歸和二階、三階曲線擬合


    DNA/Protein測試:


    A:可手動、自動測試,測試波長缺省值為260nm、280nm和320nm,也可修改


    B:可計算DNA、Protein和Ratio比率


    其它功能:


    A:可將測試結果調到Excel或Word里進行數(shù)據(jù)處理


    B:氘燈、鎢燈的自動開關等其它系列功能。


    廣泛應用于食品、藥品、電力、生物研究、教學科研、化學化工、質量監(jiān)督、水質環(huán)保和商檢等各大領域。


    可見分光光度計,波長范圍:320nm-1100nm,能滿足不同物質的測試。







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