紫外分光光度計就是根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結構和物質間相互作用的有效手段。紫外分光光度計可以在紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。物質的吸收光譜就是物質中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量，相應地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結果。由于各種物質具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量。
紫外可見分光光度計詳細操作流程及校準方法:
一、紫外可見分光光度計光度測量
在模式選擇屏幕中選擇<1.Photometric光度>選項，將顯示參數(shù)配置屏幕;
用GOTOWL鍵設定測量波長;
按F2鍵設定進樣控制;
按START/STOP鍵時，測量開始，顯示測量屏幕;
如需做空白校正，應在測量前先設置空白樣品，然后，按AUTO-ZERO鍵，將測量值置為OABS(100%);
二、紫外可見分光光度計校正
開機預熱10分鐘足矣;
放入黑塊和標樣(沒有的自己配)，關閉蓋子;
校0;
把燈光對著黑塊，把透光度調0;
把燈光對標樣，將吸光度調到100%;
三、參比溶液介紹
參比溶液又稱空白溶液。測量時用作比較的、不含被測物質但其基體盡可能與試樣溶液相似的溶液。通常，用參比溶液掃描的曲線應是一條平坦的直線。有時，基體中，雖不含被測物質，但含有別的物質，這時必須保證其不影響測試。經常碰到的是試劑空白中含有被測物質，此時必須經過純化將其除去。否則將影響測定結果。
四、紫外可見分光光度計使用注意事項
1.開機前應先預熱15分鐘，然后開機自檢;
2.濕度要控制在75%左右，溫度在5～30度之間;
3.儀器要穩(wěn)壓電源，接地要好。并且避免陽光直接照射;
5.常見故障及處理方法：
光門不能完全關閉：修復光門部件，使其完全關閉;
透過率“100%”旋到底了。解決方法：重新調整“100%”旋鈕;
儀器嚴重受潮：可打開光電管暗盒，用電吹風吹上一會兒使其干燥，并更換干燥劑;以上為紫外可見分光光度計的具體操作方法及使用注意事項，希望能給予您幫助。
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分光光度計是一種利用分光光度法對物質進行定量定性分析的儀器，能夠將成分復雜的光線分解成光譜線，在各種科學實驗以及實地測量中發(fā)揮著重要的作用。
分光光度計檢定(測試)主要項目對分析結果的影響
1)波長準確度
分光光度法原理要求照射在樣品池上的單色光必須對應于樣品吸收光譜中的某一個吸收峰的波長。由于儀器的制造和調整誤差，單色光的實際波長與儀器的波長讀數(shù)值間都存在一定的誤差。樣品中絕大部分的主要吸收峰都有一定的寬度，對波長準確度要求允許寬些。但是，當吸收峰寬度較小，而且吸收峰兩側邊緣比較陡直，此時波長準確度的影響就必須引起注意。
2)透射比(吸光度)準確度
很顯然，透射比或吸光度的誤差越大，測試結果的可信性越差，從而影響到測試數(shù)據的準確性。
3)雜散光
雜散光是由于光學元件制造誤差以及光學和機械零件表面的漫反射形成的。雜散光是分析樣品的非吸收光，隨著樣品濃度的增加，雜散光的影響也隨之增大，將給分析結果帶來一定的誤差。在紫外的短波區(qū)域光源強度和檢測器的靈敏度均明顯減弱，雜散光的影響更不能忽視。因此，雜散光的大小也是儀器性能的一項重要指標。
使用與維護：
1)若大幅度改變測試波長，需稍等片刻，等燈熱平衡后，重新校正“0”和“100%”點。然后再測量。
2)指針式儀器在未接通電源時，電表的指針必須位于零刻度上。若不是這種情況，需進行機械調零。
3)比色皿使用完畢后，請立即用蒸餾水沖洗干凈，并用干凈柔軟的紗布將水跡擦去，以防止表面光潔度被破壞，影響比色皿的透光率。
4)操作人員不應輕易動燈泡及反光鏡燈，以免影響光效率。
5)WFZ800-DA、756型等分光光度計，由于其光電接收裝置為光電倍增管，它本身的特點是放大倍數(shù)大，因而可以用于檢測微弱光電信號，而不能用來檢測強光。否則容易產生信號漂移，靈敏度下降。針對其上述特點，在維修、使用此類儀器時應注意不讓光電倍增管長時間暴露于光下，因此在預熱時，應打開比色皿蓋或使用擋光桿，避免長時間照射使其性能漂移而導致工作不穩(wěn)。
6)放大器靈敏度換擋后，必須重新調零。
7)比色皿的配套性問題。比色皿必須配套使用，否則將使測試結果失去意義。在進行每次測試前均應進行比較。具體方法如下;分別向被測的兩只比色皿里注入同樣的溶液，把儀器置于某一波長處，石英比色皿：220nm、700nm裝蒸餾水，玻璃比色皿：700nm處裝蒸餾水，將某一個池的透射比值調至100%，測量其他各池的透射比值，記錄其示值之差及通光方向，如透射比之差在±0.5%的范圍內則可以配套使用，若超出此范圍應考慮其對測試結果的影響。
故障及其排除方法
1)儀器不能調零?？赡茉颍?/p>
a)光門不能完全關閉。解決方法：修復光門部件，使其完全關閉。
b)透過率“100%”旋到底了。解決方法：重新調整“100%”旋鈕。
c)儀器嚴重受潮。解決方法：可打開光電管暗盒，用電吹風吹上一會兒使其干燥，并更換干燥劑。
d)電路故障。解決方法：檢修電路。
2)儀器不能調“100%”?？赡茉颍?/p>
a)光能量不夠。解決方法：增加靈敏度倍率檔位，或更換光源燈(盡管燈還亮)。
b)比色皿架未落位。解決方法：調整比色皿架使其落位。
c)光電轉換部分老化。解決方法：更換部件。
d)電路故障。解決方法：調修電路。
3)測量過程中,“100%”點經常變動?？赡茉颍?/p>
a)比色皿在比色皿架中放置的位置不一致，或其表面有液滴。解決方法：用擦鏡紙擦干凈比色皿表面，然后將其安放在比色槽的左邊，上面用定位夾定位。
b)電路故障(電壓、光電接收、放大電路)，解決方法：送修。
4)數(shù)顯不穩(wěn)?？赡茉颍?/p>
a)預熱時間不夠。
解決方法：延長預熱時間至30分鐘左右(部分儀器由于老化等原因，長時間處于工作狀態(tài)時，也會工作不穩(wěn))。
b)光電管內的干燥劑失效，使微電流放大器受潮。
解決方法：烘烤電路，并更換或烘烤干燥劑。
c)環(huán)境振動過大、光源附近空氣流速大、外界強光照射等。解決方法：改善工作環(huán)境。
d)光電管、電路等其它原因。
操作?注意事項：
1)比色皿架及比色皿在使用中的正確到位問題：
有些使用者對這個問題不夠重視，因操作不當造成偶然誤差，嚴重影響分析結果。首先，應保證比色皿不傾斜放置。稍許傾斜，就會使參比樣品與待測樣品的吸收光徑長度不一致，還可能使入射光不能全部通過樣品池，導致測試比準確度不符合要求。其次，應保證每次測試時，比色皿架推拉到位。若不到位，將影響到測試值的重復性或準確度。最后,還應保證比色皿的清潔度,延長其使用壽命。
2)干燥劑的使用問題。干燥劑失效將導致：
a)數(shù)顯不穩(wěn)、無法調“0”點或“100%”點(電路或光電管受潮)。
b)反射鏡發(fā)霉或沾污，影響光效率、雜散光增加。鑒于上述原因，分光光度計的放置地點應遠離水池等濕度大的地方、干燥劑應定期更換或烘烤。
3)儀器的工作環(huán)境
應避免陽光直射、避免強電場、避免與較大功率的電器設備共電、避開腐蝕性氣體等。
現(xiàn)今，國內大部分的可見分光光度計，紫外可見分光光度計有所改良。隨著行業(yè)的進步，技術改良，部分廠家對于燈源更換問題的重視程度也越來越高，燈源更換也越來越方便簡捷。很多新機型甚至不需要拆下整機外殼，只要打開燈源不為的蓋子就能更換燈源。
分光光度計使用過程中的注意事項：分光光度計使用過程中，在不使用紫外光的情況下可以關閉氘燈（國內很多機型現(xiàn)在都使用的進口氘燈，用的賀利氏的氘燈較多，一般使用壽命在2000小時，國產的氘燈一般壽命在1000小時左右），關閉氘燈的話可以降低氘燈的能量損耗
分光光度計更換過程中的注意事項：
1、 關閉電源
2、 拔除電源線
3、 打開蓋子到燈源部位
4、 如果是分光光度計剛使用結束，要等10分鐘后在進行更換燈源（燈源剛使用完，溫度比較高，防止燙到手）
5、 放電，將電路殘余電壓釋放掉（可以接兩根線到地表完成放電操作）
老款機型鎢燈的更換（主要講國產的）：
1、*點很重要，就是帶上手套，否則會污染鎢燈，如果沒有條件的話也要把手洗干凈，防止手上的污跡污染鎢燈
2、需要量取鎢燈燈絲距離底座的立體位置（簡單的說，距離分光光度計內三個面的位置），可以用游標卡尺量
3、部分鎢燈是可以直接拔的，還有些鎢燈需要用螺絲刀拆卸，也有需要通過扳手旋松的，簡單講述，就是拆下鎢燈，在帶手套的情況下可以直接接觸燈源，未帶手套的情況下，盡量避免接觸燈源，拿的時候可以鎢燈底座的兩個觸角
4、裝鎢燈，先把鎢燈裝上，起初不要把螺絲旋太緊，因為還需要調整位置
5、接下來，第二步做的工作就能用到了。根據第二步測量的位置調整鎢燈，上下左右移動，直到把鎢燈調整到預先測量的位置
說明
氘燈原本在可見區(qū)是沒有能量的，但是卻在656.1nm處出現(xiàn)一條氘燈的特定譜線，當氘燈的發(fā)射光束達到zui佳位置時，這條特殊的譜線峰值也會達到zui高，儀器正是利用這個峰值變化來監(jiān)控氘燈是否調整到zui佳位置的。
6、略微緊固螺絲（切記不要太緊）接入電源，打開開關，看下光斑是否打在了狹縫上，如果未打在狹縫，可以通過緊固左右螺絲來微調光斑的位置
7、鎢燈更換完畢
老款機型氘燈的更換（主要講國產的）：
1、 跟更換鎢燈一樣，就是帶上手套，否則會污染氘燈，如果沒有條件的話也要把手洗干凈，防止手上的污跡污染氘燈，手指避免接觸光源中心發(fā)射空位置
2、 量取發(fā)射孔的立體位置
3、 松開氘燈底座三根引線
4、 旋松螺釘，收向上推氘燈底部
5、 根據之前量取角度拜訪氘燈位置，將放射孔位置調整至之前量取位置
注意事項：
(1) 光源鏡背部的螺釘A為燈光束垂直方向的調整螺釘，該螺釘調整時要兼顧兩個燈的能量，但主要照顧氘燈的能量，因為氘燈的能量是鎢燈的1/5。
(2) 雖然大多情況下僅僅更換一只光源燈，但調整時兩只燈的情況均要兼顧檢查。
(3)調整后要做儀器基線平坦度及噪聲水平的測試，以檢驗調整的效果。
(4)不同的分光儀器的燈室構造可能有所不同，但調整思路基本是一通百通的，本文僅能起到拋磚引玉的作用。
6、 開啟電源，點亮氘燈，調至度數(shù)zui高，旋緊螺釘即可
新款機型鎢燈的更換不帶燈座的步驟同上，帶燈座的，直接安裝，安裝后只要調整螺絲松緊就能調節(jié)光斑，氘燈也是如此 。
光源燈更換后為何要調整？
分光光度計有一個技術指標，稱為“基線噪聲”，也就是“信噪比”，英文表示為S/N；簡單地講信噪比越大測量的結果精度越高。要想達到zui佳信噪比，光源的調 整就凸現(xiàn)重要了；關于這個調整的物理意義，用儀器術語解釋：就是讓光源燈發(fā)出的實際光束與光路理論光軸完全重合。用形象語言解釋：就是讓光源發(fā)出的光束的 zui強點完全照射到儀器單色器的入口狹縫的中央處。
由于安裝光源燈的燈座一般是固定式的，加之每支燈的構造的微小差異，致使其發(fā)射出的光束在三維空 間中的位置也不盡相同；所以更換光源燈后，很難保證光束的zui強點照射到狹縫的中央處，這是客觀存在。為此、*可以補償這一缺憾的辦法就是調整光源鏡的反 射角度。但是對于許多使用者而言，往往不清楚這個調整步驟的重要性。一般來講、含有氘燈和鎢燈兩種光源的儀器的光源鏡均可以調整。
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