紫外光柵分光光度計使用注意事項與保養(yǎng)
1、安放紫儀器的房間,應(yīng)遠離電磁場。并且干凈、通風(fēng)、防塵。
2、安放儀器的桌子要注意防震,可以采用水泥制作,比較穩(wěn)定,而且不容易受周圍震動源的影響。同時儀器不能被太陽光直接照射。
3、紫外可見分光光度計的每個部分都不允許受嘲。否則將會使有關(guān)的元器件損壞或性能變壞。特別是在我國的南方春夏之交時,在潮濕陰雨的氣候條件下,更應(yīng)該注意防止儀器受潮。
如果儀器較長時間不用,應(yīng)每隔7d開機1—2h,以去除潮濕,避免光學(xué)元件和電子元件受潮。儀器的周圍應(yīng)干燥,每次使用完畢后,比色皿暗箱內(nèi)應(yīng)放置防潮硅膠袋。并用塑料套于罩嚴,同時在套子內(nèi)也放置數(shù)袋防潮硅膠。經(jīng)常注意防潮硅膠是否受潮,并及時調(diào)換或烘干。
儀器底部配有2只干燥劑筒,用以保持儀器的干燥,要注意經(jīng)常檢查其是否受潮,如果受潮,要及時更換里面的干燥劑。
4、經(jīng)常檢驗儀器的技術(shù)指標(biāo)。為保證儀器測試結(jié)果的準(zhǔn)確可靠,新購進、使用中和維修后的分光光度計都府定期進行檢驗。國家技術(shù)監(jiān)督局批準(zhǔn)頒布了各類紫外、可見分光光度計的檢定規(guī)程。檢定規(guī)程規(guī)定,槍定周期為半年,兩次檢定合格的儀器撿定周期可延長至一年。通過檢驗一旦發(fā)現(xiàn)哪項技術(shù)指標(biāo)有問題,使朋者自己不要輕易調(diào)整,應(yīng)該馬上聯(lián)系制造廠的維修工程師來維修。經(jīng)常檢驗的技術(shù)指標(biāo)一般有比色皿的配套性、波長準(zhǔn)確性、透光度準(zhǔn)確性等,這些檢驗的具體方法在本章的實訓(xùn)中將會操作。
5、保持儀器機械運動部件活動自如。紫外可見分光光度計有許多轉(zhuǎn)動部件,如光柵的掃描機構(gòu)、狹縫的傳動機構(gòu)、光源轉(zhuǎn)換機構(gòu)等。使用考對這些活動部件應(yīng)經(jīng)常加一些鐘表油,以保證其活動的口。特別應(yīng)注意,有些使用考不易觸及的部件,千萬不要亂動,可以請制造廠的維修工程師或有經(jīng)驗的工作人員幫助完成。
6、儀器的連續(xù)使用時間不能超過2h。使用后必須間歇0.5h以后,才能再用。
7、比色皿在使用前、后必須徹底清洗。在位用和清洗過程中,不能用硬質(zhì)纖維和手指擦拭或觸損透光面,只能拿其不道光的兩個毛玻璃面。更不能用毛刷洗比色皿,必須保持比色皿透光面的完好無損和清潔。
比色皿使用后應(yīng)立即清洗,可浸泡在肥皂水中,然后再用自來水和蒸餾水沖洗干凈。被有色物琺污昧可以用3mol/L鹽酸和等體積乙醇的混合液浸泡洗滌。倒置晾干備用,絕對不能烘烤。
一旦比色皿被戳附力很強的試樣嚴重站污時,很難清洗干凈,即使是浸在“王水”中也很難洗凈,這時,可用超聲波清洗。
比色皿外邊沾有水珠或持測溶液時,可先用濾紙吸干,再用鏡頭紙拭凈。
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1.紫外可見分光光度計噪音較大
原因:
處理方法:
2.在使用過程中,出現(xiàn)數(shù)字顯示不能歸零,同時伴有圖線記錄基線位置偏高
①光電倍增等老化,性能降低
②信號處理板可能發(fā)生故障
③前置放大版出現(xiàn)故障,引起反饋量增大
處理方法:
①開機通電,先做記錄故障曲線,再與原始記錄的標(biāo)準(zhǔn)曲線對照,找出異同點,并作一下定性定能分析。然后用一只同型號規(guī)格的新光電倍增管替換機上的光電管,再開機實驗,結(jié)果記錄出來的圖線并沒有什么變化,由此證明光電倍增管沒有老化變質(zhì)。
②進一步檢查信號處理板,未發(fā)現(xiàn)信號處理板各元器件損壞,對影響靈敏度有關(guān)的電位器檢測,結(jié)果測得數(shù)據(jù)正常,這說明信號處理板沒有故障。
3.自檢時提示波長自檢出錯
原因:
自檢過程中可能打開過儀器樣品室的蓋子
處理方法:
關(guān)上儀器樣品室蓋子,重新自檢
4.儀器自檢時提示通訊錯誤
原因:
儀器與電腦之間的數(shù)據(jù)線沒有連接好
處理方法:
連接好數(shù)據(jù)線,重新打開儀器和軟件,重新自檢
5.測試過程中提示能量太低
原因:
①光源燈泡使用時間超過壽命期
②樣池中有不透光的東西擋住了光
處理方法:
更換光源燈泡;拿走擋光的物品
熒光分光光度計是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器。其能提供包括激發(fā)光譜、發(fā)射光譜以及熒光強度、量子產(chǎn)率、熒光壽命、熒光偏振等許多物理參數(shù),從各個角度反映了分子的成鍵和結(jié)構(gòu)情況。通過對這些參數(shù)的測定,不但可以做一般的定量分析,而且還可以推斷分子在各種環(huán)境下的構(gòu)象變化,從而闡明分子結(jié)構(gòu)與功能之間的關(guān)系。熒光分光光度計的激發(fā)波長掃描范圍一般是190~650nm,發(fā)射波長掃描范圍是200~800nm。可用于液體、固體樣品(如凝膠條)的光譜掃描?! 晒夥止夤舛扔嫷脑恚骸 ∮筛邏汗療艋螂療舭l(fā)出的紫外光和藍紫光經(jīng)濾光片照射到樣品池中,激發(fā)樣品中的熒光物質(zhì)發(fā)出熒光,熒光經(jīng)過濾過和反射后,被光電倍增管所接受,然后以圖或數(shù)字的形式顯示出來?! ∥镔|(zhì)熒光的產(chǎn)生是由在通常狀況下處于基態(tài)的物質(zhì)分子吸收激發(fā)光后變?yōu)榧ぐl(fā)態(tài),這些處于激發(fā)態(tài)的分子是不穩(wěn)定的,在返回基態(tài)的過程中將一部分的能量又以光的形式放出,從而產(chǎn)生熒光?! 〔煌镔|(zhì)由于分子結(jié)構(gòu)的不同,其激發(fā)態(tài)能級的分布具有各自不同的特征,這種特征反映在熒光上表現(xiàn)為各種物質(zhì)都有其特征熒光激發(fā)和發(fā)射光譜,因此可以用熒光激發(fā)和發(fā)射光譜的不同來定性地進行物質(zhì)的鑒定?! ≡谌芤褐?,當(dāng)熒光物質(zhì)的濃度較低時,其熒光強度與該物質(zhì)的濃度通常有良好的正比關(guān)系,即IF=KC,利用這種關(guān)系可以進行熒光物質(zhì)的定量分析,與紫外-可見分光光度法類似,熒光分析通常也采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法進行。