色譜柱在使用前,可以進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來(lái),作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。但要注意:柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同;另外,在做柱性能測(cè)試時(shí)是按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是較佳條件),只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。
1、樣品的前處理:
a、可以使用流動(dòng)相溶解樣品。
b、使用予處理柱除去樣品中的強(qiáng)極性或與柱填料產(chǎn)生不可逆吸附的雜質(zhì)。
c、使用0.45?m的過(guò)濾膜過(guò)濾除去微粒雜質(zhì)。
2、流動(dòng)相的配制:
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的,因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn):
a、流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中(或長(zhǎng)時(shí)間保留在柱中)。
b、流動(dòng)相具有一定惰性,與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)(特殊情況除外)。
c、流動(dòng)相的黏度要盡量小,以便在使用較長(zhǎng)的分析柱時(shí)能得到好的分離效果;同時(shí)降低柱壓降,延長(zhǎng)液體泵的使用壽命(可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度)。
d、流動(dòng)相的物化性質(zhì)要與使用的檢測(cè)器相適應(yīng)。如使用UV檢測(cè)器,可以使用對(duì)紫外吸收較低的溶劑配制。
e、流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低,否則容易產(chǎn)生氣泡,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無(wú)法進(jìn)行。
f、在流動(dòng)相配制好后,一定要進(jìn)行脫氣。除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體既有利于檢測(cè),還可以防止流動(dòng)相中的微量氧與樣品發(fā)生作用。
3、流動(dòng)相流速的選擇:
因柱效是柱中流動(dòng)相線性流速的函數(shù),使用不同的流速可得到不同的柱效。對(duì)于一根特定的色譜柱,要追求較佳柱效,可以使用較佳流速。對(duì)內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱,流速一般選擇1ml/min,對(duì)于內(nèi)徑為4.0mm柱,流速0.8ml/min為佳。
當(dāng)選用較佳流速時(shí),分析時(shí)間可能延長(zhǎng)??刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間(如使用反相柱時(shí),可適當(dāng)增加甲醇或乙腈的含量)。
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甲醛檢測(cè)是對(duì)空氣、水、食品、衣物等中甲醛含量的定量檢測(cè)。通過(guò)特定的方法或工具。那么,甲醛的檢測(cè)方法是什么?看看這篇文章的內(nèi)容,你就會(huì)知道甲醛的測(cè)定方法主要包括分光光度法、高效液相色譜儀(高效液相色譜法)、電化學(xué)法、化學(xué)滴定法等。
甲醛分析儀
以下是如何使用高效液相色譜儀(高效液相色譜)檢測(cè)甲醛的簡(jiǎn)介:
高效液相色譜儀甲醛與2,4-二硝基苯肼(DNPH)反應(yīng)生成腙。衍生產(chǎn)物腙用有機(jī)溶劑萃取富集,在一定溫度下蒸發(fā)濃縮,然后用甲醇或乙腈溶解或稀釋,最后進(jìn)行色譜測(cè)定。羅伯特。Kieber等人用四氯化tan提取,用乙腈稀釋,用高效液相色譜儀(高效液相色譜法)分離,在紫外308納米檢測(cè)。該方法的檢出限為0.3μg/L(10nM),其他脂肪醛不干擾測(cè)定。脫氧核糖核酸法檢測(cè)限低;缺點(diǎn)是存在其他醛和酮,并且還與脫氧核糖核酸發(fā)生反應(yīng),這將導(dǎo)致分析時(shí)間延長(zhǎng)并且需要流動(dòng)相梯度
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