移液器常規(guī)的使用流程,只要是做過實驗的都知道,一個完整的移液循環(huán)包括下面六個步驟:
移液循環(huán)6步驟
但為什么精準移液仍然是一個難題呢?接下來就要從每個步驟詳細說說了,如何每一步做到標準操作,實現(xiàn) 0 誤差!
1、吸頭安裝 - 旋轉(zhuǎn)安裝法
使用合適移液器量程的吸頭,為保證良好的密封性,將移液器垂直插入吸頭,左右旋轉(zhuǎn)半圈,上緊即可,建議移液量在吸頭的 35%-100%量程范圍內(nèi)。(多道移液器建議使用進口吸頭)
吸頭安裝 - 旋轉(zhuǎn)安裝法
2、容量設定:粗調(diào)/細調(diào)
從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常調(diào)節(jié)方法,逆時針旋轉(zhuǎn)刻度即可。
從小量程調(diào)節(jié)至大量程時,應先調(diào)至超過設定體積刻度,再回調(diào)至設定體積。
(不要將按鈕旋出量程范圍,否則會卡住機械裝置,損壞移液器。)
3、潤洗吸頭
在安裝了新的吸頭或增大了容量值以后,液體吸取、排放兩到三次,吸頭內(nèi)壁表面吸附達到飽和,確保移液工作的精度和準度;
4、吸液
不同量程移液器吸液時吸頭浸液深度
0.1-2.5ul/0.5-10ul ≤ 1mm
2-20ul/10-100ul/20-200ul ≤ 2mm
100-1000ul ≤ 3mm
1000-5000ul/2-10ml ≤ 4mm
正向移液(密度低的溶液)
1. 按下按鈕到停點;
2. 輕緩松開按鈕到起始點完成吸液;
3. 輕按按鈕至停點,排除液體;稍停片刻,繼續(xù)按按鈕,排空液體;
4. 松開按鈕,回到原點。如果需要,更換吸頭后繼續(xù)移液。
反向移液(適用于粘稠液體或易揮發(fā)性液體)
1. 按下按鈕至第二停點吸液,輕緩松開按鈕到起始點完成吸液。吸取多于設定容量的液體;
2. 輕按按鈕至第一停點,排除設定容量的液體;
3. 殘留在吸頭內(nèi)的多余液體隨吸頭丟棄。
5、排液
吸頭緊貼容器壁,先將排放按鈕按至第一停點,稍微停頓,再按至第二停點,這樣可保證吸頭內(nèi)無殘留液體。如果仍然有殘留,需要更換吸頭。
6、卸去吸頭
除去槍頭后,將移液器調(diào)至最大量程。
在移液器操作的最后,還有幾個 TIPS 務必要記得:
不要用大量程的移液器移取小體積的液體;
使用與移液器匹配的槍頭;
吸液太快產(chǎn)生氣泡,液體浸入移液器腐蝕內(nèi)部;
所設量程不可超出移液器有效量程范圍,損壞移液器;
吸有液體的移液器不可平放,吸頭內(nèi)的液體容易污染移液器內(nèi)部;
移液器在每次實驗后應將刻度調(diào)至最大,讓彈簧回復原型以延長移液器的使用壽命;
使用時檢查是否有漏液現(xiàn)象。吸取液體后懸空垂直放置幾秒鐘,看看液面是否下降。如果漏液,則檢查吸頭是否匹配和彈簧活塞是否正常;
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移液器是一種在一定容量范圍內(nèi)可隨意調(diào)節(jié)的精密取液裝置,產(chǎn)品具有性能穩(wěn)定、使用靈活、可靠性高、維護簡便等優(yōu)點。下面就來具體介紹一下移液器的使用方法,希望可以幫助到大家。
移液器的使用方法
設定移液體積:從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常調(diào)節(jié)方法,逆時針旋轉(zhuǎn)刻度即可;從小量程調(diào)節(jié)至大量程時,應先調(diào)至超過設定體積刻度,再回調(diào)至設定體積,這樣可以保證移液器的精確度。
2.裝配移液槍頭:將移液槍垂直插入吸頭,左右旋轉(zhuǎn)半圈,上緊即可。
3.垂直吸液:吸頭尖端浸入液面3mm以下,吸液前槍頭先在液體中預潤洗2~3次確保移液的精度和準度(因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機溶劑時,吸頭內(nèi)壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。)。
使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法是吸取液體后懸空垂直放置幾秒中,看看液面是否下降。
如果漏液,則檢查吸液嘴是否匹配和彈簧活塞是否正常。
4.放液:如果量很小則應將吸頭尖端靠在容器內(nèi)壁。慢吸慢放,以防突然松開溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。
移液器使用注意事項
1.濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設定。
2.可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1mL蒸餾水20℃時重0.9982g。
3.移液器反復撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內(nèi)部零件松散而損壞移液器。
4.移液器未裝吸頭時,切莫移液。
5.在設置量程時,不要將按鈕旋出量程,否則會卡住機械裝置,損壞了移液器。
6.移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如,濃酸、濃堿、有機物等)。
7.不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。
8.如長時間不使用,要把移液槍的量程調(diào)至最大值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧;
9.定期清潔移液器外壁,可以用95%酒精或60%的異丙醇,再用蒸餾水擦拭,自然晾干;如果消毒可以用紫外照,或者用75%酒精擦拭;或使用可高壓滅菌的移液器。
以上便是今天關于移液器正常的調(diào)節(jié)方法及注意事項指南的全部分享了,希望對大家今后使用本設備能有幫助。
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液體操作中常用的移液器,在使用過程中有些錯誤的操作會給操作本身帶來誤差,有時會造成機器的損壞等,這里捷配儀器儀表網(wǎng)小編簡單整理如下:
第一,裝吸頭。在移液器使用頻繁的實驗室里,常??梢月牭角脫粑^的聲音此起彼伏,頗有為枯燥的實驗室生活增添點音樂的味道。走進細看,原來是使用者怕吸頭不能裝緊,在吸頭裝到移液器上之后,在吸頭盒里再敲擊幾次,希望通過這種沖擊力來保證移液的密封性。
那這種操作錯在哪里呢?
*在撞擊的作用下,吸頭可能會變形而影響移液精度;
*移液器套柄接觸吸頭的部分經(jīng)過多次強力的摩擦,會逐漸變得粗糙而難以保證密封性,而為了達到良好的密封性就需要更大的撞擊力,惡性循環(huán)就此開始;
*小量程的移液器的套柄都比較細,在不斷撞擊的摧殘下,很有可能變成釣魚鉤;
*有時這種沖擊力比移液器掉在地上承受的力還要大,移液器里的部分精密部件隨時有不堪重負而罷工的可能。
第二,吸液角度。很多使用者為了在吸液過程中便于觀察樣品在吸頭中的狀況,會讓移液器在吸液過程中保持45o傾角甚至更接近水平的角度。但這又錯了。
*在移取接近或達到吸頭容積的樣品時,移液器大角度傾斜很容易讓液體溜到移液器的套柄里面,從而污染甚至腐蝕移液器的活塞,同時也容易造成樣品的交叉污染;
*移液器的大角度傾斜同時也會讓吸頭外壁與液體的接觸面增大,這樣吸頭離開液面時外壁殘留的液體也更多,很容易在排液時隨吸頭內(nèi)的液體一起離開吸頭,從而降低移液的精度,而這些殘留的液體對于微小量程(如2ul和10ul)的移液器而言,其對精度的破壞很可能是致命的!
第三,吸液速度。在實驗室里經(jīng)??梢钥吹剑褂谜邽榱恕疤岣咝省?,在吸液時拇指迅速松開,這就使液體迅速沖到吸頭里面。殊不知,這樣就迫使液體在進入吸頭后形成湍流的狀態(tài),從而對中小量程的移液器而言會產(chǎn)生肉眼不可見的汽霧進入移液器的內(nèi)部,對大量程的移液器而言則會看到液體直接沖到移液器的內(nèi)部。最終的結(jié)果就是污染甚至腐蝕移液器的活塞,容易造成樣品的交叉污染,對精度也有影響。
第四,存放。相當多的用戶在移液器使用完畢后會直接把移液器平放在實驗臺上,愛好整潔的則可能把移液器放在抽屜里。這樣其實也不好!在移液操作過程中,難免會有液體進入移液器的內(nèi)部,在平放的狀態(tài)下,這些液體就會一直滯留在活塞等部件上,日積月累之后污染活塞甚至腐蝕活塞。
在以上羅列的問題中,經(jīng)常會提到腐蝕活塞的情況。有人可能會說:我用的移液器的活塞是耐腐蝕的!但我還是不得不提醒兩點:
*除了少數(shù)低端的移液器會用全塑料配件外,大多數(shù)移液器的活塞組件中都有金屬部件;
*只要是污染了活塞,無論活塞是何種材質(zhì),都可能有移液器內(nèi)部氣密性降低以及樣品交叉污染
需要自我保養(yǎng)的部位:活塞在清潔或拆卸后要用硅脂涂抹上一層;多道移液器的的O型環(huán)也需要經(jīng)常涂抹硅脂,然后用軟布輕拭,如果有損壞,要更換;移液器內(nèi)部被液體污染,可自行部分拆卸清洗。
總之,各實驗室有必要建立和完善移液器使用的SOP(標準操作規(guī)程),嚴格移液器操作的管理。
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