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如何提高色譜儀的靈敏度及操作規(guī)程

時間:2020-04-05    來源:儀多多儀器網(wǎng)    作者:儀多多商城     

如何提高色譜儀的靈敏度

  使用的氣相色譜儀特點不同,提高檢測器靈敏度的有效手段不同。那么如何提高產(chǎn)品的靈敏度呢?
  1、在不分流進樣和直接進樣時使用:
  這種方法需要調(diào)節(jié)柱溫箱,與前者不同的地方是溶劑和分析化合物必須同時在進樣時在較冷的色譜柱上冷卻凝結(jié);
  這些凝結(jié)的樣品在色譜柱表面形成“樣品泛濫帶”(floodedzone);
  當溶劑逐漸揮發(fā)時,樣品泛濫帶的面積就逐漸縮小,“樣品泛濫帶”分析物的濃度就漸漸增加。
  等到溶劑完全揮發(fā)后,分析物就在很小的柱表面范圍上凝結(jié)。
  2、當不分流進樣時,液體的樣品揮發(fā)后,在較冷的色譜柱上冷卻凝結(jié):
  載氣的體積比液體大很多,所以,當樣品冷凝結(jié)時,樣品就濃縮在色譜柱的一個小范圍內(nèi)。
  所以說不論哪種方法,分析物或是溶劑和分析物必須在柱子的小面積上凝結(jié)。
  影響樣品在色譜柱上凝結(jié)速度的因素有:
  色譜柱的初始柱溫,溶劑的揮發(fā)性,還有就是色譜柱固定相的比例。
  色譜柱柱溫的初始溫度:
  1.基本是比較容易也是較快做到的方法,一般說來初始溫度愈低的話,分析物凝結(jié)的愈好。
  2.建議初始溫度建議設(shè)在比較快出峰分析物的沸點低攝氏50度左右,溫度保持的時間建議就是非分流的保持時間。
  第二個重要的因素:
  色譜柱“固定相比例”(phaseratio):
  愈低的固定相比例,意味著越厚的膜厚,膜越厚樣品和溶劑越容易溶解在固定相。要改變此因素,也只能試試不同的柱子。這是當改變初始溫度不可能達到的時候使用的方法。
  最后一個可以改變的因素就是樣品本身:
  大部分時候,樣品本身沒法改變,但是,可以使用不同的溶劑以增加其效果,例如,溶劑的沸點與初始溫度的差別愈大愈好,例如,柱溫初始溫度是攝氏30度時,樣品使用的溶劑是乙酸乙酯(沸點攝氏77.1度)會比使用二氯甲烷溶劑好(沸點攝氏39度)。

標簽: 色譜儀
色譜儀 如何提高色譜儀的靈敏度_色譜儀

高速逆流色譜儀原理特點及應(yīng)用

    高速逆流色譜法于1982年由美國國立衛(wèi)生院Ito博士研制開發(fā)的一種新型的、連續(xù)高效的液液分配色譜技術(shù),與其它色譜技術(shù)不同的是它不需任何固態(tài)載體,因此能避免固相載體表面與樣品發(fā)生反應(yīng)而導(dǎo)致樣品的污染、失活、變性和不可逆吸附等不良影響。

 


    同時它也具有適用范圍廣、快速、進樣量大、費用低、回收率高等優(yōu)點。因此,己在生物、醫(yī)藥、食品、材料、化妝品和環(huán)保等領(lǐng)域獲得了廣泛的應(yīng)用,尤其是在天然產(chǎn)物活性成分的分離純化領(lǐng)域倍受重視。


    高速逆流色譜儀原理及特點


    HSCCC利用了一種特殊的流體動力學(xué)(單向流體動力學(xué)平衡)現(xiàn)象。具體表現(xiàn)為一根100多米長的螺旋空管,注入互不相溶的兩相溶劑中的一相作為固定相,然后作行星運動;同時不斷注入另一相(流動相),由于行星運動產(chǎn)生的離心力場使得固定相保留在螺旋管內(nèi),流動相則不斷穿透固定相;這樣兩相溶劑在螺旋管中實現(xiàn)高效的接觸、混合、分配和傳遞。由于樣品中各組分在兩相中的分配比不同,因而能使樣品中各組分得到分離。


    重現(xiàn)性好。如果樣品不具有較強的表面活性作用,酸堿性也不強,那么多次進樣,其分離過程穩(wěn)定性都保持很好、峰的保留相對標準偏差也小于2%,重現(xiàn)性相當好。


    應(yīng)用領(lǐng)域:


    (1)天然產(chǎn)物已知有效成分的分離純化


    (2)化學(xué)合成物質(zhì)的分離純化


    (3)中藥一類、五類新藥的開發(fā)


    (4)中藥指紋圖譜和質(zhì)量控制研究


    (5)抗生素的分離純化


    (6)天然產(chǎn)物未知有效成分的分離純化(新化合物開發(fā))


    (7)海洋生物活性成分的分離純化


    (8)放射性同位素分離


    (9)多肽和蛋白質(zhì)等生物大分子分離以及手性分離等


    應(yīng)用范圍廣,適應(yīng)性好。由于溶劑系統(tǒng)的組成與配比可以是無限多的,因而從理論上講HSCCC適用于任何極性范圍的樣品的分離,所以在分離天然化合物方面具有其獨到之處。并因不需固體載體,而消除了氣液色譜中由于使用載體而帶來的吸附現(xiàn)象,特別適用于分離極性物質(zhì)和其它具有生物活性的物質(zhì)。

標簽: 色譜儀
色譜儀 高速逆流色譜儀原理特點及應(yīng)用_色譜儀

色譜儀的維護與保養(yǎng)

    我們不應(yīng)該在儀器有故障反映時才想到應(yīng)該對儀器進行維護,不僅要定期有目的地做,還要樹立一個觀念 ,維護與保養(yǎng)的一個重要作用就是保障保證一個良好的檢測狀態(tài),確保得到準確的檢測數(shù)據(jù),影響分析儀器的可持續(xù)運行有因素主要有:


    1.易損件清理更換不及時;


    2.硬件使用不科學(xué);


    3.儀器本身選購及配置不當;


    各種分析儀器從結(jié)構(gòu)、功能、應(yīng)用各方面差別極大,但是經(jīng)常出的問題以及維護保養(yǎng)的方向還是有一定的共性。這種共性就是:“儀器本身各個固定部件很少出問題,只有使用者經(jīng)常接觸到的地方才容易出故障”。


    下面分別就氣相色譜儀的常見故障及常用維護:


    1.jpg


    在使用氣相色譜儀時(以下主要以配有分流進樣口和氫火焰檢測器的氣相色譜儀為例),使用者經(jīng)常做的對儀器結(jié)構(gòu)有改變的行為莫過于換柱了,雖然換柱和扎針一樣,都是氣相色譜工作者的基本功,但是,至少有一半的問題與之相關(guān)。


    問題1:漏氣


    進樣墊漏氣,接柱的固定螺絲漏氣,尤其是使用填充柱而又采用硅石墨墊更會如此。如果用橡膠圈好些,但是不需用,需要定期更換。毛細柱由于采用石墨墊圈則漏氣問題相對好些。


    問題2:固定位置不準:


    這是制約靈敏度的一個關(guān)鍵點。填充柱由于是剛性的,尺寸形狀固定,在換裝時,一般容易掌握。常出問題的是毛細柱,由于其本身柔性,在進樣口和檢測器內(nèi)的長度完全由使用者個人掌握,如果把握不準,會成為制約實驗效果的一個重要因素。不同公司儀器的裝柱尺寸是不同的,在使用不同襯管時也有很大區(qū)別。有些儀器提供了專用的測量工具,有些則沒有。


    問題3:清理更換不及時:


    這是硬件無故障而檢測狀態(tài)不好的主要原因,其具體表現(xiàn)就是污染,如,進樣口襯管及玻璃棉污染,柱內(nèi)污染,檢測器污染,如果不及時更換或清洗,會造成基線不穩(wěn),靈敏度下降等現(xiàn)象。


    對策:


    定期清洗,定期更換,用檢漏液測漏,是常用但不是zui好的處理方法。我覺得,zui好的方法是狀態(tài)監(jiān)控,時刻觀察系統(tǒng)狀態(tài),發(fā)現(xiàn)問題馬上判斷問題再處理問題。同一臺機,同一根柱,在同流量,同柱頭壓下,應(yīng)該有基本一致的信號基線和差不多的穩(wěn)定時間,儀器狀態(tài)的不同問題會有各種不同的反映。


    例 1 : 裝柱后,通上一定的流量,柱頭壓和平時不一樣。如果柱頭壓明顯比平時高,可能是柱頭堵塞。如果低,可能是漏氣或柱斷裂,漏氣可以在關(guān)閉柱箱風(fēng)扇后應(yīng)該能聽到聲音,柱斷裂可以很容易看出來。


    例 2: 流量正常,柱頭壓正常,但基線信號明顯地低且穩(wěn)定奇快。這種現(xiàn)象在使用毛細柱時常發(fā)生,原因多半就是噴嘴堵塞。確定是否這個原因的方法就是進空白溶劑,如果信號比平時低了很多,而且出峰時間又晚了一些,就基本就是這個原因,這時只能關(guān)機清洗。


    例 3 : 流量正常,柱頭壓正常,在三溫(OVEN,INJ,DET)到達設(shè)定值后,但基線信號明顯地偏高且不穩(wěn)定。這種情況多是污染。污染又分:進樣口污染,柱污染,檢測器污染。確定是哪一種故障并不容易(有時還是交叉反應(yīng)),但是處理方法卻一致:停機-清洗-升溫烤。我建議每次清洗zui好把檢測器和進樣口都處理一下,畢竟最耗時間的是降溫升溫。

標簽: 色譜儀
色譜儀 色譜儀的維護與保養(yǎng)_色譜儀

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