常規(guī)菌檢測的目的是一種指示菌,一般以CFU/ML來計量,比如總菌數和大腸菌群,這兩個一般是用來評價食品被污染的程度,因為按常理,我們生活當中接觸的致病菌還是相對較少的,而且人體本身也具有免疫功能,所以如果這兩個指示菌如果不超標的話,我們就有理由相信該食品是相對安全的,注意:不是絕對安全。所以我們就要對微生物進行檢測,二恒溫培養(yǎng)箱是檢測中必不可少的。
傳統(tǒng)的檢測方法也很簡單,一般就是培養(yǎng)富集后計數,其大致流程是這樣:
1)取樣,一般都是取25g樣品加入到225ml的生理鹽水中,取樣方法會根據樣品不同有所不同。比如肉制品,可以用剪刀剪碎。
2)計數,找一個比較容易計數的梯度進行計數,然后根據稀釋倍數反推出樣品中的微生物,計數說簡單點就是數菌落的數量,如果你涂抹夠開的話,每個培養(yǎng)前的微生物會長成一個菌落,所以個1個菌落就代表1個使用恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)前的微生物。(說到這,我就想起我以前老是想,一個菌落是由很多個微生物組成的,光數菌落怎么會得出樣品中微生物的個數呢?這就是沒有考慮培養(yǎng)前與培養(yǎng)后的變化。
3)稀釋,一般來說稀釋3個梯度,10倍,100倍,1000倍,而且每個稀釋梯度要倒兩個平板。
4)均質,要保證均質的力度不能太大,如果太大有可能損害樣品中的微生物,有些檢驗人員可能就是用手捏一捏,甩一甩,也有用拍擊式均質器的
5)培養(yǎng),把事先準備好的培養(yǎng)基(培養(yǎng)基的制備,一般要經過配比,高壓滅菌等過程,當然也有配制好的商業(yè)培養(yǎng)基,進口的有MERCK,國產的也很多,比如陸橋)倒平板,然后劃線培養(yǎng)或者涂抹均勻即可,只要保證盡量把含菌的稀釋液涂抹開,不要有菌落重疊的現象,然后放入恒溫培養(yǎng)箱的進行培養(yǎng),培養(yǎng)溫度與所檢測微生物不同而不同,比如大腸菌群是37度,糞大腸菌群要略高一點,具體多少,我也記得不是很清楚了
常規(guī)菌大概就是這樣啦,目前大多數檢驗單位都在使用這種傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法,其優(yōu)點就是便宜,廉價,但是比較慢,如今市面上有很多總菌數和大腸菌群的快速商業(yè)方法,比如3M,他們在紙片上提供現成的培養(yǎng)基,只需把稀釋液直接接種到培養(yǎng)基即可,相比較而言,節(jié)省了我們制備培養(yǎng)基的時間,不過貌似在培養(yǎng)時間上并沒有縮短。還有檢測培養(yǎng)基電導率方法來檢測的,因為培養(yǎng)前,培養(yǎng)基都是大分子物質,這些物質的電導率相對較低,經過微生物代謝后,被分解為小分子物質,所以電導率急劇增加,通過建一個曲線來反推微生物的個數。
致病菌的檢測是不得檢出的,所以要比常規(guī)菌要復雜,所耗時間更長,有可能還需要用沒有選擇性的培養(yǎng)基進行前增菌,然后再用選擇性培養(yǎng)基在恒溫培養(yǎng)箱中進行增菌,如果有可疑菌落再挑取利用生化反應進行鑒定。
比如沙門氏菌,檢測流程大致如下:
1)取樣,同常規(guī)菌
2)均質,同常規(guī)菌
3)前增菌,先要用無選擇性的培養(yǎng)基進行富集增菌,因為有可能樣品中所含的沙門氏菌受傷,或較少,直接用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)的話,沙門氏菌不會生長,從而出現假陰性。
4)增菌,用選擇性的培養(yǎng)基進行培養(yǎng),這樣大部分的微生物在選擇性的培養(yǎng)基上都不會生長,就如同過濾一樣,如果長菌,根據菌落形態(tài)學來判斷到底是否為可疑菌落,如果沒有可疑菌落,可以判定為陰性,如果有,挑取并做生化反應鑒定是否是真的沙門氏菌。
掌握好這些恒溫培養(yǎng)箱的使用方式,可以讓我們在細菌檢測的過程中,更加的準備,迅速。
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培養(yǎng)箱是培養(yǎng)微生物的主要設備,可用于細菌、細胞的培養(yǎng)繁殖。
原理是應用人工的方法在培養(yǎng)箱內造成微生物和細胞、細菌生長繁殖的人工環(huán)境,如控制一定的溫度、濕度、氣體等。
1、用霉菌培養(yǎng)箱底部調節(jié)螺釘調節(jié)高度,使箱體安置平穩(wěn)。
2、插上電源插座(電源應有良好接地),按下電源開關,顯示屏亮,此時顯示屏所顯示的是培養(yǎng)箱室內的實際溫度和濕度。
3、加濕器的安裝:將加濕器的電源插頭插在儀器背面的電源插座上,再將儀器的加濕管與加濕器相連,相連處一定要緊密連接。加濕器水箱里加水一定要按說明書上正確操作。
4、溫度調節(jié):按下溫度設定按鈕,數字顯示即為設定值,旋轉溫度調節(jié)電位器到所需溫度值,松開按鈕,數字顯示即為培養(yǎng)室內的實際溫度。
此時如培養(yǎng)箱內的實際溫度比設定溫度小,加熱指示燈亮,加熱器開始加熱;
如培養(yǎng)箱內的實際溫度比設定溫度大,制冷指示燈亮,制冷系統(tǒng)開始制冷;如加熱指示燈與制冷指示燈均暗,則培養(yǎng)箱處于恒溫狀態(tài)。
5、濕度調節(jié):按下濕度設定按鈕,數字顯示即為設定值,旋轉濕度調節(jié)電位器到所需濕度值,松開按鈕,數字顯示即為霉菌培養(yǎng)箱內的實際濕度。
當培養(yǎng)室內的實際濕度比設定的濕度小時,此時加濕對培養(yǎng)室內加濕,加濕指示燈亮;當培養(yǎng)室內的實際濕度比設定的濕度值大時,此時加濕器停止工作,加濕指示燈滅。
6、如箱內不需殺菌時,應將面板上的殺菌開關置于“關”的位置。
7、當溫度設定好之后,不能隨便將控溫旋鈕來回多次旋轉,以免壓縮機啟動頻繁,造成壓縮機出現過載現象,影響壓縮機的使用壽命。
8、本機背部裝有二組保險盒,2A?為制冷加熱負載保險絲盒,8A?為控制電源保險絲盒,若機器運轉出現故障,例如控溫失靈,不加熱或不制冷,須切斷電源,分別檢查保險絲是否完好,再檢查相應部位。
9、搬運時必須小心,搬運時與水平面的夾角不得小于45°。
10、當使用溫度較低時,應定期倒掉位于箱內底部積水盤內的積水。
11、加濕器若有故障,請按加濕器使用說明書上的保修點,就近修理。
12、當濕度傳感器長時間處于高濕狀態(tài),會形成結露即濕度顯示值會居高不下,若需要準確的濕度顯示值,則應關機后,將培養(yǎng)箱箱門打開,讓濕度傳感器處于室溫中,自然干燥后,即可繼續(xù)使用。
13、為了保持設備的美觀,不準用酸或堿及其它腐蝕性物品來擦表面,箱內可以用干布定期擦干。
14、若濕度長期不用時,請將盒內水倒盡。
15、當儀器在停止使用時,應拔掉電源插頭。
霉菌培養(yǎng)箱一般應用于醫(yī)療衛(wèi)生、生物制藥、農業(yè)科研、環(huán)境保護等研究應用領域,是水體分析、BOD測定,細菌、菌種、微生物的培養(yǎng)、保存和植物栽培、育種實驗生物培養(yǎng)的專用設備。