實驗室分光光度計是利用分光光度法,通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度,對該物質(zhì)進行定性和定量分析。
不同種類的分光光度計的基本原理相似,都是利用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源。光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,通過測量樣品的吸光值,經(jīng)過計算可以轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
分光光度計采用一個可以產(chǎn)生多個波長的光源,通過系列分光裝置,從而產(chǎn)生特定波長的光源,光源透過測試的樣品后,部分光源被吸收,計算樣品的吸光值,從而轉(zhuǎn)化成樣品的濃度。樣品的吸光值與樣品的濃度成正比。
實驗室分光光度計的使用方法
①首先接通電源,打開電源開關(guān)1,指示燈亮,打開比色皿暗箱蓋8,預(yù)熱20分鐘。②波長選擇旋鈕6,選擇所需的單色光波長,用靈敏度旋鈕2選擇所需的靈敏檔。
③放入比色皿,旋轉(zhuǎn)零位旋鈕5調(diào)零,將比色皿暗箱蓋合上,推進比色皿拉桿3,使參比比色皿處于空白校正位置,使光電管見光,旋轉(zhuǎn)透光率調(diào)節(jié)旋鈕4,使微安表9指針準確處于100%。按上述方法連續(xù)幾次調(diào)整零位和100%位,即可進行測定工作(儀器面板見圖5-6)。
實驗室分光光度計使用和維護中應(yīng)注意事項:
①連續(xù)使用儀器的時間不應(yīng)超過2小時,可以是間歇0.5小時后,再繼續(xù)使用。
②比色皿每次使用完畢后,要用去離子水洗凈并倒置晾干后,存放在比色皿盒內(nèi)。在日常使用中應(yīng)注意保護比色皿的透光面,使其不受損壞或產(chǎn)生劃痕,以免影響透光率。
③儀器不能受潮。在日常使用中,應(yīng)經(jīng)常注意單色器上的防潮硅膠(在儀器的底部)是否變色,如硅膠的顏色已變紅,應(yīng)立即取出烘干或更換。
④在托運或移動儀器時,應(yīng)注意小心輕放。
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相關(guān)熱詞:
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可見分光光度計廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥衛(wèi)生、臨床檢測、生物化學(xué)、石油化工、環(huán)保監(jiān)測、食品生產(chǎn)和質(zhì)量控制等部門作定性、定量分析,還可作為大、專院校和中學(xué)相關(guān)課程的教學(xué)演示和實驗儀器。
分光光度計是目前化驗室中使用比較廣泛的一種分析儀器,其測定原理是利用物質(zhì)對光的選擇性吸收特性,以較純的單色光作為入射光,測定物質(zhì)對光的吸收,從而確定溶液中物質(zhì)的含量。
其特點是靈敏度高;準確度高;測量范圍廣;在一定條件下,可同時測定水樣中兩種或兩種以上的物質(zhì)組分含量等。
分光光度計按其波長范圍可分為可見分光光度計(工作范圍360~800nm)、紫外-可見分光光度計(工作范圍200~1000nm)和紅外分光光度計(工作范圍760~400000nm)等。
可見分光光度計的原理是:
當一束單色光照射待測物質(zhì)的溶液時,當某一定頻率(或波長)的可見光所具有的能量(hf)恰好與待測物質(zhì)分子中的價電子的能級差相適應(yīng)(即ΔE=E2-E1=hf)時,待測物將對該頻率(波長)的可見光產(chǎn)生選擇性的吸收。
用可見分光光度計可以測量和記錄其吸收程度(吸光度)。
由于在一定條件下,吸光度A與待測物質(zhì)的濃度C及吸收地長度l的乘積成正比,即A=KCL,所以,在測得吸光度A后,可采用標準曲線法、比較法以及標準加入法等方法進行定量分析。
可見分光光度計是一種結(jié)構(gòu)簡潔、使用方便的單光束分光光度計,基于樣品對單色光的選擇吸收特性可用于對樣品進行定性和定量分析。
其定量分析根據(jù)相對測量原理工作,即選定樣品的溶劑(或空氣)作為標準試樣,設(shè)定其透射比為100%,被測樣品的透射比則相對于標準試樣(或空氣)而得到;
在一定的濃度范圍,各參量遵循朗伯—比耳定律:A=lg1/T=KCL
T=I/I0
A:吸光度
T:相對于標準試樣的透射比
I:光透過被測樣品后照射到光電傳感器上的強度I0:光透過標準試樣后照射到光電傳感器上的強度
K:樣品溶液的比消光系數(shù)
L:樣品溶液在光路中的長度
C:樣品濃度
原子吸收光譜儀是試驗中常見的儀器,因此實驗室人員應(yīng)該好好的去維護它,以免發(fā)生不必要的故障,造成實驗結(jié)果的不準確
故障排除首先應(yīng)分析原因。儀器故障產(chǎn)生的原因和出現(xiàn)的現(xiàn)象是錯綜復(fù)雜的。必須小心觀察故障現(xiàn)象,認真檢測和細致的分析比較,才能找到故障的所在。下面介紹幾種常見故障的排除方法
1、光源系統(tǒng)故障
A、空心陰極燈點不亮故障原因:燈電源出問題或未接通;燈頭與燈座接觸不良;燈頭接線斷路;燈漏氣。
查處方法:分別檢查電源、連線和插接件;若不是電路問題,再進行換燈檢查。
B、燈陰極輝光顏色異常故障原因:燈內(nèi)惰性氣體不純。
查處方法:在工作電流或大電流(80Ma,150mA)下反向通電處理。
C、燈陰極口外發(fā)光或陰極內(nèi)發(fā)生跳動的火花狀放電故障原因:燈內(nèi)惰性氣體壓力降低不能維持正常放電,后者由陰極表面氧化物或雜質(zhì)所致。
查處方法:前中情況需換新燈;后種情況通過十幾毫安的電流直到火花放電停止,若無效則換新燈。
2、能量輸出方面的故障
A、空心陰極燈亮而高壓開啟后無能量輸出故障原因:無負高壓;空心陰極燈發(fā)光異?;蛭恢貌粚?;波長不準;燃燒器擋光;單色器故障;主機電路故障。
查處方法:第二、三、四種情況易查,第一、五、六種情況需按說明書或維修手冊的規(guī)定逐一處理或聯(lián)系廠家。
B、輸出能量過低故障原因:燈能量弱;光路調(diào)整不佳;透鏡或單色器內(nèi)光學(xué)元件被污染;波長不準;放大電路增益下降;光電倍增管衰老。
查處方法:如果是全波段內(nèi)能量普遍偏低,應(yīng)檢測光電倍增管是否衰老和負高壓是否正常;如果能量低與波長有關(guān),除查看光學(xué)元件有無污染外,還應(yīng)檢查單色器光學(xué)系統(tǒng)有無機械位置變化;如果是因波長示值錯亂,應(yīng)重新校正波長;如果是線路增益問題,需檢查放大板和光電倍增管查處原因。或直接聯(lián)系廠家。
C、工作時能量顯示不變化故障原因:主機電路中前置放大器連接問題;主放大器異常。
查處方法:檢查前置放大器和運算放大器。
D、擋光時能量不為零故障原因:前置放大器組件或主放大器組件失調(diào)或損壞。
查處方法:用萬用表監(jiān)測前置放大器輸出,或更換主放大器上的運算放大器。
3、吸收信號方面的故障
A、零點不對故障原因:空心陰極燈衰老,強度太弱;波長調(diào)節(jié)不準;石英窗口和聚光鏡表面污染。
查處方法:針對具體原因相應(yīng)處理
B、靜態(tài)基線漂移故障原因:光源系統(tǒng)和檢測系統(tǒng)故障。
查處方法:首先查明儀器是否受潮,放置吸潮硅膠儀器通電去潮,一段時間后儀器穩(wěn)定性會逐漸正常。查明儀器單獨“地線”是否良好。任何電磁感應(yīng)都會使儀器產(chǎn)生漂移。元素燈和燈電源的穩(wěn)定性負高壓電源的穩(wěn)定性等都可能導(dǎo)致基線漂移。
C、點火基線漂移故障原因:靜態(tài)基線漂移;原子化系統(tǒng)故障。
查處方法:排除靜態(tài)基線漂移;檢查吸液毛細管有無堵塞和氣泡,廢液排泄是否暢通和霧化室內(nèi)有無積水。氣源壓力不穩(wěn)和燃燒器預(yù)熱不夠均會引起漂移。當然波長不準也會導(dǎo)致漂移。針對具體情況分別加以處理。
D、噪聲大、讀數(shù)不穩(wěn)故障原因:光源系統(tǒng)、原子化系統(tǒng)、分光系統(tǒng)和檢測系統(tǒng)發(fā)生故障。
查處方法:首先區(qū)分故障是來源于原子化系統(tǒng)還是電檢測系統(tǒng)。通過點燃火焰吸噴純水和不點火的情況比較,據(jù)基線穩(wěn)定度就和判斷。
如果判斷故障來源于原子化系統(tǒng),還要進而判斷是來自火焰還是噴霧裝罩,可通過吸噴純水和調(diào)節(jié)噴霧器偉觀察噪聲電平是否明顯減小或消失判斷,否則噪聲可能主要來自火焰??烧{(diào)整燃助比、燃燒器高度和穩(wěn)定氣源壓力來觀察噪聲電平的變化情況。噴霧器是火焰原子化系統(tǒng)噪聲的主要來源。
如果判斷故障主要來自電檢測系統(tǒng),需先區(qū)分出來自燈電源還是檢測系統(tǒng)??墒褂煤细竦你~燈讓儀器和燈充分預(yù)熱,切斷入射光,考察此時的噪聲電平。若正常則故障來自燈電源或元素燈。再進一步檢測燈電源或更換新燈檢查。
如果否定來自燈或燈電源,則需進一步檢查單色器系統(tǒng)和檢測系統(tǒng)。故障現(xiàn)象隨波長而變化,則可判斷故障主要來自單色器系統(tǒng)。單色器內(nèi)部的雜散光、光柵及其他光學(xué)元件表面積聚灰塵、污穢均能使噪聲電平增大。檢測系統(tǒng)是噪聲主要來源之一。需用萬用表和示波器先查清是來自電源供電還是光電倍增管或電路。讀數(shù)不穩(wěn)定表示吸收信號上疊加較大的噪聲。這對測量是不利的。導(dǎo)致讀數(shù)不穩(wěn)定的原因主要來自原子化系統(tǒng),吸液毛細管堵塞,霧化器霧口腐蝕,霧化室內(nèi)積液,空氣和乙炔不純或壓力不穩(wěn),試液基體濃度過大,有沉淀和夾雜物,燃燒器縫口沉積有碳和無機鹽或縫口堵塞而使火焰呈鋸齒形,所有這些情況均影響讀數(shù)穩(wěn)定性。應(yīng)針對具體問題加以檢查排除。
4、靈敏度和檢出限方面的故障
A、靈敏度低的故障原因:儀器工作條件不是較佳;毛細管和節(jié)流嘴相對位置和同心度不佳;撞擊球位置不佳;霧化室內(nèi)積廢液;元素燈質(zhì)劣;線路增益下降;光學(xué)元件積灰塵。
查處方法:需逐一根據(jù)不同問題查處處理。
B、檢出限偏離故障原因:導(dǎo)致靈敏度低的諸項故障;造成噪聲過大和讀數(shù)不穩(wěn)的各項故障。
查處方法:根據(jù)上述有關(guān)方法查處故障。