高效液相色譜法的應(yīng)用遠(yuǎn)遠(yuǎn)廣于氣相色譜法。它廣泛用于合成化學(xué)、石油化學(xué)、生命科學(xué)、臨床化學(xué)、藥物研究、環(huán)境監(jiān)測、食品檢驗(yàn)及法學(xué)檢驗(yàn)等領(lǐng)域。
一. 在食品分析中的應(yīng)用
1.食品營養(yǎng)成分分析：蛋白質(zhì)、氨基酸、糖類、色素、維生素、香料、有機(jī)酸(鄰苯二甲酸、檸檬酸、蘋果酸等)、有機(jī)胺、礦物質(zhì)等;
2.食品添加劑分析：甜味劑、防腐劑、著色劑(合成色素如檸檬黃、莧菜紅、靛藍(lán)、胭脂紅、日落黃、亮藍(lán)等)、抗氧化劑等;
食品污染物分析：霉菌毒素(黃曲霉毒素、黃桿菌毒素、大腸桿菌毒素等)、微量元素、多環(huán)芳烴等。
二. 在環(huán)境分析中的應(yīng)用
多環(huán)芳烴(特別是稠環(huán)芳烴)、農(nóng)藥(如氨基甲酸脂類，反相色譜)殘留等。
三. 在生命科學(xué)中的應(yīng)用
HPLC技術(shù)目前已成為生物化學(xué)家和醫(yī)學(xué)家在分子水平上研究生命科學(xué)、遺傳工程、臨床化學(xué)、分子生物學(xué)等必不可少的工具。其在生化領(lǐng)域的應(yīng)用主要集中于兩個(gè)方面：
1. 低分子量物質(zhì)，如氨基酸、有機(jī)酸、有機(jī)胺、類固醇、卟啉、糖類、維生素等的分離和測定。
2. 高分子量物質(zhì)，如多肽、核糖核酸、蛋白質(zhì)和酶(各種胰島素、激素、細(xì)胞色素、干擾素等)的純化、分離和測定。
過去對這些生物大分子的分離主要依賴于等速電泳、經(jīng)典離子交換色譜等技術(shù)，但都有一定的局限性，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足生物化學(xué)研究的需要。因?yàn)樵谏I(lǐng)域中經(jīng)常要求從復(fù)雜的混合物基質(zhì)，如培養(yǎng)基、發(fā)酵液、體液、組織中對感性趣的物質(zhì)進(jìn)行有效而又特異的分離，通常要求檢測限達(dá)ng級或pg級，或pmol，fmol，并要求重復(fù)性好、快速、自動檢測;制備分離、回收率高且不失活。在這些方面，HPLC具有明顯的優(yōu)勢。
四. 在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中的應(yīng)用
體液中代謝物測定;藥代動力學(xué)研究;臨床藥物監(jiān)測：
1. 合成藥物：抗生素、抗憂郁藥物(冬眠靈、氯丙咪嗪、安定、利眠寧、****等)、黃胺類藥等。
2. 天然藥物生物堿(吲哚堿、顛茄堿、**堿、強(qiáng)心甙)等
五.在無機(jī)分析中的應(yīng)用
陽、陰離子的分析等。
液相色譜操作人員在操作時(shí)應(yīng)該注意的一些事項(xiàng)： 1、作為液相操作人員，一定要認(rèn)真學(xué)習(xí)液相的說明書，掌握液相硬件和軟件的操作，掌握日常的維護(hù)保養(yǎng)，掌握最基礎(chǔ)故障的排除和維修。 一般液相的操作規(guī)程也是有操作人員起草的，所以只要嚴(yán)格按照操作要求進(jìn)行操作，一般不會出現(xiàn)問題。當(dāng)然啫喱需要特別指出的是對于液相的日常維護(hù)保養(yǎng)很重要，比如流動相的過濾、脫氣、泵密封墊的清洗、系統(tǒng)管路的清洗、溶劑過濾頭的清洗等，倘若不堅(jiān)持，很容易導(dǎo)致色譜柱堵塞、系統(tǒng)壓力過大、色譜峰異常等不必要的故障，浪費(fèi)時(shí)間?！ ?、操作人員在配制液相分析用樣品溶液時(shí)，可以由同一個(gè)人單獨(dú)完成，以免不必要的偶然誤差。
液相色譜儀流動相的性質(zhì)要求
公司地址：江西省南昌市解放西路明珠廣場C棟902室，福建省廈門市樂海北里35號403室
南昌捷島科儀專業(yè)生產(chǎn)銷售捷島牌GC1690系列，GC1620系列氣相色譜儀，并代理銷售、培訓(xùn)、維修上海伍豐、沃特世/Waters、安捷倫、島津、上海儀電上分廠、賽默飛世爾等國內(nèi)外知名品牌氣相色譜儀、液相色譜儀及其配件耗材，優(yōu)惠價(jià)格、培訓(xùn)、維修請銷售、培訓(xùn)和維修統(tǒng)一客服，：，歡迎經(jīng)銷商和終端用戶在線或與訂購，謝謝！
一個(gè)理想的液相色譜流動相溶劑應(yīng)具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。
選好填料（固定相）后，強(qiáng)溶劑使溶質(zhì)在填料表面的吸附減少，相應(yīng)的容量因子k降低；而較弱的溶劑使溶質(zhì)在填料表面吸附增加，相應(yīng)的容量因子k升高。因此，k值是流動相組成的函數(shù)。塔板數(shù)N一般與流動相的粘度成反比。所以選擇流動相時(shí)應(yīng)考慮以下幾個(gè)方面：
?、倭鲃酉鄳?yīng)不改變填料的任何性質(zhì)。低交聯(lián)度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時(shí)遇到某些有機(jī)相會溶脹或收縮，從而改變色譜柱填床的性質(zhì)。堿性流動相不能用于硅膠柱系統(tǒng)。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統(tǒng)。
?、诩兌取ＩV柱的壽命與大量流動相通過有關(guān)，特別是當(dāng)溶劑所含雜質(zhì)在柱上積累時(shí)。
?、郾仨毰c檢測器匹配。使用UV檢測器時(shí)，所用流動相在檢測波長下應(yīng)沒有吸收，或吸收很小。當(dāng)使用示差折光檢測器時(shí)，應(yīng)選擇折光系數(shù)與樣品差別較大的溶劑作流動相，以提高靈敏度。
?、苷扯纫停☉?yīng)<2cp）。高粘度溶劑會影響溶質(zhì)的擴(kuò)散、傳質(zhì)，降低柱效，還會使柱壓降增加，使分離時(shí)間延長。選擇沸點(diǎn)在100℃以下的流動相。
?、輰悠返娜芙舛纫m宜。如果溶解度欠佳，樣品會在柱頭沉淀，不但影響了純化分離，且會使柱子惡化。
?、迾悠芬子诨厥?。應(yīng)選用揮發(fā)性溶劑。
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