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半制備型液相色譜儀的優(yōu)點(diǎn)及技術(shù)參數(shù) 液相色譜常見問題解決方法

時(shí)間:2020-06-30    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導(dǎo)讀】制備液相色譜技術(shù)越來越廣泛地應(yīng)用于制藥,化工和生物工程等領(lǐng)域中樣品的分離和純化。?典型的應(yīng)用如合成原料的純化,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備,最終產(chǎn)品的提純等方面。?P系列制備泵設(shè)計(jì)合理,運(yùn)行平穩(wěn),性能指標(biāo)較高,輔

制備液相色譜技術(shù)越來越廣泛地應(yīng)用于制藥,化工和生物工程等領(lǐng)域中樣品的分離和純化。?典型的應(yīng)用如合成原料的純化,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的制備,最終產(chǎn)品的提純等方面。?P系列制備泵設(shè)計(jì)合理,運(yùn)行平穩(wěn),性能指標(biāo)較高,輔以UV系列紫外-可見波長(zhǎng)檢測(cè)器(配半制備/制備型檢測(cè)池)及美國(guó)Rheodyne公司手動(dòng)/電動(dòng)進(jìn)樣閥及切換閥,即可滿足廣大用戶生產(chǎn)和研究的需要。
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P230P
高壓恒流泵?
主要優(yōu)點(diǎn)?
雙泵頭,串聯(lián)式結(jié)構(gòu)-流量準(zhǔn)確;?
卡口式泵頭構(gòu)造,使泵頭的裝卸極為容易,便于維護(hù)保養(yǎng)和更換部件;?
浮動(dòng)柱塞設(shè)計(jì),使泵具有最小脈動(dòng),極大地延長(zhǎng)密封圈的使用壽命;?
提供計(jì)算機(jī)控制口,可組合晉級(jí)為高壓液相系統(tǒng);?
操作簡(jiǎn)單易用。?
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基本參數(shù)?
流量范圍?0.01-40.00(ml/min)0.1ml/min步長(zhǎng)調(diào)節(jié)流量?
流量精確度?優(yōu)于?±0.5%RSD?
流量準(zhǔn)確度?優(yōu)于?±5.0%?
最高工作壓力?40.0MPa?
安全控制?壓力上限可設(shè)定?
顯示方式?LED數(shù)字?
顯示模式?實(shí)際壓力、壓力上限設(shè)定、流量設(shè)定?
功耗?40W?
電源?220Vv±22V,50Hz±0.5Hz?
外型尺寸?400mm×280mm×150mm?
重量?20Kg?

紫外可見可變波長(zhǎng)檢測(cè)器?
主要優(yōu)點(diǎn)?
先進(jìn)的全息凹面光柵的單色儀結(jié)構(gòu),使本儀具有較高的靈敏度;?
雙光路光學(xué)系統(tǒng),最大程度地減少噪聲和漂移,允許工作至0.005AUFS?
無須更換光源檢測(cè)波長(zhǎng)范圍可拓寬至可見光譜范圍;?
采用面板觸摸開關(guān),不須繁瑣的功能調(diào)整,自動(dòng)歸零;?
鑲嵌式檢測(cè)池及氘燈設(shè)計(jì),使維護(hù)和更換更加方便。?

基本參數(shù)?
波長(zhǎng)范圍?190nm-600nm?
波長(zhǎng)精確度?±1.0nm?
波長(zhǎng)準(zhǔn)確度?±2.0nm?
譜帶寬度?6nm?
吸收范圍?0.005-2.56AUFS(10)?
基線噪聲?≤±5.0×10-5?AU(254nm)?
基線漂移?≤±5.0×10-4AU/hr?
最小檢測(cè)量?4×10-8g/mL(萘的甲醇溶液)?
光源?氘燈?
顯示方式?LED數(shù)字?
顯示模式?吸收值、測(cè)量信號(hào)、參比信號(hào)?
功耗?40W?
電源?220Vv±22V,50Hz±0.5Hz?
外型尺寸?400mm×280mm×150mm?
重量?20Kg?

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相關(guān)熱詞:

等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,高效液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓滅菌器,集菌儀,接地電阻測(cè)試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場(chǎng)強(qiáng)儀萬能材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。

  保留時(shí)間是指溶質(zhì)通過色譜柱所需時(shí)間,即待測(cè)組分從進(jìn)樣到出現(xiàn)峰大值所需的時(shí)間。保留時(shí)間是由色譜過程中的熱力學(xué)因素所決定,在一定的色譜操作條件下,任何一種物質(zhì)都有一確定的保留時(shí)間,有著類似于比移值相同的作用,可作為色譜定性分析的依據(jù)。換言之,如果保留時(shí)間出現(xiàn)漂移問題,那么檢測(cè)結(jié)果也會(huì)隨之受到影響。
 
  保留時(shí)間重現(xiàn)是液相性能好壞的一個(gè)重要標(biāo)志,同一種東西,兩次的保留時(shí)間相差不要超過15s,超過了半分鐘可看做保留時(shí)間漂移,就無法進(jìn)行定性。這里小編就列舉幾個(gè)保留時(shí)間漂移的的原因和解決方法。
 
  1色譜柱平衡
 
  如果觀察到保留時(shí)間漂移,首先應(yīng)考慮色譜柱是否已經(jīng)平衡。在每一次運(yùn)行之前給予足夠的時(shí)間平衡色譜柱。通常平衡需要10~20個(gè)柱體積的流動(dòng)相,但如果在流動(dòng)相中加入少量添加劑(如離子對(duì)試劑)則需要相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間來平衡色譜柱。流動(dòng)相污染也可能是原因之一。溶于流動(dòng)相中的少量污染物可能慢慢富集到色譜柱上,從而造成保留時(shí)間的漂移。應(yīng)注意:水是很容易污染的流動(dòng)相成分。
 
  2固定相穩(wěn)定性
 
  固定相的穩(wěn)定性都是有限的,即使在推薦的pH范圍內(nèi)使用,固定相也會(huì)慢慢水解。例如,硅膠基質(zhì)在pH4時(shí)水解穩(wěn)定性好,水解速度與流動(dòng)相類型和配體有關(guān)。雙官能團(tuán)配體和三官能團(tuán)配體比單官能團(tuán)配體的鍵合相要穩(wěn)定;長(zhǎng)鏈鍵合相比短鏈鍵合相穩(wěn)定;烷基鍵合相比氰基鍵合相穩(wěn)定的多。經(jīng)常清洗色譜柱亦會(huì)加速色譜柱固定相的水解。其他硅膠基質(zhì)鍵合相在水溶液環(huán)境中也可以發(fā)生水解,如氨基鍵合相等。
 
  3色譜柱污染
 
  保留時(shí)間漂移的另一個(gè)常見原因是色譜柱污染。HPLC色譜柱是非常有效的吸附性過濾器,它可以過濾并吸附流動(dòng)相攜帶的任何物質(zhì)。污染源可以是:流動(dòng)相本身,流動(dòng)相容器,連接管、泵、進(jìn)樣器和儀器密封墊,以及樣品等。通常通過實(shí)驗(yàn)可判斷污染的來源。樣品中如果存在色譜柱上保留很強(qiáng)的組分,就可能是使保留時(shí)間漂移的潛在根源。這些根源通常是樣品基質(zhì),如:配藥中的賦形劑,生化樣品(如血清)中的蛋白及類脂類化合物,食品樣品中的淀粉,環(huán)境水樣中的腐殖酸等。通常樣品中的強(qiáng)保留組分具有較高的分子量,在此情況下,保留時(shí)間漂移的同時(shí)或其后會(huì)有反壓的增加,可以通過使用固相提取( SPE)等樣品前處理方法來去除樣品基質(zhì)的影響,避免色譜柱污染簡(jiǎn)單的方法是防患于未然。相比之下,找到問題的所在并設(shè)計(jì)有效的清洗步驟以去除污染物要困難的多。通常使用在給定色譜條件下的強(qiáng)溶劑,但并非所有污染物都可以在流動(dòng)相中溶解。如THF可去除反相色譜柱中的許多污染物,但蛋白在THF中就不能溶解, DMSO常常用于去除反相色譜柱中的蛋白。使用保護(hù)柱是個(gè)非常有效的方法。反沖色譜柱僅是不得已時(shí)采用的辦法。
 
  4流動(dòng)相組成
 
  流動(dòng)相組成的緩慢變化也是保留時(shí)間漂移的常見原因。如流動(dòng)相中易揮發(fā)組分的揮發(fā)及循環(huán)使用流動(dòng)相等,應(yīng)防止流動(dòng)相由于蒸發(fā)、反應(yīng)等等原因造成的變化。
 

1. 色譜柱中的流動(dòng)相會(huì)排干嗎?

不少做色譜分離試驗(yàn)的人遇到過這樣的情形:不慎未及時(shí)補(bǔ)充流動(dòng)相,泵將溶劑瓶中的流動(dòng)相吸干了,HPLC系統(tǒng)由此而停止工作了。如此情況是否會(huì)損壞色譜柱?泵是否已將色譜柱中所有流動(dòng)相都排干了?色譜柱還能使用嗎?事實(shí)上,如果泵將溶劑瓶中的流動(dòng)相吸干,并不會(huì)造成色譜柱的損壞。即使泵中充滿了空氣,泵也不會(huì)將空氣排入色譜柱。因?yàn)楸弥荒茌斔鸵后w,而不能輸送空氣。相比之下,另一個(gè)更可能發(fā)生的情況是忘記蓋上色譜柱兩端的密封蓋或蓋子太松而使色譜柱變干。同樣,整個(gè)色譜柱干涸的情況不太容易發(fā)生,多半可能只是色譜柱兩端的幾個(gè)毫米變干了,因揮發(fā)掉所有溶劑是色譜柱變干需要相當(dāng)長(zhǎng)的時(shí)間。即使色譜柱真的變干了,也不一定就不可救藥了??梢試L試用一種完全脫氣的、表面張力低的溶劑(如經(jīng)氦氣脫氣的甲醇)沖洗色譜柱以除去氣體。較低的表面張力有助于浸潤(rùn)填料表面;已脫氣的溶劑應(yīng)該能夠溶解并去除滯留在填料中的氣體。色譜柱大約需要(以1mL/min的流速)沖一個(gè)小時(shí)或更多的時(shí)間被徹底浸潤(rùn),恢復(fù)到正常狀態(tài)。
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2. 使用PEEK(polyetheretherketone)管路和接頭需要注意什么問題?

如果經(jīng)常需要改變流路或更換不同品牌的色譜柱,使用PEEK材料制成的管路和接頭會(huì)非常方便。PEEK管路容易連接;PEEK接頭不僅無需工具,手?jǐn)Q即可固定,而且容易調(diào)節(jié)錐箍之外的管路長(zhǎng)度,方便與不同品牌或規(guī)格的色譜柱相連接。

使用此類材料的管路需要注意的是:PEEK對(duì)鹵代烷烴和四氫呋喃的兼容性不好。雖然未觀察到上述溶劑溶解PEEK材料的明顯跡象,但PEEK遇到上述溶劑會(huì)變脆。另一個(gè)西藥考慮的因素是壓力限。不銹鋼管可耐受6000psi的壓力,但PEEK管只能耐受近4000psi(但多數(shù)HPLC應(yīng)用系統(tǒng)壓力不會(huì)超過3000psi)。

使用PEEK接頭時(shí)則無需擔(dān)心接頭耐溶劑性能,因?yàn)榻宇^幾乎或很少與溶劑直接接觸。但手?jǐn)Q固定的PEEK接頭壓力限低于不銹鋼管,因而壓力太高時(shí),可能會(huì)使接頭在管路上滑動(dòng)而產(chǎn)生死體積或漏液。
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3. 如何預(yù)防液相泵的故障:

要保持泵的良好操作性能,必須維護(hù)系統(tǒng)的清潔,保證溶劑和試劑的質(zhì)量,對(duì)流動(dòng)相進(jìn)行過濾和脫氣.下面列出預(yù)防泵故障的幾項(xiàng)措施:

1)、用高質(zhì)量試劑和HPLC級(jí)溶劑;

?2)、過濾流動(dòng)相和溶劑;

?3)、脫氣;

4)、每天開始使用時(shí)放空排氣,工作結(jié)束后從泵中洗去緩沖液;

5)、不讓水或腐蝕性溶劑滯留泵中;

?6)、定期更換墊圈;

7)、需要時(shí)加潤(rùn)滑油;

8)、查閱有關(guān)泵操作手冊(cè)中的其它建議。

處于良好操作狀態(tài)的泵,應(yīng)該能使色譜圖上的基線平穩(wěn);保留時(shí)間的重復(fù)性好。在等度洗脫時(shí)壓力波動(dòng)小于2%。梯度洗脫時(shí)壓力變化應(yīng)是緩慢和平穩(wěn)的。
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為了使故障發(fā)生后盡快排除,平時(shí)應(yīng)常備密封、單向閥(入口與出口)、泵頭裝置、各式接頭、保險(xiǎn)絲等部件,以及更換工具。


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