可見分光光度計(又名可見光度計、分光光度計)是可見光分光光度法是上海美析儀器采用新的單片機技術,開發(fā)出能夠進行定量測量(標準曲線測量,可對物質進行濃度直讀);OD值直接測量(吸光度、透過率和能量等直讀);動力學測試(測出物質濃度隨時間變化OD值的變化);光譜掃描(可以對某一種物質進行全波段掃描,分析物質的特征波長,判斷實驗過程的誤差);多波長測試(可以對物質同時進行多個波長的測試,分析物質的相關特性);還有可以進行DNA/蛋白質測試、總磷總氮測試、重金屬測試、農(nóng)藥殘留測試、食品安全檢測、熱力發(fā)電金屬離子測試等等,廣泛應用于食品、藥品、電力、生物研究、教學科研、化學化工、質量監(jiān)督、水質環(huán)保和商檢等各大領域。V-1500PC型可見分光光度計,波長范圍:320nm-1100nm,能滿足不同物質的測試。
可見分光光度計的使用注意事項:
一、把電源線連接好,建議使儀器的電源具備接地功能;
二、接通電源后,按動開機開關,然后讓儀器預熱至少20分鐘,儀器會自動校正,然后顯示546.0nm 0.000A說明自檢結束,就可以開始測試;
三、使用“方式”鍵測試的方式,再根據(jù)自己要測量的結果選透光率、吸光度、和濃度的測試;
四、要對波長進行分析,選擇按鍵6,然后按提示依次進行;
五、把樣品溶液和要測定的溶液各自倒入比色皿中后,然后打開樣品蓋,把盛著溶液的比色皿插入另一個比色皿中,最后蓋好樣品蓋;
六、把參比的溶液拉到光路中按住“OABS/100%T”鍵,這時的顯示器會顯示出BLANKING,,直到最后顯示出“100%T”或者是“0.000A”為止;
七、最后儀器顯示出“100%T”或者是“0.000A”即可結束測試。這時被測樣品的透光度、吸光度等參數(shù)就可直接讀出;
八、可見分光光度計使用完畢,關上電源,取出比色皿洗凈,樣品室用軟布或軟紙擦凈。
雙光束紫外-可見分光光度計(以下簡稱儀器),系指從單色器發(fā)出的單色光經(jīng)光束開關(斬光器)分成為樣品和參比兩條光束結構的儀器。
它能消除光源不穩(wěn)和放大器增益變化的影響,并能自動記錄和掃描物質的吸收光譜圖。
儀器在開機后通常會做一些自檢,但仍應按本規(guī)程進行檢定。儀器的波長范圍包括195~800nm,狹縫為0.1~5nm可調(diào)。
工作原理
紫外可見分光光度法是利用物質分子對紫外可見光譜區(qū)的輻射的吸收來進行分析的一種儀器分析方法。
這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價電子能級的躍遷,它廣泛用于無機和有機物質的定性和定量分析。
朗伯一一比耳定律(Lambet-Beer)是光吸收的基本定律,俗稱光吸收定律,是分光光度法定量分析的依據(jù)和基礎。
當入射光波長一定時,溶液的吸光度是吸光物質的濃度c及吸收介質厚度(吸收光程)的函數(shù)。
其常用表達式如下(式中ε為系數(shù)):
A=ε·c·l
紫外見分光光度計是基于紫外可見分光光度法的原理工作的常規(guī)分析儀器。根據(jù)光路設計的不同,紫外可見分光光度計可以分為單光束分光光度計、雙光束分光光度計和雙波長分光光度計。
制定依據(jù)
本規(guī)程主要參照國家計量檢定規(guī)程《JJG178-2007紫外、可見、近紅外分光光度計》、《JJF1641-2017紫外可見分光光度計型式評價大綱》及《中國藥典》2015年版四部指導通則“0401紫外-可見分光光度法”擬定。
項目及技術要求
波長準確度≤±1.0nm(紫外光區(qū)),≤±2.0nm(500nm附近);
波長重復性≤0.5nm。
基線平直度≤0.01吸光度。
0%線噪聲≤0.1%,100%線噪聲≤0.5%.
吸光度準確度應符合規(guī)定。
雜散光<0.8%。
光譜帶寬≤標示帶寬±20%。
吸收池配對誤差≤0.5%。
檢測結果處理
自檢結果全部符合技術要求者,即為合格,可以使用。若檢測結果不符合規(guī)定,應重新調(diào)試儀器再進行自檢,符合規(guī)定后方可使用。
分光光度法是根據(jù)被測物質分子對紫外、可見波段范圍單色輻射的吸收或反射強度來進行物質的定性、定量或結構分析的一種方法。
可見分光光度計的維護:
1、保護光源:光源燈有一定的壽命,儀器不工作時不要開燈,若工作間歇時間短,可不關燈。 一旦停機,則要待燈冷卻后再重新啟動,并預熱15min。
燈泡發(fā)黑或亮度明顯減弱或不穩(wěn)定時,就及時更換。 經(jīng)經(jīng)紫外光照射后形成結痕可用無水乙醇去除。
2、保證合適的工作環(huán)境溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素。
不適宜的溫度和濕度可引起機械部件的銹蝕,使金屬鏡面的光潔度下降,引起儀器機械部分的誤差或性能下降;造成光柵、反射鏡、聚焦鏡等光學部件的鋁膜銹蝕,產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等;甚至使儀器停止工作,從而影響儀器壽命。維護保養(yǎng)時應定期加以校正溫度和濕度。
3、定期清潔,保障環(huán)境和儀器內(nèi)衛(wèi)生條件,防塵。
儀器使用一定時間后,內(nèi)部會積累一定量的塵埃,建議由維修工程師或在工程師指導下定期開啟儀器外罩對內(nèi)部進行除塵工作,同時將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固,對光學盒的密封窗口進行清潔,必要時對光路進行校準,對機械部分進行清潔和必要的潤滑,最后恢復原狀,再進行一些必要的檢測、調(diào)校和記錄。
4、正確使用比色皿拿比色皿時,手指只能捏住比色皿的毛玻璃面,不要碰比色皿的透光面,以免沾污。
清洗比色皿時,先用水沖洗,再用蒸餾水洗凈。若被比色皿被有機物沾污,可用鹽酸-乙醇混合洗滌液(1:2)浸泡片刻,再用水沖洗。
每次做完實驗應立即洗凈比色皿。比色皿外壁的水用擦鏡紙或細軟的吸水紙吸干,以保護透光面。
可見分光光度計是一種結構簡潔、使用方便的單光束分光光度計,基于樣品對單色光的選擇吸收特性可用于對樣品進行定性和定量分析。
廣泛應用于醫(yī)藥衛(wèi)生、臨床檢測、生物化學、石油化工、環(huán)保監(jiān)測、食品生產(chǎn)和質量控制等部門作定性、定量分析,還可作為大、專院校和中學相關課程的教學演示和實驗儀器。
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