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設(shè)定培養(yǎng)細(xì)胞離心機(jī)的離心力 離心機(jī)常見(jiàn)問(wèn)題解決方法

時(shí)間:2020-07-06    來(lái)源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     
【導(dǎo)讀】離心機(jī)是借離心力分離液相非均一體系的設(shè)備。根據(jù)物質(zhì)的沉降系數(shù)、質(zhì)量、密度等的不同,應(yīng)用強(qiáng)大的離心力使物質(zhì)分離、濃縮和提純的方法稱(chēng)為離心。一般說(shuō),? 離心機(jī)轉(zhuǎn)速在20000r/min以上的稱(chēng)為超速離

離心機(jī)是借離心力分離液相非均一體系的設(shè)備。根據(jù)物質(zhì)的沉降系數(shù)、質(zhì)量、密度等的不同,應(yīng)用強(qiáng)大的離心力使物質(zhì)分離、濃縮和提純的方法稱(chēng)為離心。一般說(shuō),? 離心機(jī)轉(zhuǎn)速在20000r/min以上的稱(chēng)為超速離心機(jī)。離心技術(shù),特別是超速離心技術(shù)是分子生物學(xué)、生物化學(xué)研究和工業(yè)生產(chǎn)中不可缺少的手段。

1924年T.Svedberg和Rinde研制出世界上第一臺(tái)渦輪超速離心機(jī)以來(lái),發(fā)展非常迅速,現(xiàn)在已廣泛地應(yīng)用到科學(xué)研究和生產(chǎn)的各個(gè)領(lǐng)域。現(xiàn)在離心機(jī)轉(zhuǎn)頭最高轉(zhuǎn)速已達(dá)100000r/min,最大離心力達(dá)700000g。

離心機(jī)作為一種手段,具有許多優(yōu)點(diǎn)。例如,超速離心機(jī)可在低溫下操作,保護(hù)了生物大分子的活性。制備型的離心機(jī)負(fù)載量大,一次可分離提純幾克樣品,比層析、

電泳上的樣品量大得多。分析離心機(jī)不僅可測(cè)物質(zhì)的分子量,還可檢驗(yàn)物質(zhì)的純度、構(gòu)象、沉降系數(shù)等。因此離心技術(shù)在生物學(xué)研究中占有重要的地位,是分離、純

化細(xì)胞、病毒、蛋白、核酸和酶的較為方便比較有效的工具。

(二)離心機(jī)原理

當(dāng)含有細(xì)小顆粒的懸浮液靜置不動(dòng)時(shí),由于重力場(chǎng)的作用使得懸浮的顆粒逐漸下沉。粒子越重,下沉越快,反之密度比液體小的粒子就會(huì)上浮。微粒在重力場(chǎng)下移

動(dòng)的速度與微粒的大小、形態(tài)和密度有關(guān),并且又與重力場(chǎng)的強(qiáng)度及液體的粘度有關(guān)。象紅血球大小的顆粒,直徑為數(shù)微米,就可以在通常重力作用下觀察到它們的

沉降過(guò)程。

此外,物質(zhì)在介質(zhì)中沉降時(shí)還伴隨有擴(kuò)散現(xiàn)象。擴(kuò)散是無(wú)條件的絕對(duì)的。擴(kuò)散與物質(zhì)的質(zhì)量成反比,顆粒越小擴(kuò)散越嚴(yán)重。而沉降是相對(duì)的,有條件的,要受到外力

才能運(yùn)動(dòng)。沉降與物體重量成正比,顆粒越大沉降越快。對(duì)小于幾微米的微粒如病毒或蛋白質(zhì)等,它們?cè)谌芤褐谐赡z體或半膠體狀態(tài),僅僅利用重力是不可能觀察到

沉降過(guò)程的。因?yàn)轭w粒越小沉降越慢,而擴(kuò)散現(xiàn)象則越嚴(yán)重。所以需要利用離心機(jī)產(chǎn)生強(qiáng)大的離心力,才能迫使這些微??朔U(kuò)散產(chǎn)生沉降運(yùn)動(dòng)。

離心就是利用離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)大的離心力,加快液體中顆粒的沉降速度,把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離開(kāi)。離心力(F)的大小取決于離心轉(zhuǎn)頭的角速度(ω,r/min)和物質(zhì)顆粒距離心軸的距離(r,cm)。它們的關(guān)系是:F=ω2R

為方便起見(jiàn),F(xiàn)常用相對(duì)離心力也就是地心引力的倍數(shù)表示。即把F值除以重力加速度g(約等于9.8m/s2.)得到離心力是重力的多少倍,稱(chēng)作多少個(gè)g。例如離心機(jī)轉(zhuǎn)頭平均半徑是6cm,當(dāng)轉(zhuǎn)速是60000

r/min時(shí),離心力是240000×g,表示此時(shí)作用在被離心物質(zhì)上的離心力是日常地心引力的24萬(wàn)倍。

因此,轉(zhuǎn)速r/min和離心力g值之間并不是成正比關(guān)系,還和半徑有關(guān)。同樣的轉(zhuǎn)速,半徑大一倍,離心力(g值)也大一倍。轉(zhuǎn)速(r/min)和離心力(g值)之間的關(guān)系可用下式換算:

式中:r為半徑(cm),g為離心力(g值)

(三)超速離心機(jī)的離心方法

用離心方法分離生物大分子和亞細(xì)胞物質(zhì)的基本原理是根據(jù)它們?cè)谝后w介質(zhì)中或者沉降速度不同而形成不同的區(qū)帶,或者它們的密度不同而停留在液體介質(zhì)中不同的位置而把它們一一分開(kāi)。前者是沉降速度法,應(yīng)用該法時(shí)液體介質(zhì)的最大密度要小于樣品中最小顆粒的密度,離心時(shí)選用高轉(zhuǎn)速和短時(shí)間;后者是沉降平衡法,應(yīng)用該法時(shí)液體介質(zhì)的最大密度要大于樣品中最小顆粒的密度,離心時(shí)選用較低轉(zhuǎn)速和較長(zhǎng)時(shí)間。實(shí)際操作有幾種形式:

1.差速離心這種方法是選擇不同轉(zhuǎn)速的離心,分別分離各個(gè)不同組分。例如先用低速沉降大顆粒和上清液,在高速離心上清沉降中等顆粒,最后超速離心上清沉降小顆粒。采用逐級(jí)提高離心力分離上情液的方法,把不同大小的顆粒分開(kāi)。

這種方法比較簡(jiǎn)單,方便。分離的組份沉到管底,因此可以迅速濃縮所要的組份,減少體積。但回收率和純度是有矛盾的,要提高回收率,勢(shì)必提高轉(zhuǎn)速或延長(zhǎng)離心時(shí)間,這樣大小相近的顆粒也會(huì)沉到管底。因此該法多用于粗提純或初步濃縮樣品。

2.速度區(qū)帶(或速度梯度)離心本法是將樣品放在一個(gè)連續(xù)的密度梯度液體上,通過(guò)離心,大顆粒沉降快,小顆粒沉降慢。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間,相同的顆粒就在同一深度

形成一條帶子,因此把各種組份分開(kāi)來(lái)。它適用于分離密度相同、而大小不同的物質(zhì),如不同的蛋白質(zhì)組份密度都差不多,但分子量不一樣,用本法很容易將其分

開(kāi)。但對(duì)密度不同、大小類(lèi)似的物質(zhì)則不易分離。

蔗糖梯度是一種常用的介質(zhì)。用不同濃度的蔗糖溶液(5%-60%)配成梯度,用于梯度離心。再分別進(jìn)行收集處于不同區(qū)帶里的各個(gè)組份。

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相關(guān)熱詞:

等離子清洗機(jī),反應(yīng)釜,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,高精度溫濕度計(jì),露點(diǎn)儀,高效液相色譜儀價(jià)格,霉菌試驗(yàn)箱,跌落試驗(yàn)臺(tái),離子色譜儀價(jià)格,噪聲計(jì),高壓滅菌器,集菌儀,接地電阻測(cè)試儀型號(hào),柱溫箱,旋渦混合儀,電熱套,場(chǎng)強(qiáng)儀萬(wàn)能材料試驗(yàn)機(jī)價(jià)格,洗瓶機(jī),勻漿機(jī),耐候試驗(yàn)箱,熔融指數(shù)儀,透射電子顯微鏡。



    為什么高速離心機(jī)電機(jī)會(huì)發(fā)熱有可能原因是:

    1、第一種:散熱風(fēng)扇等出現(xiàn)了問(wèn)題

    也可能是離心發(fā)生了過(guò)載或超載現(xiàn)象,還可能是機(jī)械摩擦所產(chǎn)生的熱量,但最主要的原因就是離心機(jī)的軸承是否高質(zhì)量,如果用戶(hù)為了省錢(qián)而選擇了便宜低質(zhì)量的軸承,這樣的軸承就很容易會(huì)發(fā)熱,甚至還可能出現(xiàn)軸承燒毀短軸等嚴(yán)重實(shí)驗(yàn)室事故。所以,一定要選擇較好質(zhì)量的品牌軸承,不能貪圖便宜而選擇廉價(jià)的產(chǎn)品。即使是同一種的品牌,它的產(chǎn)地不同,質(zhì)量也可能會(huì)大不相同。

    2、第二種:要留意電機(jī)潤(rùn)滑情況

    選用優(yōu)品質(zhì)的高溫鋰基脂,鋰基脂的好差也是導(dǎo)致軸承發(fā)熱的另一個(gè)主要原因。同時(shí),我們要細(xì)致的進(jìn)行觀察,如果機(jī)械發(fā)生摩擦還伴有噪音,而且機(jī)械部件會(huì)產(chǎn)生明顯的磨損,這就說(shuō)明軸承已經(jīng)出現(xiàn)了問(wèn)題,這時(shí)就需要更換新的軸承。所以,建議人們購(gòu)買(mǎi)品牌的軸承,可以是進(jìn)口軸承,離心機(jī)是屬于高轉(zhuǎn)速的設(shè)備,高轉(zhuǎn)速就是要配備好的軸承,優(yōu)質(zhì)的軸承才能夠保證離心機(jī)的長(zhǎng)期正常運(yùn)轉(zhuǎn)。

    3、第三種:臺(tái)式高速離心機(jī)主軸同心度是否精確對(duì)準(zhǔn)

    一般情況下,人們都不會(huì)去留意同心度,如果主軸的同心度傾向大就很容易造成軸承發(fā)熱,會(huì)讓高速離心機(jī)在運(yùn)行中產(chǎn)生噪音








    高速離心機(jī)屬常規(guī)實(shí)驗(yàn)室離心機(jī),廣泛用于生物,化學(xué),醫(yī)藥等科研教育和生產(chǎn)部門(mén) ,適用于微量樣品快速分離合成。

 


    高速離心機(jī)的劃分


    速度的劃分線為10000r/min-30000r/min,離心機(jī)轉(zhuǎn)速≥10000r/min的稱(chēng)為高速離心機(jī);轉(zhuǎn)速<10000r/min的稱(chēng)為。所以所有的高速離心機(jī)轉(zhuǎn)速都是在10000r/min以上。


    高速離心機(jī)轉(zhuǎn)速可達(dá)10000rpm以上,具有常溫高速離心機(jī)和高速冷凍離心機(jī)。離心管為具蓋聚乙烯硬塑料制品。這類(lèi)離心機(jī)多用于收集微生物、細(xì)胞碎片、細(xì)胞、大的細(xì)胞器、硫酸沉淀物以及免疫沉淀物等。


    高速離心機(jī)主要工作原理


    高速離心機(jī)就是利用高速離心機(jī)轉(zhuǎn)子高速旋轉(zhuǎn)產(chǎn)生的強(qiáng)大的離心力,加快液體中顆粒的沉降速度,把樣品中不同沉降系數(shù)和浮力密度的物質(zhì)分離開(kāi), 從而回收需要的固體或者液體。也就是說(shuō),高速離心機(jī)可以分離比重差較小的固液混合物。


    從液體混合物中提煉出需要的成分,根據(jù)每種物質(zhì)的密度不同,經(jīng)過(guò)高速旋轉(zhuǎn),密度大的液體沉在底層,密度小的液體浮在上面,這樣就將液體分層,提煉出我所需要的純凈物。它應(yīng)用于醫(yī)藥、化工等許多領(lǐng)域。


    高速離心機(jī)轉(zhuǎn)子種類(lèi):常有角轉(zhuǎn)子、甩平轉(zhuǎn)子、水平插入式轉(zhuǎn)頭、連續(xù)離心轉(zhuǎn)頭等種類(lèi)。高速離心機(jī)的離心管通常以塑料及聚丙烯、聚乙烯、聚碳酸酯或硼硅酸玻璃、硼硅酸塑料等制成。實(shí)際工作中可按照不同的要求選擇使用各種離心管。


    小容量臺(tái)式高速離心機(jī),機(jī)型輕小,操作方便,樣品量小,離心力大,自動(dòng)平衡,速度可調(diào),性能穩(wěn)定,安全可靠??煞旁谝话銓?shí)驗(yàn)臺(tái)、冷庫(kù)、低溫冰箱中使用,適用于實(shí)驗(yàn)室小量樣品液沉淀濃縮,是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中使用的基本設(shè)備。


    高速離心機(jī)操規(guī)程


    1. 臺(tái)式高速離心機(jī)的工作臺(tái)應(yīng)平整堅(jiān)固,四只橡膠機(jī)腳都應(yīng)與臺(tái)面接觸和均勻受力,以免產(chǎn)生振動(dòng)。


    2.臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)應(yīng)使用獨(dú)立的插座,保證電壓穩(wěn)定;如用戶(hù)電壓不穩(wěn)定,必須連接穩(wěn)壓電源,以免損壞臺(tái)式高速冷凍離心機(jī);臺(tái)式離心機(jī)要放在結(jié)實(shí)、穩(wěn)固、水平的臺(tái)面上,機(jī)箱周?chē)粲幸欢臻g,保持通風(fēng)良好。


    3.打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),批示燈亮。


    4.裝放稱(chēng)量一致的試管, 離心管加液盡可能目測(cè)均勻(有條件可以采用智能配平儀和天平),若加液差異過(guò)大,運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)會(huì)產(chǎn)生大的振動(dòng),此時(shí)應(yīng)停機(jī)檢查,使加液符合要求,離心試管必須成偶數(shù)對(duì)稱(chēng)放人。


    5.離心機(jī)在運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí),不得移動(dòng)離心機(jī)。門(mén)蓋上不能放任何物品,防止門(mén)蓋自動(dòng)打開(kāi)時(shí)損壞門(mén)蓋上物品。


    6. 若運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)有離心試管破裂,會(huì)引起較大振動(dòng),應(yīng)立即停機(jī)處理。


    7. 電源必須有接地線,以確保離心機(jī)通過(guò)電源插座有效接地。


    8.關(guān)電源開(kāi)關(guān)。


    9.開(kāi)啟離心蓋,將內(nèi)腔及轉(zhuǎn)頭擦拭干凈。


    10.關(guān)閉離心蓋。


    11.設(shè)定定時(shí)


    12.打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)


    13.調(diào)節(jié)調(diào)速旋鈕置于所需轉(zhuǎn)速。


    14.每次停機(jī)前。必須將調(diào)速旋鈕置于最小位置。定時(shí)器置零。再關(guān)電源開(kāi)關(guān)。


    15.擦試內(nèi)腔及轉(zhuǎn)頭。關(guān)閉離心蓋。


    16.工作間應(yīng)整齊清潔,干燥并通風(fēng)良好。


    17.每次使用臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)后,血庫(kù)專(zhuān)用臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)尤其是冷凍型號(hào),應(yīng)打開(kāi)蓋子,擦去冷凝水,然后自然晾干;離心前后,轉(zhuǎn)頭必須輕輕垂直放下或提起,避免碰撞轉(zhuǎn)軸和轉(zhuǎn)頭本身。


    18.使用中性清洗劑,如肥皂水,清洗臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)灰塵及殘余樣品,但有毒及放射性物質(zhì)應(yīng)特殊處理。


    19. 緊急開(kāi)蓋:若出現(xiàn)打不開(kāi)蓋的情況,可手動(dòng)開(kāi)蓋


    20.轉(zhuǎn)子,吊籃,套管等,使用完畢后,應(yīng)擦干,并分別放。


    21.如離心過(guò)程中發(fā)生玻璃管破碎,應(yīng)把離心機(jī)腔體,醫(yī)用血庫(kù)離心機(jī)套管等處碎屑清除干凈,否則會(huì)損傷離心機(jī)??稍谇惑w上部涂一層凡士林,放轉(zhuǎn)子運(yùn)行數(shù)分鐘,碎屑即很容易與凡士林一起清除。


    22. 操作者安全事項(xiàng):轉(zhuǎn)頭應(yīng)固定在準(zhǔn)確位置,固定螺絲應(yīng)擰緊,轉(zhuǎn)頭等配件是否有裂縫及腐蝕,地線接觸情況。


    離心機(jī)是一種在離心力的作用下進(jìn)行固液、液液或固液液相分離的機(jī)械,轉(zhuǎn)子是離心機(jī)的主要部件,多采用用鈦合金或鋁合金制成,其安裝在高速旋轉(zhuǎn)的豎直或水平軸上,在離心力的作用下實(shí)現(xiàn)分離,可用于離心分離、離心過(guò)濾和離心沉降的分離操作。分離因數(shù)是離心機(jī)分離性能的主要指標(biāo),是物料所受的離心力與重力的比值,等于離心加速度與重力加速度的比值。







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