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二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境,培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細胞/組織進行體外培養(yǎng)的一種裝置。
二氧化碳培養(yǎng)箱的日常清潔:
1、清洗培養(yǎng)箱外壁,以消除可能進入的污垢和微生物。如果培養(yǎng)箱的頂部非常臟,當打開培養(yǎng)箱門灰塵很可能進入,所以清潔頂部是很重要的。用無絨布蘸溫和的肥皂水。然后用干凈的布蘸清水擦拭干凈。用干凈的干布擦干外面。特別要注意每個人都接觸的門把手。不要使用任何液體或噴霧清潔劑清潔觸摸屏顯示器。而需要使用干的超細纖維布來清潔這些。
2、如果選配的培養(yǎng)箱具備自動消毒功能,請立即運行。在周期完成之后,用無菌蒸餾水填充儲水器,并打開氣閥。
3、加熱培養(yǎng)箱,讓培養(yǎng)箱完全干燥。這應(yīng)該只需要花一點時間,所以不要讓門開著——那只會重新引入新的灰塵和污物!
4、用稀釋的季銨鹽消毒劑擦拭內(nèi)壁和部件。用70%酒精擦拭以除去任何剩余的消毒劑痕跡。再次強調(diào),一定要擦到所有的角落,并記得安好門封條,更換內(nèi)部零件。
5、用蒸餾水沖洗箱體內(nèi)壁和部件,并用干凈的無絨布再一次擦干。
6、取出所有隔板,隔板支架,以及所有附件、空氣管道。清空水盤并用干凈的無絨布擦干。
7、取出培養(yǎng)箱中的培養(yǎng)物。如果清洗時間不長,可以將其保存在干凈,無菌的容器中,保持其溫度。關(guān)閉培養(yǎng)箱,包括關(guān)閉供氣閥。
今天講下二氧化碳培養(yǎng)箱的使用方法,主要是針對剛剛應(yīng)用二氧化碳培養(yǎng)箱的新手,需要注意的事項。
首先、 做好使用前的準備工作
二氧化碳培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負責使用,操作盤上的任何開關(guān)和調(diào)節(jié)旋扭一旦固定后,不要隨意扭動,以免影響箱內(nèi)溫度,二氧化碳濃度,濕度的波動,同時降低機器的靈敏度。箱子的放置要水平,避免陽光直射和灰塵等,要保證儀器周圍的氣流循環(huán),后部及側(cè)面應(yīng)留出5 cm的空隙。加裝穩(wěn)壓電源保證電源電壓波動不超過220 V±10%。所加入的水必須是蒸餾水或無離子水,防止礦物質(zhì)儲積在水箱內(nèi)產(chǎn)生腐蝕作用,經(jīng)常檢查箱內(nèi)水是否足夠,水位應(yīng)加至“水位指示燈”滅燈時為止。使用前箱內(nèi)應(yīng)用消毒酒精或碘溶液徹底擦洗,防止其他微生物污染,導(dǎo)致實驗失敗。在房間安裝空調(diào),使環(huán)境溫度保持在25~C左右。所使用的二氧化碳必須是純凈的,否則降低二氧化碳傳感器的靈敏度和污染二氧化碳過濾裝置。
其次、正確充氣延長二氧化碳傳感器使用壽命
二氧化碳培養(yǎng)箱箱內(nèi)氣壓由二氧化碳氣體傳感器控制。二氧化碳傳感器正常反饋要求進氣壓為Medical Equipment Vo1.22,No.4 0.06 MPa。當箱內(nèi)氣壓降低時,二氧化碳傳感器在低壓刺激下有節(jié)奏地開閉,向箱內(nèi)慢慢充氣,當進氣壓達0.1 MPa時,自動停止調(diào)節(jié)。如充氣方法不當,使進氣壓力增大,當超過0.1 MPa甚至0.2 MPa壓力,會損傷二氧化碳傳感器。開始這種損傷效應(yīng)不明顯,不易察覺,反復(fù)錯誤操作,二氧化碳傳感器損傷累積最終致命損壞,使氣壓調(diào)節(jié)失靈。因此,二氧 化碳傳感器壽命與二氧化碳進氣壓大小有關(guān),只要做好進氣壓調(diào)節(jié),就能保護二氧化碳傳感器性能。二氧化碳傳感器價格昂貴,更換不易,所以一定要做好進氣壓調(diào)節(jié),延長二氧化碳傳感器使用壽命。
第三、做培養(yǎng)時注意培養(yǎng)箱濕度
箱內(nèi)濕度對于培養(yǎng)工作來說是一項非常重要然而又經(jīng)常被忽略的因素。因為飽和濕度環(huán)境可以避免培養(yǎng)液中二氧化碳逃逸,培養(yǎng)液中pH值穩(wěn)定,有利于細胞生長, 足夠的濕度水平并且要有足夠快的濕度恢復(fù)速度(如在開關(guān)門后)才能保證不會由于過度干燥而導(dǎo)致培養(yǎng)失敗。所以二氧化碳培養(yǎng)箱使用過程中,在箱內(nèi)托盤中放一 定量的滅菌水(3/2至全盤),使箱內(nèi)成為飽和濕度環(huán)境。如使用者忘記補加水,使培養(yǎng)細胞處于低濕度甚至干熱環(huán)境中,培養(yǎng)液二氧化碳氣體易揮發(fā),液體pH 值升高,影響細胞生長,在工作中要力求避免此問題發(fā)生。樣本多時,箱內(nèi)分區(qū)存放,培養(yǎng)物用筐或瓷盤存放,這樣存取快速,縮短開門時間,減少箱內(nèi)氣體和濕度 變化,節(jié)省氣體,穩(wěn)定了細胞生長環(huán)境。
通過以上3點注意事項,相信新手對二氧化碳培養(yǎng)箱的使用細節(jié)有了進一步了解,更好的延長二氧化碳傳感器使用壽命。