紫外可見分光光度計(jì)簡稱UV-VIS
1.UV-VIS定量分析原理和儀器結(jié)構(gòu)組成
? 1）分析原理：當(dāng)特定強(qiáng)度的入射光束(Incident beam) 通過裝有均勻待測物的介質(zhì)時(shí)，該光束將被部分吸收，未被吸收的光將透過(Emergent)待測物溶液以及通過散射(Scattering)、反射(Reflection),包括在液面和容器表面的反射)而損失，這種損失有時(shí)可達(dá)10%，在樣品測量時(shí)必須同時(shí)采用參比池和參比溶液扣除這些影響。當(dāng)入射光波長一定時(shí)，待測溶液的吸光度A與其濃度和液層厚度成正比（Lambert-Beer 定律）
?2）儀器結(jié)構(gòu)組成：由光源、單色器、吸收池和檢測器四部分組成。
2.優(yōu)缺點(diǎn)
1）優(yōu)點(diǎn)：A.可做多種化合物的定量分析
B.可做多種化合物的定性分析，尤其是有機(jī)物結(jié)構(gòu)研究
C.可測定多組分試樣
2）缺點(diǎn)：A.需做每種組分的吸收曲線
B.干擾因素比較多，如：光源穩(wěn)定性、入射光非單色性、顯色團(tuán)
C.測量高濃度溶液，出現(xiàn)偏離
3.基本功能和儀器用途
1）可做多種化合物的定量分析，也可做多種化合物的定性分析，尤其是有機(jī)物結(jié)構(gòu)研究
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可見分光光度計(jì)廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生、臨床檢測、生物化學(xué)、石油化工、環(huán)保監(jiān)測、食品生產(chǎn)和質(zhì)量控制等部門作定性、定量分析，還可作為大、專院校和中學(xué)相關(guān)課程的教學(xué)演示和實(shí)驗(yàn)儀器。
分光光度計(jì)是目前化驗(yàn)室中使用比較廣泛的一種分析儀器，其測定原理是利用物質(zhì)對光的選擇性吸收特性，以較純的單色光作為入射光，測定物質(zhì)對光的吸收，從而確定溶液中物質(zhì)的含量。
其特點(diǎn)是靈敏度高；準(zhǔn)確度高；測量范圍廣；在一定條件下，可同時(shí)測定水樣中兩種或兩種以上的物質(zhì)組分含量等。
分光光度計(jì)按其波長范圍可分為可見分光光度計(jì)(工作范圍360～800nm)、紫外-可見分光光度計(jì)(工作范圍200～1000nm)和紅外分光光度計(jì)(工作范圍760～400000nm)等。
可見分光光度計(jì)的原理是：
當(dāng)一束單色光照射待測物質(zhì)的溶液時(shí)，當(dāng)某一定頻率(或波長)的可見光所具有的能量(hf)恰好與待測物質(zhì)分子中的價(jià)電子的能級(jí)差相適應(yīng)(即ΔE=E2-E1=hf)時(shí)，待測物將對該頻率(波長)的可見光產(chǎn)生選擇性的吸收。
用可見分光光度計(jì)可以測量和記錄其吸收程度(吸光度)。
由于在一定條件下，吸光度A與待測物質(zhì)的濃度C及吸收地長度l的乘積成正比，即A=KCL，所以，在測得吸光度A后，可采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法、比較法以及標(biāo)準(zhǔn)加入法等方法進(jìn)行定量分析。
可見分光光度計(jì)是一種結(jié)構(gòu)簡潔、使用方便的單光束分光光度計(jì)，基于樣品對單色光的選擇吸收特性可用于對樣品進(jìn)行定性和定量分析。
其定量分析根據(jù)相對測量原理工作，即選定樣品的溶劑(或空氣)作為標(biāo)準(zhǔn)試樣，設(shè)定其透射比為100%，被測樣品的透射比則相對于標(biāo)準(zhǔn)試樣(或空氣)而得到；
在一定的濃度范圍，各參量遵循朗伯—比耳定律：A=lg1/T=KCL
T=I/I0
A:吸光度
T:相對于標(biāo)準(zhǔn)試樣的透射比
I:光透過被測樣品后照射到光電傳感器上的強(qiáng)度I0:光透過標(biāo)準(zhǔn)試樣后照射到光電傳感器上的強(qiáng)度
K:樣品溶液的比消光系數(shù)
L:樣品溶液在光路中的長度
C:樣品濃度
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