二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境,培養(yǎng)箱要求穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對飽和濕度(95%),來對細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。
二氧化碳培養(yǎng)箱作為實驗室常用的一款儀器,在使用過程中有哪些需要注意的事項,我們來列舉一下:
1、二氧化碳培養(yǎng)箱未注水前不能打開電源開關(guān),否則會損壞加熱元件。
2、二氧化碳培養(yǎng)箱運(yùn)行數(shù)月后,水箱內(nèi)的水因揮發(fā)可能減少,當(dāng)?shù)退恢甘緹?WLow12)亮?xí)r應(yīng)補(bǔ)充加水。先打開溢水管,用漏斗接橡膠管從注水孔補(bǔ)充加水使低水位指示燈熄滅,再計量補(bǔ)充加水(CP-ST200A加水1800ml,CP-ST100A加水1200ml),然后堵塞溢水孔。
3、二氧化碳培養(yǎng)箱可以做高精度恒溫培養(yǎng)箱使用,這時須關(guān)閉CO2控制系統(tǒng)。
4、因為CO2傳感器是在飽和濕度下校正的,因此加濕盤必須時刻裝有滅菌水。
5、當(dāng)顯示溫度超過置定溫度1℃時,超溫報警指示燈(OverTemp7)亮,并發(fā)出尖銳報警聲,這時應(yīng)關(guān)閉電源30分鐘;若再打開電源(溫控)開關(guān)(Power20)仍然超溫,則應(yīng)關(guān)閉電源并報維修人員。
6、鋼瓶壓力低于0.2MPa時應(yīng)更換鋼瓶。
7、盡量減少打開玻璃門的時間。
8、如果二氧化碳培養(yǎng)箱長時間不用,關(guān)閉前必須清除工作室內(nèi)水分,打開玻璃門通風(fēng)24小時后再關(guān)閉。
9、清潔二氧化碳培養(yǎng)箱工作室時,不要碰撞傳感器和攪拌電機(jī)風(fēng)輪等部件。
10、拆裝工作室內(nèi)支架護(hù)罩,必須使用隨機(jī)專用扳手,不得過度用力。
11、搬運(yùn)培養(yǎng)箱前必須排除箱體內(nèi)的水。排水時,將橡膠管緊套在出水孔上,使管口低于儀器,輕輕吸一口,放下水管,水即虹吸流出。
12、搬運(yùn)二氧化碳培養(yǎng)箱前應(yīng)拿出工作室內(nèi)的擱板和加濕盤,防止碰撞損壞玻璃門。
13、搬運(yùn)培養(yǎng)箱時不能倒置,同時一定不要抬箱門,以免門受損。
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二氧化碳培養(yǎng)箱是科研實驗室不可或缺的必備設(shè)備之一,二氧化碳培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng)。下面我們?yōu)槟榻B二氧化碳培養(yǎng)箱的使用注意事項。 二氧化碳培養(yǎng)箱的使用注意事項: ?。?)定期檢查超溫安全裝置,以防超溫。方法為按進(jìn)監(jiān)測報警按扭,轉(zhuǎn)動固定螺絲,直到超溫報警裝置響,然后關(guān)閉超溫安全燈?! 。?)所加入的水必須是蒸餾水或無離子水,防止礦物質(zhì)儲積在水箱內(nèi)產(chǎn)生腐蝕作用。每年必須換一次水。經(jīng)常檢查箱內(nèi)水是否夠。 ?。?)箱內(nèi)應(yīng)定期用消毒液擦洗消毒,擱板可取出清洗消毒,防止其它微生物污染,導(dǎo)致實驗失敗。 ?。?)如長期不使用二氧化碳時,應(yīng)將CO2開關(guān)關(guān)閉,防止CO2調(diào)節(jié)器失靈?! 。?)所使用的CO2必須的純凈的,否則降低CO2傳感器的靈敏度和污染CO2過濾裝置 (6)培養(yǎng)箱應(yīng)由專人負(fù)責(zé)管理,操作盤上的任何開關(guān)和調(diào)節(jié)旋扭一旦固定后,不要隨意扭動,以免影響箱內(nèi)溫度,CO2、濕度的波動,同時降低機(jī)器的靈敏度。 ?。?)在無濕度控制的培養(yǎng)箱內(nèi),為保持箱內(nèi)CO2的穩(wěn)定,要在箱內(nèi)底層放入一個盛水的容器。另外還有一種三氣培養(yǎng)箱.該培養(yǎng)箱是在二氧化碳培養(yǎng)箱的基礎(chǔ)上進(jìn)一步改進(jìn)的新產(chǎn)品。其原理同其它培養(yǎng)箱一樣,特點(diǎn)在于不僅可加入CO2,還可加入氮?dú)夂脱鯕?,并全部由電腦控制和調(diào)節(jié)各種不同氣體的含量。主要用于一些特殊微生物的繁殖和培養(yǎng),一般應(yīng)用不廣泛,目前只有國外的少數(shù)廠家生產(chǎn)。
水套式二氧化碳培養(yǎng)箱是在普通培養(yǎng)的基礎(chǔ)上加以改進(jìn),主要是能加入CO2,以滿足培養(yǎng)微生物所需的環(huán)境。主要用于組織培養(yǎng)和一些特殊微生物的培養(yǎng)。
水套式二氧化碳培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),常見于細(xì)胞動力學(xué)研究、哺乳動物細(xì)胞分泌物的收集、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細(xì)胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。
對于細(xì)胞來說,非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,培養(yǎng)箱本身是不會辨別的,而細(xì)胞培養(yǎng)中大部分時間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關(guān)鍵。
水套式二氧化碳培養(yǎng)箱中的主要污染源:細(xì)菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原體、非同種細(xì)胞。
支原體:支原體污染后,因為它們不會使細(xì)胞死亡可以與細(xì)胞長期共存,培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁,細(xì)胞無明顯變化,外觀上給人以正常感覺,實則細(xì)胞已經(jīng)受到多方面潛在影響,如引起細(xì)胞變形,影響DNA合成,抑制細(xì)胞生長等,往往被大多數(shù)實驗者忽視。
細(xì)菌:細(xì)菌污染后,培養(yǎng)基1-2天就會變色,對細(xì)胞生長影響明顯,應(yīng)迅速將污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離,滅菌后丟棄,還要用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺。
病毒:由于病毒寄生生存,爆發(fā)后盡快和正常細(xì)胞隔離,丟棄處理,相對來說容易處理,對操作者威脅較大;盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。
真菌(霉菌和酵母菌):真菌生長的比較慢,不象細(xì)菌那么容易被發(fā)現(xiàn),但是一旦發(fā)現(xiàn)有它的存在細(xì)胞就被污染了;目前沒有好的抑制方法,包括現(xiàn)在常用的兩性霉素,一旦污染容易反復(fù)爆發(fā),尤其孢子很難殺滅。
非同種細(xì)胞:即細(xì)胞交叉污染,由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒有嚴(yán)格分開,往往會使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。
目前,世界上已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染,致使許多實驗宣告無效。
水套式二氧化碳培養(yǎng)箱是通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長環(huán)境如穩(wěn)定的溫度(37°C)、穩(wěn)定的CO2水平(5%)、恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、較高的相對濕度(95%),來對細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。
在生物活體內(nèi),生物體有自身的免疫系統(tǒng)保護(hù)細(xì)胞或組織,但是在體外培養(yǎng)時,沒有任何保護(hù)自己的免疫屏障。對于二氧化碳培養(yǎng)箱的基本參數(shù)溫度、CO2和濕度,大多數(shù)培養(yǎng)箱都能滿足研究實驗的需要。
然而,針對培養(yǎng)過程中面臨的各種污染源,各品牌水套式二氧化碳培養(yǎng)箱的控制方式和效果不盡相同,因此細(xì)胞體外培養(yǎng)中最大的威脅實際上是污染問題。
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