任何顆粒物進(jìn)進(jìn)高效液相色譜儀后都會(huì)在柱子進(jìn)口端被篩板擋住，最后的結(jié)果是將柱子堵塞，表現(xiàn)出的特征是系統(tǒng)壓力增加并使色譜峰變形。因此，要采取各種預(yù)防措施，包括操縱步驟和商品儀器自身的各種過(guò)濾設(shè)計(jì)，努力防止或減少顆粒物進(jìn)進(jìn)高效液相色譜儀中，從而延長(zhǎng)儀器和色譜柱的使用壽命，并進(jìn)步數(shù)據(jù)的可靠性。在高效液相色譜儀中，顆粒物的主要來(lái)源有三個(gè)途徑：活動(dòng)相、被測(cè)樣品和儀器系統(tǒng)部件的磨損物。
1、被測(cè)樣品
液相系統(tǒng)中的第二個(gè)顆粒物來(lái)源是被測(cè)樣品。一些實(shí)驗(yàn)室在將他們的樣品放置在自動(dòng)進(jìn)樣器盤(pán)（或手動(dòng)進(jìn)樣）以前，所有樣品都先通過(guò)一個(gè)0.45μm針筒式過(guò)濾器過(guò)濾。這是一個(gè)有效除往被測(cè)樣品中顆粒物的方法。但是這個(gè)過(guò)程也有一點(diǎn)需要關(guān)注：你使用了針筒式過(guò)濾器就不可能100%得到通過(guò)過(guò)濾器的被測(cè)樣品，總會(huì)有或多或少的丟失。丟失來(lái)自這樣幾方面：過(guò)濾器濾膜的吸附、過(guò)濾器濾出的顆粒物上的吸附、針筒式濾膜過(guò)濾器與針筒連接處的滲漏等。假如有丟失，過(guò)濾后液體中被測(cè)物的含量或濃度與原基本樣液的含量或濃度還相同嗎？這個(gè)題目一般需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)確認(rèn)。確認(rèn)這步是要增加工作量和用度的。過(guò)濾器的使用是一種消耗，每個(gè)過(guò)濾器的價(jià)格從幾元到十幾元。但在做食品中殘留物分析時(shí)，由于基質(zhì)大多比較復(fù)雜，所以過(guò)濾這步已成為不可或缺的一步。在實(shí)際分析工作中，一般檢測(cè)每一組樣品會(huì)帶一個(gè)外標(biāo)、一個(gè)添加回收或是質(zhì)控樣品，所以，只要終極檢測(cè)時(shí)得到的信噪比能滿足檢出限要求，可將這步視為系統(tǒng)誤差而忽略。
2、活動(dòng)相
假如活動(dòng)相均由高效液相色譜級(jí)溶劑組成，活動(dòng)相沒(méi)有必要過(guò)濾。這是由于高效液相色譜級(jí)的有機(jī)溶劑，例如乙腈、甲醇等，在制造的工藝過(guò)程中都已經(jīng)過(guò)了0.2μm微孔濾膜過(guò)濾。同樣的，無(wú)論你是買的高效液相色譜儀HPLC級(jí)的水還是在實(shí)驗(yàn)室使用超純水凈化系統(tǒng)制備的水，最后一步也是通過(guò)0.2μm微孔濾膜。然而，假如有任何一種緩沖液中加進(jìn)了固體物，例如磷酸鹽，活動(dòng)相過(guò)濾將是必要的一個(gè)步驟。固然緩沖鹽可能是可溶解的、高純的，但它還是可能含有顆粒物質(zhì)，例如在蓋試劑瓶的塑料內(nèi)蓋時(shí)，塑料瓶蓋子與瓶口邊沿?cái)D壓就會(huì)產(chǎn)生塑料顆粒。在這種情況下，添加的一種固體物可能完全溶解了，但是少量雜質(zhì)顆粒存在于活動(dòng)相中成為殘?jiān)?br/> 活動(dòng)相通過(guò)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾對(duì)于從活動(dòng)相中除往所有顆粒物是一個(gè)有效方法。0.2μm微孔濾膜也可以用，但是它們就這個(gè)應(yīng)用而言并不比0.45μm微孔濾膜更有效，而且它的過(guò)濾速度會(huì)更慢，特別是當(dāng)實(shí)驗(yàn)室使用的試劑和水的質(zhì)量不太好時(shí)。建議實(shí)驗(yàn)室在編寫(xiě)制定他們活動(dòng)相制備標(biāo)準(zhǔn)操縱程序（SOPs）時(shí)規(guī)定，可以鑒戒國(guó)際上同類實(shí)驗(yàn)室的規(guī)定，即：
活動(dòng)相制備僅采用HPLC級(jí)液體時(shí)不需要過(guò)濾，反之所有活動(dòng)相組成在使用前必須過(guò)濾。
在連接儲(chǔ)液瓶和泵的輸液管的末端進(jìn)口采用下沉式過(guò)濾器（常見(jiàn)材質(zhì)有熔融玻璃砂芯濾板和微孔金屬的兩種）也是很重要的。這個(gè)過(guò)濾器的規(guī)格為≥10μm的微孔物質(zhì)，所以它不能取代活動(dòng)相過(guò)濾步驟，但是它能除往系統(tǒng)中的塵土并保證儲(chǔ)液瓶、輸液管使用的可靠性。
3、儀器系統(tǒng)部件的磨損物
最后，在高效液相色譜儀HPLC系統(tǒng)中顆粒物的另一個(gè)主要來(lái)源是輸液泵密封墊和進(jìn)樣閥旋轉(zhuǎn)軸的磨損。關(guān)于輸液泵密封墊的磨損更換有兩種不同建議。
第一種建議以為，在一般實(shí)驗(yàn)室中輸液泵密封墊通常使用壽命為六個(gè)月到一年，因此建議半年或一年更換這些密封墊，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)基于上述觀點(diǎn)制定定期預(yù)防性維護(hù)計(jì)劃。該觀點(diǎn)以為：與輸液泵密封墊顆粒堵塞柱子而更換新柱子的用度相比，更換密封墊的用度低些。一些輸液泵有玻璃砂芯或篩網(wǎng)，可在流路中濾掉從泵密封墊磨損下來(lái)的顆粒物，防止這些顆粒物隨活動(dòng)相流至柱頭。若有這種裝置應(yīng)查閱輸液泵操縱手冊(cè)，查看推薦的這種過(guò)濾器清洗或更換的間隔。
另一種建議則以為，原裝密封墊的密封效果建議，更換以后輕易引起活動(dòng)相滲漏。所以，只要不漏液就不要輕易更換密封墊。
兩種說(shuō)法都有其道理，具體如何操縱，建議與儀器公司工程師溝通，各公司的儀器還是有些不同的。
自動(dòng)進(jìn)樣器旋轉(zhuǎn)軸的密封隨著使用時(shí)間也會(huì)磨損，但是在我的經(jīng)驗(yàn)中，即便是高負(fù)荷的運(yùn)轉(zhuǎn)旋轉(zhuǎn)軸密封墊也可以使用幾年。假如你的自動(dòng)進(jìn)樣器系統(tǒng)有計(jì)數(shù)進(jìn)樣閥轉(zhuǎn)動(dòng)次數(shù)的功能，你可以設(shè)定一個(gè)警鈴當(dāng)預(yù)設(shè)閥轉(zhuǎn)動(dòng)次數(shù)已達(dá)到時(shí)提醒你。曾有一種說(shuō)法，進(jìn)樣器較多轉(zhuǎn)動(dòng)20,000次，這僅僅是進(jìn)樣10000個(gè)；但這似乎不是實(shí)驗(yàn)室涉及的常規(guī)樣品分析使用壽命，它們的實(shí)際使用壽命會(huì)更長(zhǎng)。旋轉(zhuǎn)軸密封磨損后會(huì)滲液，比較明顯的特征是同一樣品多次進(jìn)樣后，峰面積值差別比較大（RSD>?5%）。當(dāng)然，輸液泵的密封墊和旋轉(zhuǎn)軸的密封墊磨損將增加更多研磨物在活動(dòng)相中，加速對(duì)這些部件的損傷。此外，假如你日常運(yùn)行的活動(dòng)相有緩沖鹽，如磷酸緩沖鹽，密封墊的磨損會(huì)更快。
無(wú)論顆粒物源于何物，實(shí)驗(yàn)時(shí)都要將其除往。推薦在HPLC系統(tǒng)中采用一個(gè)0.45或0.5μm的在線多孔過(guò)濾器，接在自動(dòng)進(jìn)樣器和柱子之間，即使已使用了保護(hù)柱。這個(gè)在線過(guò)濾器將成為擋板代替柱頭的濾板，而且如采用一個(gè)玻璃砂芯濾板，既便宜，更換又方便（幾分鐘就可更換）。若采用在線過(guò)濾，高效液相色譜儀檢測(cè)每批樣品開(kāi)始前記錄下壓力值，當(dāng)壓力上升一定值，例如25%或增加500psi，應(yīng)該更換玻璃砂芯濾板了，更換以后沖洗幾分鐘系統(tǒng)將恢復(fù)到原來(lái)的壓力值。
高效液相色譜儀可以完成二元高壓梯度洗脫，也可以拓展為制備系統(tǒng)，采用高壓混合器連接兩個(gè)高壓恒流泵，利用RS232通訊，即可實(shí)現(xiàn)梯度分析；
便于用戶自由選擇與搭配，混合器材主要由不銹鋼、生物惰性PEEK等構(gòu)成，用途廣泛；
可廣泛應(yīng)用于研究開(kāi)發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。
高效液相色譜儀分離原理：液-液分配(Liquid-liquid Partition Chromatography)及化學(xué)鍵合相色譜(Chemically Bonded Phase Chromatography) 流動(dòng)相和固定相都是液體。
流動(dòng)相與固定相之間應(yīng)互不相溶（極性不同，避免固定液流失），有一個(gè)明顯的分界面。
當(dāng)試樣進(jìn)入色譜柱，溶質(zhì)在兩相間進(jìn)行分配。達(dá)到平衡時(shí)，高效液相色譜儀報(bào)價(jià)，服從于高效液相色譜計(jì)算公式；
6種定量計(jì)算方法：歸一法、修正歸一法、帶比例因子的修正歸一法、內(nèi)標(biāo)法、外標(biāo)法，高效液相色譜儀適用范圍，以及指數(shù)計(jì)算法。
高效液相色譜儀特點(diǎn)：
1、梯度洗脫內(nèi)部軟件可自控制，編輯、存貯60個(gè)梯度方法，運(yùn)行復(fù)雜的梯度程序；
2、泵形式：串聯(lián)雙柱塞 浮動(dòng)式密封圈；泵頭自沖洗功能，泵無(wú)須手動(dòng)排空即可輸液“自吸式單向閥”技術(shù)，可延長(zhǎng)密封圈使用壽命；
3、光路系統(tǒng)采用精密定位結(jié)構(gòu)和獨(dú)特的散熱技術(shù)，高效的光學(xué)系統(tǒng)和數(shù)字過(guò)濾；
4、程序化的溶劑類和壓縮因子，可自動(dòng)補(bǔ)償；完整的預(yù)清洗功能，更于快速溶劑更換；
5、波長(zhǎng)調(diào)節(jié)功能：既可由鍵盤(pán)面板控制也可由程序軟件設(shè)定，全封閉集成型光電檢測(cè)元件，無(wú)需任何機(jī)械部分調(diào)整即可選擇或改變波長(zhǎng)；
6、光源運(yùn)行時(shí)間在線監(jiān)測(cè)并顯示，方便用戶確定光源壽命；
7、三條流量校正曲線以及特有的多點(diǎn)參數(shù)校正，保障了極高的流量準(zhǔn)確性；
8、梯度：高壓2-3元；梯度方式：高壓，梯度洗脫內(nèi)部軟件可自控制，可通過(guò)PC機(jī)及泵控制；
9、實(shí)時(shí)顯示樣品池和參比池能量，方便判斷光源和流通池狀態(tài)；
10、紫外檢測(cè)器具有自動(dòng)波長(zhǎng)定位調(diào)整，自動(dòng)調(diào)零，多量程輸出選擇；
11、智能化高，可實(shí)現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)化平臺(tái)監(jiān)控，提高了你的QC效益；
12、自動(dòng)化，讓你從繁鎖的分析操作中解放出更多的時(shí)間。
1、流動(dòng)相的抽濾要求
色譜純?cè)噭?，二次蒸餾水，緩沖鹽一定要過(guò)濾。
2、吸濾頭
特殊情況下可拆下濾頭抽取以判斷其中是否堵塞；亦可用注射器吸取流動(dòng)相通過(guò)吸濾頭打出以判斷其是否堵塞。若有堵塞情況可用異丙醇超聲波清洗；清洗不成功則需要更換。
3、單向閥
如遇到泵壓不穩(wěn)或流動(dòng)相不能抽取，則可能是單向閥出現(xiàn)問(wèn)題，卸下用異丙醇超聲波清洗，清洗時(shí)須按其安裝的反相放置在小燒杯中，切記不可與安裝方向倒置超洗！
4、泵頭
泵頭漏液或出現(xiàn)其它故障一般要申請(qǐng)維修(如漏液，或更換柱塞桿及其密封墊等)。
5、過(guò)濾片
當(dāng)色譜峰出現(xiàn)異常情況時(shí)，有可能是此部件被污染，拆下用異丙醇超洗或更換過(guò)濾墊片。
6、排液閥
此處不能完全密封或漏液時(shí)一般是其中的墊片污染或磨損，可卸下后取出其墊片用異丙醇超聲波清洗或更換墊圈。
7、手動(dòng)進(jìn)樣器
平時(shí)應(yīng)注意用二次蒸餾水和甲醇在裝載狀態(tài)及進(jìn)樣分析狀態(tài)清洗；如出現(xiàn)漏液現(xiàn)象，原因極可能為轉(zhuǎn)子密封墊磨損或污染，一般須申請(qǐng)維修或更換配件。
8、流通池
在色譜峰不正常時(shí)可能是此部件被污染可拆卸后取出其中的墊片用異丙醇超洗(可根據(jù)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作或申請(qǐng)維修)。
9、工作站
出現(xiàn)死機(jī)可重啟計(jì)算機(jī)；不正常運(yùn)行時(shí)，首先可更換電腦測(cè)試其硬件故障；或在本機(jī)上重新插撥接口、重新安裝軟件。
449717568
