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聚合物基質色譜柱的規(guī)格選擇 色譜柱技術指標

時間:2020-07-05    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導讀】聚合物基質色譜柱具有相當強的硬度,有無孔和有孔兩種規(guī)格。該固定相中含有苯基官能團,可與待測物發(fā)生疏水相互作用。 與硅膠基質的反相填料相比,PolyRP



    聚合物基質色譜柱具有相當強的硬度,有無孔和有孔兩種規(guī)格。該固定相中含有苯基官能團,可與待測物發(fā)生疏水相互作用。


    與硅膠基質的反相填料相比,PolyRP固定相的一個顯著優(yōu)點是可以在極端pH(1-14)條件下使用,盡管分離效率略有降低。它具有相當強的硬度,有無孔和有孔兩種規(guī)格。

 


    該固定相中含有苯基官能團,可與待測物發(fā)生疏水相互作用。與硅膠基質的反相填料相比,PolyRP固定相的一個顯著優(yōu)點是可以在極端pH(1-14)條件下使用,盡管分離效率略有降低。


    聚合物基質色譜柱的安裝:


    a、拆開柱包裝盒,確認色譜柱的類型、尺寸、出廠日期以及柱內貯存的溶劑。


    b、擰下柱兩端接頭的密封堵頭放回包裝盒供備用。


    c、按柱管上標示的流動相流向,將聚合物基質色譜柱的入口端通過連接管與進樣閥出口相連接(如條件允許,建議在柱前使用保護柱);柱的出口與檢測器連接。連接管是外徑為1.57mm、內徑為0.1-0.3mm的不銹鋼管。


    在接管時一定要設法降低柱外死體積。連接管通過空心螺釘、壓環(huán)后盡量用力插到底,然后順時針擰緊空心螺釘,直到擰不動為止,切記不要用力過大。如聚合物基質色譜柱通過流動相加壓后有漏液現(xiàn)象,請用扳手繼續(xù)順時針擰1/4圈,直至不漏液為止。


    聚合物基質色譜柱主要基質的特點:


    a.硅膠


    硅膠是陶瓷性質的無機物基質,剛性大,不易變形。


    化學性質較穩(wěn)定,但對于水溶液尤其堿性水溶液仍然是不穩(wěn)定的,即使表面經(jīng)過良好的化學鍵合,覆蓋了固定液,還是要注意水、堿性溶液、酸性溶液對硅膠的溶解作用,基質或者說是柱床(packedbed)溶解對色譜柱的影響是致命的。


    以聚合物基質色譜柱的填料構成了目前絕大多數(shù)的色譜柱填料。純硅膠填料適宜分離溶于有機溶劑的極性、弱極性的非強離解型的化合物,硅膠也可以做凝膠色譜但柱效較低。


    聚合物基質色譜柱鍵合固定相的高壓液相填料,有其他填料無法比擬的高分離效能。


    b.二氧化鋁


    二氧化鋁和硅膠相似,但對水溶液、酸性堿性水溶液溶液更加不穩(wěn)定。所以,極少用作鍵合固定相的基質,也是適宜分離溶于有機溶劑的極性、弱極性的非強離解型的化合物,尤其是分離芳香族碳氫化合物。酸性易離解的化合物容易在二氧化鋁上形成死吸附。另外,氧化鋁分離幾何異構體能力優(yōu)于硅膠。


    c.聚合物填料


    聚合物基質色譜柱受壓會變形,壓力限度低但pH使用范圍寬。苯乙烯-二乙烯苯基質疏水性強,使用任何流動相,在整個pH范圍內穩(wěn)定,可以用強酸、強堿來清洗色譜柱。甲基丙烯酸酯基質比苯乙烯-二乙烯苯疏水性更強,但可以通過適當?shù)墓δ芑揎椬兂捎H水性的。


    由于不耐壓、有溶脹性,所以聚合物填料適宜用于大分子像蛋白質或合成的高聚物,另外還可以制成分子排阻、離子交換柱。大孔樹脂實際上主體就是苯乙烯-二乙烯苯聚合物或類似的合成高聚物。


    聚合物基質色譜柱廣泛用于各種不同基質中糖分子、糖醇和其他水溶性物質的分離。可以用來分析有機酸及利巴韋林等物質,可以用來分離樹膠醛糖、阿糖醇等糖類。





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色譜柱種類介紹

  色譜柱色譜儀器中重要組成部分之一,它是分離不可缺少的一部分。因此不同的樣品分類,用到不同的色譜柱。

  色譜柱可簡單分為以下幾類:

  a、根據(jù)分離方式分為:

  (1)正相色譜柱:SIL--磷脂、NH--糖、維生素E,CN--甾類激素。

  (2)反相色譜柱:ODS(C18)、(C8CNTMSPheny1)低分子量化合物。

  (3)離子交換色譜柱等。

  b、根據(jù)所有的擔體材料分為三種:

  (1)硅膠型:機械強度高,易制成小顆粒,理論塔板數(shù)高。

  (2)聚合物型:在廣泛的PH值范圍內穩(wěn)定。

  (3)羥基磷灰石型:對蛋白質等生物高分子樣品有特殊的選擇性。

標簽: 色譜柱
色譜柱 色譜柱種類介紹_色譜柱

色譜柱的使用和維護

  在日常分離分析工作中,色譜柱的正確使用和維護十分重要,色譜柱使用是否得當,直接影響色譜柱的壽命,稍有不慎就會降低柱效、縮短使用壽命甚至損壞。在色譜操縱過程中,需要留意下列題目,以維護色譜柱。

  (1)柱子在裝卸、更換時,動作要輕,接頭擰緊要適度。必須防止較強的機械振動,以免柱床產生空隙。

  (2)假如儀器用來做常規(guī)分析,樣品種類有限,但分析次數(shù)多,則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根專用柱,這樣有助于延長柱子的壽命。

  (3)避免壓力和溫度的急劇變化及任何機械震動。溫度的忽然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的忽然升高或降低也會沖動柱內填料,因此在調節(jié)流速時應該緩慢進行,在閥進樣時閥的轉動不能過緩。

  (4)應逐漸改變溶劑的組成,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?,反之亦然?/p>

  (5)如使用柱溫控制裝置時,應留意在通人活動相后才能升溫。

  (6)一般說來色譜柱不能反沖,只有生產者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除往留在柱頭的雜質。否則反沖會迅速降低柱效。

  (7)選擇使用適宜的活動相,以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一個預柱,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠,可使活動相在進進分析柱之前預先被硅膠“飽和”,避免分析柱中的硅膠基質被溶解。

  (8)避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內,需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一個保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經(jīng)常更換。

  (9)經(jīng)常用強溶劑沖洗色譜柱,清除保存在柱內的雜質。在進行清洗時,對流路系統(tǒng)中活動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡,每種活動相的體積應是柱體積的20倍左右,即常規(guī)分析需要50-75mL。

  (10)保存色譜柱時應將柱內布滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發(fā)干燥。盡對禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。

  (11)色譜柱使用過程中,假如壓力升高,一種可能是燒結濾片被堵塞,這時應更換濾片或將其取出進行清洗;另一種可能是大分子進人柱內,使柱頭被污染;假如柱效降低或色譜峰變形,則可能柱頭出現(xiàn)塌陷,死體積增大。

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色譜柱 色譜柱的使用和維護_色譜柱

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